Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 5:04 min • July 8th, 2025
Commencez par laver une section de cœur fixe dans un tampon de cacodylate de sodium qui stabilise la structure tissulaire. Immergez la section dans du tétraoxyde d’osmium pour colorer les lipides de la membrane.
Traiter avec de l’acétate de sodium pour maintenir un pH optimal pour la coloration.
Ajoutez de l’acétate d’uranyle pour colorer les biomolécules, offrant un meilleur contraste pendant la microscopie.
Déshydratez les tissus à des concentrations croissantes d’éthanol suivi d’acétone.
Incorporez le tissu dans une résine, obtenez des coupes ultrafines et transférez-les sur une grille de microscopie.
Introduisez du méta-periodate de sodium pour éliminer le tétraoxyde d’osmium, démasquant ainsi la protéine cellulaire.
Le composé oxyde également la glycoprotéine, créant des groupes aldéhydes réactifs, qui sont neutralisés par le traitement à la glycine.
Introduire un tampon de blocage, empêchant la liaison d’anticorps non spécifiques.
Ajouter des anticorps primaires spécifiques à la protéine cible, suivis d’anticorps secondaires biotinylés.
Ajoutez des points quantiques conjugués à la streptavidine qui se lient à la biotine.
Au microscope électronique, les régions marquées par de
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