Une méthode in vitro pour générer des échafaudages d’astrocytes dans des micro-colonnes d’hydrogel
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:49 min • July 8th, 2025
Prenez une boîte de culture contenant un bateau à micro-colonnes composé de tubes creux de diamètre défini.
Les micro-colonnes, constituées d’un hydrogel, sont remplies d’un tampon pour éviter le dessèchement.
Sous un stéréomicroscope, retirez le tampon et ajoutez une solution de collagène glacée, un composant de la matrice extracellulaire.
Introduisez un média le long du bord intérieur du plat pour maintenir l’hydratation de la colonne. Incuber dans des conditions physiologiques pour que le collagène se polymérise, formant un revêtement à l’intérieur des micro-colonnes.
Ajoutez des astrocytes à l’intérieur des micro-colonnes et incubez pour favoriser l’adhésion des astrocytes au collagène.
Ensuite, remplissez le plat avec le milieu et maintenez-le dans des conditions physiologiques.
En raison du diamètre étroit des micro-colonnes, les astrocytes acquièrent une morphologie bipolaire avec des processus s’étendant sur toute la longueur.
Au fil du temps, les astrocytes s’auto-assemblent pour former un échafaudage tridimensionnel contenant des faisceaux denses de processus astrocytaires.
L’échafaudage d’astrocytes enveloppé d’hydrogel est prêt pour les analyses en aval.
À l’intérieur d
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