Production d’anticorps à partir d’une culture de prolifération discontinue de cellules de mammifères transfectées
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:29 min • July 8th, 2025
Commencez avec un flacon contenant des cellules de mammifères transfectées de manière stable dans un milieu sans sérum complété par un tensioactif non ionique pour empêcher l’agrégation cellulaire.
Ces cellules portent un génome modifié contenant des gènes intégrés à chaîne lourde et légère pour la production d’anticorps thérapeutiques.
Introduisez le tryptone, une source riche en nutriments de peptides et d’acides aminés essentiels au métabolisme cellulaire.
La cellule utilise ces acides aminés et peptides, et se multiplie, ce qui entraîne une prolifération qui favorise un rendement en anticorps plus élevé.
L’expression des gènes dans les cellules entraîne la production de polypeptides à chaîne lourde et légère.
Dans le réticulum endoplasmique, ces chaînes se replient et se dimérisent via des liaisons disulfure inter-chaînes, formant des anticorps thérapeutiques.
Dans l’appareil de Golgi, les anticorps subissent des modifications post-traductionnelles. Ils sont ensuite emballés dans des vésicules et libérés dans le milieu.
Incuber les cellules pendant une durée plus longue pour augmenter la production d’anticorps.
Lorsque la viabilité cellulaire commence à décliner, récoltez le su
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