Un test d’activation artificielle in vitro pour l’étude de l’activation des récepteurs Fc par des anticorps
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:32 min • July 8th, 2025
Prenez une suspension de cellules tueuses naturelles, ou NK.
Ajoutez des anticorps monoclonaux anti-CD20 et incuberez.
En l’absence de cellules cancéreuses cibles exprimant l’antigène CD20, la région Fc des anticorps se lie aux récepteurs FcγRIIIa à la surface des cellules NK.
Après l’incubation, ajoutez un milieu réfrigéré. Centrifugez et éliminez les anticorps non liés.
Ensuite, ajoutez des anticorps anti-chaînes légères κ humaines. Couver.
Ces anticorps secondaires se lient à la chaîne légère κ des anticorps monoclonaux.
La réticulation de l’anticorps imite la liaison de l’antigène cible, déclenchant une cascade de signalisation intracellulaire.
Cela provoque une stimulation artificielle des cellules NK en l’absence de cellules cancéreuses.
Les cellules NK activées subissent un réarrangement cytosquelettique et libèrent des granules cytotoxiques.
De plus, les cellules produisent des chimiokines et des cytokines.
Après la durée souhaitée, ajoutez un milieu réfrigéré pour arrêter la stimulation cellulaire.
Centrifugez le tube. Prélever le surnageant et la pastille cellulaire pour l’analyse en aval des fonctions des cellules NK effectrices médiées par des anticorps.
Distribuez 100
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques