Évaluation de l’efficacité d’un composé d’essai antiviral au moyen d’un essai d’inactivation virale
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:41 min • July 8th, 2025
Prélever des tubes contenant un virus de l’hépatite C recombinant, ou une suspension du VHC contenant de l’ARN codant pour un rapporteur de luciférase sécrété.
Ajoutez un composé de test antiviral et un solvant dans les tubes de test et de contrôle négatif.
Les composés testés se lient aux glycoprotéines du VHC, inactivant le virus.
Après l’incubation, diluez les mélanges pour éviter les interactions composé-cellule dans les étapes suivantes.
Ajoutez ces mélanges dilués sur des monocouches d’hépatome favorisant la réplication du VHC. Couver.
Le VHC inactivé par un composé ne peut pas se fixer à des récepteurs de surface cellulaires spécifiques, tandis que les glycoprotéines actives du VHC se lient à ces récepteurs, facilitant ainsi l’attachement cellulaire.
Éliminer les VHC non adsorbés. Laver avec un tampon et ajouter du support. Incuber pendant une durée prolongée.
Le VHC lié est internalisé, libérant de l’ARN viral et conduisant à la synthèse des protéines virales et de la luciférase, sécrétées par la cellule.
Récupérez les surnageants de culture contenant de la luciférase. Centrifuger et ajouter un substrat de luciférase aux surnageants.
La luciférase oxyde le substrat en émett
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques