Méthode de localisation par immunofluorescence in vivo pour étudier la biodistribution des anticorps

Prenons un modèle murin de cancer du sein. Les tumeurs de la glande mammaire comprennent des cellules cancéreuses, des fibroblastes associés au cancer, des adipocytes, des cellules immunitaires et un système vasculaire tumoral.

Injecter par voie intraveineuse des anticorps spécifiques de la tumeur conjugués aux fluorophores.

Lorsqu’ils atteignent le système vasculaire tumoral, les anticorps se lient aux protéines transmembranaires spécifiques de la tumeur sur l’endothélium du vaisseau et les cellules cancéreuses voisines.

Isolez chirurgicalement la glande mammaire et immergez-la dans un milieu de congélation.

Obtenez des cryo-sections sur une lame et rincez avec un tampon pour éliminer le fluide de congélation.

Fixez les sections pour préserver l’architecture tissulaire. Appliquez un détergent pour améliorer l’immunocoloration et une solution bloquante pour empêcher la liaison d’anticorps non spécifiques.

Introduire un anticorps primaire spécifique des molécules d’adhésion sur l’endothélium du vaisseau sanguin, et un anticorps secondaire conjugué au fluorophore qui se lie à l’anticorps primaire, marquant le système vasculaire.

Ajoutez un support de montage sur la diapositive et pla