Utilisation de la réflectométrie spectrale pour déterminer les diamètres axonaux myélinisés dans une tranche de cerveau de souris fixe
Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:16 min • May 29th, 2025
Prenez un microscope confocal hyperspectral avec une source laser stabilisée configurée pour une large gamme spectrale afin de décoder la nanostructure de la gaine de myéline du tissu cérébral.
Utilisez un miroir de référence pour capturer le spectre de réflectance de base. Retirez le miroir et acquérez un spectre de décalage sombre pour la correction du bruit du détecteur.
Transférez une chambre avec une coupe de tissu cérébral fixe à la platine du microscope.
Alignez le plan focal sur la région tissulaire d’intérêt, en assurant une profondeur suffisante pour minimiser les interférences de l’interface verre-tissu.
La lumière laser est dirigée sur la gaine de myéline multicouche des axones.
Lorsque la lumière interagit avec la myéline, des réflexions partielles se produisent aux interfaces des couches, produisant des motifs d’interférence dus à des épaisseurs de couche variables et à des indices de réfraction.
Acquérir des images spectrales de ces modèles d’interférence.
Après correction de la ligne de base et analyse du signal, le spectre de réflectance révèle la périodicité du numéro d’onde, ce qui permet de déterminer les diamètres des axones myélinisés.
Montez un miroir de référence s
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