Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:57 min • July 8th, 2025
Placez une boîte de culture avec des embryons de poisson-zèbre déchorionnés noyés dans de l’agarose sur une platine de microscope.
Prenez une solution de colorant contenant une faible concentration de conjugués d’anticorps, portant un anticorps rouge fluorescent et un anticorps anti-DeltaD.
Injectez la solution de colorant dans le ventricule du cerveau postérieur de l’embryon, en ciblant les progéniteurs de la glie radiale ou RGP qui se divisent activement.
Libérez l’embryon incrusté et récupérez-le dans un milieu riche en nutriments.
Au cours de la récupération, les conjugués fluorescents interagissent avec quelques molécules DeltaD du ligand Notch sur RGP, initiant l’internalisation et la formation d’endosomes.
La faible concentration conjuguée permet aux ligands DeltaD non liés d’interagir avec le récepteur Notch, activant la voie de signalisation Notch dans les RGP.
Après la récupération, transférez un embryon anesthésié avec de l’agarose dans une boîte en verre avec sa face dorsale vers le bas pour l’imagerie.
Effectuez une imagerie de fluorescence en accéléré pour capturer la division cellulaire, qui montre une partition asymétrique des endosomes fluorescents contenant DeltaD
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