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Immunologie
0 vues • 2:10 min • July 8th, 2025
Préparez un mélange de transfection en ajoutant un polymère cationique approprié et des vecteurs plasmidiques séparés pour les gènes d’anticorps à chaîne lourde et à chaîne légère.
Le polymère chargé positivement se lie aux plasmides chargés négativement, formant des complexes.
Ajoutez ce mélange de transfection à une plaque multi-puits contenant une culture de cellules rénales embryonnaires humaines dans un milieu sans sérum et incubez.
Les complexes pénètrent dans les cellules par endocytose, provoquant un gonflement et une rupture endosomiques, les libérant dans le cytoplasme.
Le polymère cationique produit des pores dans la membrane nucléaire, facilitant l’entrée des vecteurs et permettant leur transcription, suivie de leur traduction en protéines à chaînes lourdes et légères.
Ces protéines se déplacent vers le réticulum endoplasmique, où les protéines à chaîne lourde et légère sont dimérisées et liées de manière covalente par des liaisons disulfure, formant des anticorps.
Les anticorps se déplacent vers l’appareil de Golgi pour des modifications post-traductionnelles supplémentaires et sont emballés dans des vésicules pour une libération extracellulaire.
Prélevez le milieu con
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