Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 5:42 min • July 8th, 2025
Commencer avec une plaque de test passivée recouverte d’anticorps monoclonaux spécifiques de la glycoprotéine immunogène de la rage et d’un agent bloquant pour prévenir les interactions non spécifiques.
Introduire des vaccins antirabiques de référence et d’essai dilués en série avec une teneur en glycoprotéines décroissante. Scellez la plaque pour éviter toute contamination.
Au cours de l’incubation, les glycoprotéines immunogènes interagissent avec les anticorps monoclonaux enrobés via un site antigénique spécifique.
Après l’incubation, retirez le film, aspirez le surnageant et lavez la plaque.
Superposition d’anticorps monoclonaux spécifiques de la glycoprotéine conjugués à des enzymes qui se lient à un site antigénique différent sur la glycoprotéine, formant un immunocomplexe.
Ajouter une solution contenant un substrat et un chromogène. Lorsque le substrat interagit avec l’enzyme, il provoque l’oxydation du chromogène, modifiant la couleur de la solution.
Ajouter une solution d’arrêt pour inactiver les enzymes.
Mesurer l’absorbance et générer une courbe de référence à l’aide des valeurs de référence du vaccin.
Identifier la région où il existe une relation linéaire entre l’absor
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