Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:52 min • July 8th, 2025
Prenez l’embryon d’hippocampe de rat.
Ajouter la trypsine. Incuber pour médier la dégradation de la matrice tissulaire, relâcher les cellules de l’hippocampe.
Diluer avec un tampon. Incuber pour une digestion enzymatique continue avec de la trypsine.
Ensuite, transférez la masse tissulaire dans un tube contenant un support. Pipette à plusieurs reprises pour la dissociation mécanique en cellules uniques.
Cellules de semence sur des lamelles enrobées de poly-L-lysine à l’intérieur de plaques de culture.
couver. Les cellules de l’hippocampe adhèrent aux surfaces revêtues. Les neurones développent une lamelle et prolongent les névrites mineurs.
De plus, les neurites se développent avec des processus axonaux et dendritiques, formant un réseau neuronal.
Les neurones matures expriment des récepteurs excitateurs synaptiques, des récepteurs N-méthyl-D-aspartate ou NMDAR.
Après l’incubation, laver les lamelles avec un support.
Ajouter un sérum dilué pour un patient atteint d’encéphalite auto-immune. Les auto-anticorps se lient aux NMDAR neuronaux.
Lavez avec un tampon puis fixez les cellules.
Ajoutez des anticorps secondaires marqués au fluorophore qui se lient aux auto-anticorps liés au NMD
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