photostimulation et enregistrements de neurones dans des tranches d’hippocampe de souris
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 3:05 min • July 8th, 2025
Prenez une tranche de cerveau de souris transfectée immobilisée dans une chambre d’enregistrement électrophysiologique perfusée avec de l’aCSF oxygéné.
Cette tranche contient les terminaisons axonales des neurones thalamiques exprimant des canaux ioniques sensibles à la lumière fusionnés à une protéine fluorescente.
Visualisez les axones des neurones thalamiques fluorescents et sélectionnez un neurone pyramidal.
Avancez une pipette enregistreuse contenant une électrode dans une solution intracellulaire vers le neurone sélectionné avec une légère pression positive.
La pression positive crée une fossette sur la membrane neuronale au contact.
Relâchez la pression pour former un joint à haute résistance.
Réglez le potentiel de membrane sur une valeur négative constante.
Appliquez une impulsion de pression négative pour rompre la membrane, ce qui permet d’obtenir une configuration à cellules entières.
Illuminez les terminaisons axonales, activant les canaux sensibles à la lumière et dépolarisant les membranes neuronales, déclenchant des potentiels d’action.
Des neurotransmetteurs excitateurs sont libérés, se liant aux récepteurs du neurone enregistré, provoquant un afflux de cations.
En
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