Immunolocalisation des protéines d’arabinogalactane et des pectines dans les tissus végétaux

Prenez une lame avec des puits de réaction contenant de fines sections de différents tissus végétaux. Les tissus sont fixés et intégrés dans une résine pour l’immunomarquage.

Placez la lame à l’intérieur d’une chambre d’incubation sombre et humide pour éviter l’exposition à la lumière et l’évaporation du réactif au cours des étapes suivantes.

Introduire une solution de blocage pour éviter l’interaction d’anticorps non spécifiques.

Lavez pour éliminer l’excès de solution bloquante, puis ajoutez des anticorps primaires spécifiques de l’antigène et incuberez.

Les anticorps se lient à leurs antigènes cibles, à savoir les protéines arabinogalactanes et les pectines dans la paroi cellulaire.

Introduire des anticorps secondaires conjugués aux fluorophores, qui se lient aux anticorps primaires.

Lavez pour éliminer les anticorps non liés et appliquez un colorant fluorescent qui se lie à la cellulose, marquant la paroi cellulaire.

Ajoutez un support de montage et scellez-le à l’aide d’une lamelle.

Au microscope, la fluorescence du colorant et les anticorps liés aident à visualiser la cellulose dans les parois cellulaires végétales colocalisée avec des protéines d’arabinogalactane ou de la pe