Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:05 min • July 8th, 2025
Commencez par un tube transportant des particules liées à la membrane dérivées de cellules, appelées vésicules extracellulaires, ou VE, qui présentent des compositions antigéniques uniques.
Introduire des nanoparticules magnétiques, les MNP, contenant des anticorps de capture conjugués à des fragments Fab marqués par fluorescence.
Incuber pour faciliter l’interaction entre les MNP avec des antigènes spécifiques des VE, formant des complexes MNP-EV.
Ajoutez de l’immunoglobuline-G pour bloquer les sites de liaison Fc, puis introduisez des anticorps de détection marqués par fluorescence pour colorer d’autres antigènes sur les particules capturées.
Chargez ce mélange sur une colonne magnétique prélavée placée dans un séparateur magnétique.
Le champ magnétique retient les particules capturées par les MNP dans la colonne. Remplacez le tampon pour éliminer les anticorps non liés.
Récupérez la colonne du séparateur magnétique, éluez les particules capturées par MNP avec un tampon et fixez-les pour préserver leur intégrité structurelle.
Analysez les particules immunocapturées par cytométrie en flux ; les signaux de fluorescence distincts des antigènes colorés sont corrélés avec les caractér
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