Un test pour déterminer l’initiation d’un biofilm polymicrobien sur des cellules infectées par le virus

Prenez une plaque multi-puits contenant des monocouches de cellules de mammifères.

Puits d’essai de semences avec le virus de l’herpès simplex. Les puits de contrôle sont dépourvus du virus.

Le virus se fixe à l’héparane sulfate de surface cellulaire et est internalisé par endocytose.

L’infection virale déclenche la sécrétion d’héparanase, qui clive le sulfate d’héparane et démasque des récepteurs fongiques spécifiques.

Co-incubez les cellules avec des tubes germinatifs de Staphylococcus aureus et de Candida albicans.

Dans les cellules infectées par le virus, la déplétion en sulfate d’héparane inhibe l’interaction bactérienne tout en favorisant les interactions entre les récepteurs fongiques, empêchant ainsi la co-localisation bactérienne-fongique.

Dans les cellules témoins, les bactéries interagissent avec le sulfate d’héparane, tandis que les champignons se lient aux récepteurs disponibles.

Cette co-localisation microbienne initie l’adhérence – la première étape de la formation du biofilm.

Après l’incubation, retirez les microbes non liés. Recouvrir d’un tampon de lyse, libérant des bactéries et des champignons dans le support.

Étalez le lysat cellulaire sur des plaques contenant