Procédé d’isolement d’unités neurovasculaires à partir du cerveau de rat

Commencez avec un mortier de verre froid contenant du tissu cérébral cortical de rat, qui est la couche la plus externe du cerveau.

Ajoutez un tampon de microvaisseaux cérébraux ou BMB, contenant des inhibiteurs de protéase.

Maintenant, déplacez le pilon de haut en bas pour dissocier le tissu.

Cette agitation libère les unités neurovasculaires, ou VNU, comprenant les microvaisseaux, les péricytes, les neurones et les cellules gliales. Les inhibiteurs de protéases bloquent les protéases libérées, protégeant ainsi les microvaisseaux.

Transférez ce mélange dans un tube.

Ajouter une solution de polysaccharides denses. Utilisez un vortex pour mélanger uniformément la solution avec d’autres contenus.

centrifugeuse. Les polysaccharides denses permettent la sédimentation des NVU, qui sont plus denses que les débris tissulaires.

Jetez le surnageant et mettez à nouveau en suspension les NVU dans le BMB contenant un inhibiteur de protéase et une solution polysaccharidique.

Utilisez le vortex pour mélanger le contenu.

Répétez le processus de centrifugation. Jetez le surnageant pour éliminer tous les débris résiduels.

Suspendez à nouveau les NVU dans BMB et stockez-les pour une analyse plus app