Technique de modification de ligature de l'artère coronaire chez la souris

L'objectif général de cette procédure est de provoquer un infarctus du myocarde chez la souris. Cela est réalisé en pratiquant d'abord une incision cutanée le long de la ligne axillaire moyenne. Ensuite, le cœur est mis à nu par une thoracotomie gauche entre la troisième et la quatrième côte.

Ensuite, une ligature est réalisée au niveau du segment proximal de l'artère descendante antérieure gauche. Enfin, la cage thoracique est refermée et la souris est replacée dans une cage pour une récupération spontanée. En définitive, l'infarctus du myocarde peut être examiné par électrocardiographie ou échocardiographie.

La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle, car la ligature de l'artère coronaire près du ventricule gauche est difficile à apprendre. Une infection myocardique adéquate est assurée en plaçant la ligature juste en dessous de l'orifice du ventricule gauche. Cependant, il est important de ne pas percer l'oreillette gauche, car cela pourrait provoquer une hémorragie fatale.

Pour commencer la chirurgie, anesthésiez une souris âgée de six semaines ou plus par inhalation de 2 à 5 % de fluorure. Effectuez une pression sur l'orteil pour confirmer que l'animal est suffisamment anesthésié. Une fois que la souris est complètement sédée, transférez-la vers la zone chirurgicale et placez-la sur.

Placez-le dos sur un coussin chauffant. Pour maintenir une température constante de 37 degrés Celsius, fixez la souris à un dispositif d'intubation muni d'une chambre d'isoflurane, en utilisant un tube de 0,2 centimètre de diamètre et un mélange de 2 % d'isoflurane dans l'air. Insérez le tube dans la trachée de la souris.

Rasez la région précordiale du thorax du côté gauche, puis désinfectez la zone avec du Bétadine. Ensuite, passez de l'éthanol à 75 % trois fois, chaque fois. Appliquez également une pommade ophtalmique sur les yeux de la souris à l'aide de ciseaux stériles.

Réalisez une incision de 1,5 centimètre le long de la ligne axillaire moyenne. Cette approche facilite l'évaluation échocardiographique ultérieure. Des ciseaux sont utilisés plutôt qu'un scalpel afin d'éviter de blesser les tissus sous-jacents chez ces jeunes souris.

Ensuite, à l’aide d’une pince vasculaire à extrémité émoussée, dissocier et rétracter le muscle précordial de la paroi thoracique. Réaliser une thoracotomie gauche entre la troisième et la quatrième côte afin de visualiser la surface antérieure du cœur et du poumon gauche. Ensuite, rétracter la paroi thoracique à l’aide d’un rétracteur palpébral adapté.

Pour améliorer la visualisation et l'accès à l'aide de pinces à dents et de ciseaux à pointe émoussée, retirez le péricarde. Ensuite, préparez un fil de suture de calibre 7-0 et une aiguille pour la ligature de l'artère. Liguez l'artère coronaire gauche en passant l'aiguille sous l'artère, en laissant une bande de myocarde entre la ligature et l'artère.

Fermez la cage thoracique en plaçant deux points de suture sur les troisième et quatrième côtes. Diminuez la concentration d'isoflurane à 0,5 % et utilisez un fil d'éthylène cinq zéro pour fermer la peau en trois points de suture. Pour l'analgésie postopératoire, administrez une injection intrapéritonéale de 0,05 milligramme par kilogramme de buprénorphine.

Enfin, placer la souris dans une cage chauffée pour une récupération spontanée et fournir 0,6 milligramme par millilitre de buprénorphine dans l'eau de boisson. Surveiller attentivement la souris pendant les 24 premières heures suivant la chirurgie afin d'étudier les effets de l'infarctus du myocarde. La meilleure méthode invasive consiste à évaluer la fonction cardiaque par échocardiographie plusieurs jours après l'intervention chirurgicale.

En utilisant ce protocole, la ligature de l'artère coronaire gauche induit une ischémie myocardique affectant environ 40 % du ventricule gauche. Cela provoque des modifications significatives du segment ST à l'ECG, comme le montrent ces ECG représentatifs enregistrés avant et après la ligature. Avant l'infarctus du myocarde.

Les complexes QRS enregistrés par l'ECG sont étroits et courts. Après un infarctus du myocarde, une élévation marquée du segment ST apparaît, s'insérant dans les complexes QRS et rendant ceux-ci nettement plus larges et plus élevés que ceux enregistrés avant l'infarctus du myocarde. Pour étudier les effets de l'infarctus du myocarde, évaluer la fonction cardiaque par échocardiographie plusieurs jours après l'intervention chirurgicale d'infarctus.

On voit ici un enregistrement d'échocardiographie effectué chez des souris soumises à une intervention témoin. Contrairement aux bonnes contractions cardiaques observées chez les souris soumises à une intervention témoin, chez les souris atteintes d'infarctus du myocarde (IM).

72 heures après l'IM, une akinésie notable est observée au niveau de la paroi libre ventriculaire gauche en phase systolique. Après avoir visionné ce film, vous devriez avoir une bonne compréhension de ce modèle murin d'infarctus du myocarde, et vous devriez être en mesure de le mettre en place dans votre propre laboratoire.