Implantation de transmetteurs radiotélémétrie fournissant des données sur l'ECG, fréquence cardiaque, température centrale du corps et de l'activité des souris de laboratoire déplacement libre

L’objectif global de cette procédure est d’implanter un émetteur de télémétrie utilisé pour des mesures continues de la température corporelle centrale, des activités locomotrices et du biopotentiel à partir duquel la fréquence cardiaque, la variabilité de la fréquence cardiaque et les intervalles PQ et QT peuvent être établis chez des souris libres et non attachées. Pour ce faire, la souris doit d’abord être préparée à l’implantation quelques jours avant l’opération. Ensuite, les instruments de l’environnement de fonctionnement et l’émetteur télémétrique sont préparés.

Ensuite, l’émetteur télémétrique est implanté chirurgicalement dans la souris. Enfin, des soins postopératoires sont administrés à l’animal pour garantir sa guérison et sa survie. En fin de compte, les résultats montrent l’impact de nombreuses expériences biomédicales et de modifications génétiques sur la fréquence cardiaque à court et à long terme, la variabilité de la fréquence cardiaque, les intervalles QP et QT, la température corporelle centrale et l’activité locomotrice, ainsi que sur le rythme circadien de ces paramètres grâce à des mesures télémétriques chez des souris en mouvement libre.

Le principal avantage de la télémétrie par rapport aux méthodes existantes telles que les mesures chez les animaux de contention, attachés ou même isés, est que des données précises peuvent être obtenues sur des périodes de temps courtes, voire à long terme, chez des souris non contraintes et se déplaçant librement. Le jour de l’implantation, l’émetteur télémétrique est préparé sous une hotte à flux laminaire sur une paillasse désinfectée dans des conditions aseptiques. à l’aide d’instruments d’autoclave et de matériaux stérilisés. Pour commencer, retirez les émetteurs de leur emballage stérile et, à l’aide de ciseaux, raccourcissez les fils à une longueur appropriée à la taille de la souris. Pour la plupart des souris adultes, l’électrode rouge peut être raccourcie à environ 42 millimètres et l’électrode blanche ou incolore à une longueur d’environ 55 millimètres.

Retirez environ 20 millimètres de tube isolant de la partie distale de l’électrode rouge et 10 millimètres de l’électrode blanche ou incolore. Formez les parties distales de chaque électrode en boucle en fixant les extrémités avec de fines sutures en soie. Placez l’émetteur dans une solution saline chaude et stérile, prête à être implantée la veille de l’implantation.

Préparez la souris en l’anesthésiant dans une chambre en plexiglas avec 8 % de cevo de fluor. Lorsqu’il a perdu son réflexe d’écriture, fixez-lui un cône nasal avec trois à 4 % de fluor cevo. Capture. Rasez les poils sur la partie antérieure du cou et de l’abdomen.

Laissez l’animal se réveiller et retournez-le dans sa cage d’accueil le lendemain après avoir administré l’analgésie et anesthésié la souris, transférez-le dans un bain chaud chauffé sur une surface dans la zone chirurgicale. Appliquez une pommade sur les yeux de la souris et maintenez l’anesthésie à l’aide d’un masque nasal et de 3 à 4 % de fluor de seva. Veuillez consulter le protocole écrit pour plus de détails.

Les grêles désinfectent la peau précédemment rasée de la partie antérieure du cou et de la région abdominale de la souris. Faites ensuite une incision d’un à 1,5 centimètre de long dans la peau à partir de la partie inférieure du thorax le long de la ligne médiane de l’abdomen. Faites une petite incision dans le sens longitudinal au niveau de la partie antérieure du cou et creusez un tunnel sous-cutané du fil négatif de l’émetteur du thorax vers le cou.

Préparez la peau et les tissus sous-jacents pour faire de la place pour la fixation de la boucle de fil de l’électrode. Fixez la boucle de fil entre les muscles situés à droite de la trachée à l’aide de deux sutures fines en soie. Fermez ensuite la plaie dans le cou en couches avec six sutures O Vicryl.

Ouvrez la paroi abdominale au niveau de la lan alba et placez l’émetteur télémétrique dans la cavité abdominale. Suturez l’anse de fil de l’électrode positive à l’apophyse xiphoïde avec des sutures en soie de sorte qu’elle se trouve entre le foie et le diaphragme dans la région abdominale supérieure gauche. Pour prévenir l’infection et fournir du liquide, injectez un mélange de sul doin et de triméthoprime et de solution saline dans la cavité abdominale et fermez la peau abdominale pour le traitement de la douleur par voie sous-cutanée.

