Mesure des taux d’immunoglobulines G par rapport à un vaccin test dans un sérum de souris

Commencer avec une plaque multi-puits recouverte d’un vaccin d’essai et bloquer les sites d’interaction non spécifiques.

Obtenez un échantillon de sérum d’une souris à qui on a injecté le vaccin testé.

Ce sérum contient des anticorps d’immunoglobuline G, ou IgG, qui reconnaissent le vaccin testé.

Dans les puits recouverts de vaccin, ajoutez des échantillons de sérum dilués en série.

Les IgG se lient au vaccin. Laver pour éliminer les anticorps non liés.

Ajoutez des anticorps secondaires conjugués à la peroxydase qui se lient aux IgG. Retirer les anticorps secondaires non liés.

Ajouter un substrat chromogène. La peroxydase interagit avec le substrat, générant un produit de couleur bleue.

Introduisez un acide pour arrêter la réaction. Le changement de pH rend la solution jaune.

À l’aide d’un spectrophotomètre, mesurez l’intensité de la couleur de chaque puits pour déterminer la concentration d’IgG dans l’échantillon de sérum.

Pour l’enrobage de l’antigène du test immuno-enzymatique, ou plaque ELISA, diluez l’antigène de la protéine HI à 10 microgrammes par millilitre avec une solution d’enrobage, et ajoutez 100 microlitres de l’antigène dilué par puits dans la plaque ELISA. Incuber l