Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
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Prenez une suspension de virus de la grippe, contenant à la fois des souches de type sauvage et mutantes.
Une glycoprotéine d’enveloppe virale appelée hémagglutinine, ou HA, se lie à l’acide sialique à la surface de la cellule hôte, médiant l’entrée virale.
Ajoutez un anticorps neutralisant à des concentrations décroissantes qui se lie à l’HA, bloquant le site de liaison de l’acide sialique.
Les souches mutantes, porteuses de mutations dans l’HA qui aident à éviter la neutralisation des anticorps, sont appelées variantes d’échappement.
Injectez le mélange dans des œufs de poule embryonnés exempts d’agents pathogènes, en libérant les virus dans le liquide allantoïde, et incubez.
Lesvirus neutralisés par anticorps ne peuvent pas pénétrer dans les cellules de la membrane chorioallantoïde. Les virus mutants non neutralisés pénètrent dans les cellules, se répliquent et sont libérés dans le liquide allantoïde.
Récoltez la population virale contenant du liquide allantoïde.
Introduire un anticorps spécifique de l’HA à des concentrations décroissantes, qui neutralise les autres souches à l’exception des variants d’échappement.
Les variants d’échappement non neutralisés se lient aux cellule
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