Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:48 min • July 8th, 2025
Commencez par les disques de papier filtre fonctionnalisés aux amines et plongez-les dans du glutaraldéhyde, un réactif de réticulation.
Le glutaraldéhyde réagit avec les groupes amines via une réaction amine-aldéhyde.
Placez les disques dans un tube. Ajoutez de l’eau, secouez et aspirez pour éliminer le glutaraldéhyde résiduel.
Après le séchage, introduire les anticorps de capture spécifiques du fragment d’immunoglobuline-G-Fc. Les groupes amines de ces anticorps interagissent avec les groupes aldéhydes sur les disques de papier, facilitant leur immobilisation covalente.
Laver pour éliminer les anticorps non liés et introduire un tampon de blocage pour empêcher la liaison non spécifique.
Ensuite, ajoutez un échantillon de test contenant des molécules d’immunoglobuline G sur le disque de papier. Les molécules d’immunoglobuline G interagissent avec les anticorps de capture.
Superposition avec des anticorps de détection spécifiques aux fragments IgG-Fc conjugués à la peroxydase de raifort qui interagissent avec l’immunoglobuline G pré-liée.
Laver pour éliminer les anticorps non liés et ajouter un mélange de substrat chromogène et de peroxyde d’hydrogène.
En présence de peroxyde d’hyd
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