Encyclopédie des expériences JoVE
Neurosciences
0 vues • 4:17 min • August 7th, 2025
Fixez une souris anesthésiée dans un cadre stéréotaxique.
Désinfectez le cuir chevelu rasé, puis faites une incision médiane pour exposer le crâne.
Séchez le crâne et appliquez du peroxyde d’hydrogène pour améliorer la visibilité du bregma.
Localisez bregma et lambda, puis identifiez les sites cibles.
Percez soigneusement le crâne aux sites cibles.
Fixez la seringue remplie de virus à l’instrument stéréotaxique.
Le virus code pour Cas9 et un ARN à guide unique pour l’édition du génome dans les neurones du gyrus denté, ainsi qu’un rapporteur fluorescent pour marquer les neurones infectés.
Abaissez la seringue pour atteindre le gyrus denté, puis injectez lentement le virus pour assurer une distribution uniforme.
Soulevez progressivement la seringue et répétez l’injection à des coordonnées supplémentaires.
Faites une courte pause pour éviter le reflux, puis retirez l’aiguille lentement.
Répétez la procédure sur l’hémisphère opposé.
Enfin, suturez l’incision.
Le modèle est maintenant prêt pour d’autres études.
Rasez la tête d’une souris anesthésiée afin de vous préparer au site d’injection. Dirigez l’isoflurane à 4 % dans le cône nasal. Ensuite, placez la souris dans l’instrument stéréotaxique. In
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