Administrez 0,1 milligramme par kilogramme et laissez l’animal récupérer sur la surface chaude de l’établi pendant deux heures. Les animaux sont surveillés de près et un soutien au rétablissement est fourni pendant quatre à 10 jours après l’opération, comme indiqué dans le protocole écrit. 10 jours après l’opération, retournez les animaux dans la colonie de souris pour au moins quatre semaines d’interaction sociale normale.

Pour lancer la collecte de données, touchez l’animal avec un aimant. Cela allumera l’émetteur. Une matrice d’échange de données collecte et envoie des signaux de données à l’ordinateur soit pour une durée spécifique à intervalles réguliers, soit en continu, et enregistre les données sur le disque dur de l’ordinateur car la portée et la qualité du signal émis dépendent fortement de la composition matérielle de la cage et de l’équipement environnant.

Placez la plaque réceptrice aussi près que possible de l’animal, par exemple sous la cage de l’animal. Utilisez le data quest, un logiciel de RT, pour coordonner la détection, la collecte, l’analyse et la présentation graphique des signaux d’un ou plusieurs animaux. Vérifiez que la configuration du système d’enregistrement et de transmission des données est correcte en prenant des mesures en temps réel en mode d’échantillonnage continu.

Une fois les données recueillies et stockées, tracez la liste et analysez-les pour une variété de paramètres différents tels que la fréquence cardiaque, la variabilité de la fréquence cardiaque, la température corporelle et l’activité locomotrice à l’aide du programme d’analyse, une impression brute d’une courbe ECG d’une souris consciente et du même animal sous anesthésie par inhalation avec du fluor cevo est présentée ici. La fréquence cardiaque est calculée automatiquement par le système de télémétrie. La séquence de trois secondes enregistrée sous anesthésie indique une fréquence cardiaque de 440 battements par minute.

La courbe enregistrée chez la souris consciente montre une fréquence cardiaque de 660 battements par minute, ce qui se situe dans la plage attendue pour la fréquence cardiaque. Au cours d’activités physiques modérées telles que le toilettage ou le fait de manger ici, la fréquence cardiaque, la température corporelle centrale et l’activité locomotrice ont été mesurées chez trois souris présentant des conditions corporelles différentes alors qu’elles étaient logées individuellement dans leurs cages domestiques sans aucune perturbation. La fréquence cardiaque a été enregistrée pendant 30 secondes toutes les cinq minutes.

La température corporelle centrale a été échantillonnée pendant 10 secondes toutes les cinq minutes, et l’activité locomotrice a été enregistrée en continu et stockée à des intervalles de cinq minutes. La souris saine présente un rythme circadien clair avec une augmentation normale des valeurs physiologiques et du comportement d’activité locomotrice pendant la phase sombre. En revanche, après une intervention chirurgicale majeure, la fréquence cardiaque a augmenté, en particulier pendant la phase de lumière du jour et l’activité locomotrice est déprimée.

La troisième souris souffrait d’une maladie tumorale chronique. Son rythme circadien de fréquence cardiaque et de température corporelle centrale semble aplati et l’activité locomotrice est diminuée. Dans cette expérience, 16 souris ont été soumises à 50 minutes d’anesthésie et l’impact à long terme des anesthésiques sur la fréquence cardiaque, la température corporelle centrale et l’activité locomotrice a été comparé aux moyens des valeurs télémétriques pour chaque animal ont été calculés séparément pour les phases nocturnes et diurnes.

Les valeurs normales ont été calculées comme moyennes pour les trois jours précédant l’anesthésie. Les valeurs delta sont les comparaisons entre les valeurs sombres et claires et les valeurs normales. Une fois que la chirurgie maîtrisée peut être effectuée en 35 à 45 minutes tout en tentant cette procédure, il est important de garder à l’esprit de maintenir une anesthésie adéquate, d’administrer des analgésiques efficaces, de prévenir les infections et de fournir du liquide.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’implanter cet émetteur télémétrique et comment obtenir des mesures fiables de valeurs physiologiques comme la fréquence cardiaque ou la température corporelle froide chez les souris de laboratoire.