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Immunologie
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Prenez une microplaque contenant le champignon Candida tropicalis.
Les cellules sécrètent Sap2, une enzyme protéolytique qui clive une glycoprotéine transmembranaire appelée Msb2, supprimant son domaine inhibiteur.
Cela induit le champignon à adhérer au fond et à se développer en une microcolonie de levures et de formes filamenteuses. Les cellules sécrètent des composants solubles et des biopolymères, initiant la formation de biofilms.
Ajoutez un échantillon de sérum contenant des anticorps spécifiques de Sap2 dans des puits sélectionnés et incubez dans l’obscurité.
Les anticorps se lient à Sap2 et neutralisent son activité, entravant la viabilité cellulaire et la maturation du biofilm.
Dans les puits non traités, le biofilm se transforme en un réseau dense de cellules et de matrice extracellulaire.
Aspirez le liquide, lavez le biofilm et faites sécher la plaque à l’air. Ajoutez un substrat chromogène et incubez dans l’obscurité.
Des cellules viables, utilisant des oxydoréductases liées à la membrane, réduisent le substrat en un produit coloré.
Transférez le surnageant coloré et lisez l’absorbance.
Une absorbance plus faible dans les puits traités au sérum indique une inhibition du
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