Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:36 min • July 8th, 2025
Commencez par assembler une lame de test de microréseau prétraitée avec des points distincts contenant des anticorps de capture spécifiques aux protéines pour la détection de plusieurs protéines.
Chargez les dilutions de l’étalon protéique et des échantillons de sérum pré-dilués dans des puits séparés. Ces dilutions créent une gamme de concentrations de protéines pour une quantification précise.
Incuber pour faciliter les interactions protéine-anticorps. Lavez pour enlever les protéines non liées, démontez et séchez la lame.
Inverser la lame d’essai dans un appareil d’enclenchement contenant une lame de transfert réhydratée repérée avec des anticorps de détection biotinylés spécifiques aux protéines dans les mêmes positions que la lame d’essai.
Fermez l’appareil et appuyez pour enclencher les lames l’une sur l’autre. Cela facilite le transfert des anticorps de détection aux points correspondants sur la lame de test, minimisant ainsi la réactivité croisée.
Séparez les lames pour permettre l’interaction des anticorps de détection avec les protéines liées, formant des immunocomplexes.
Réassemblez la lame de test, rincez-la et introduisez de la streptavidine conjuguée à un fluorophore,
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