T-labyrinthe alternance forcé et des tâches de discrimination gauche-droite pour l'évaluation de travail et de la mémoire de référence chez la souris

L'application modifiée Automatic teammates avec système de suivi est présentée. Cette application est constituée de voies en plastique blanc avec des parois hautes de 25 centimètres. Le MA est divisé en six zones par un fil automatique menant à la zone A. L'une d'elles est un compartiment STA.

S deux est une similarité entre les coéquipiers. A un et A deux sont respectivement le bras gauche et le bras droit. Les zones P un et P deux comparent les passages de connexion entre les zones A un ou A deux et A un, de sorte que la souris puisse retourner dans le compartiment statique.

Les portes s'ouvrent automatiquement vers le bas ici, dans ce film, à titre de démonstration, l'une des portes étant actionnée manuellement. Ces opérateurs améliorés nous permettent d'utiliser les micro-SSIS INB en physiologie moléculaire et en technique génique pendant la performance des coéquipiers. Le N, suivi d'un point, est associé à un distributeur, le point servant de récompense alimentaire : il active un flacon distributeur de nourriture, suivi de l'élimination du flacon usagé.

Vous pouvez observer la période expulsée du distributeur de nourriture sur le plateau alimentaire, puis rejetée sous le terrain. La souris est détectée par le capteur et enregistrée par un ordinateur. En pratique, le programme du système de suivi vidéo distribue automatiquement la période, de sorte que vous n'avez rien à faire jusqu'à la fin de la session. La caméra CCD est montée au-dessus de l'opérateur afin de permettre à l'ordinateur de capturer le comportement de la souris sous forme d'image, tandis que l'appareil Parus est éclairé à 100 lux par centimètre carré.

Nous recommandons que l'Appell soit placé dans une pièce insonorisée afin de réduire les bruits ambiants provenant des salles environnantes. Commencer une semaine avant les séances d'exploitation à mesurer quotidiennement la masse corporelle et attribuer à chaque souris un score de vitesse pour l'habituer à la période d'entraînement, ainsi qu'à un régime alimentaire standard sur une série de plaques destiné aux cellules CHO, afin de maintenir 80 % à 85 % du poids corporel obtenu en conditions d'alimentation libre tout au long de l'expérience. Le jour suivant l'atteinte du poids cible, transférer toutes les cages contenant les souris dans la pièce insonorisée au moins 30 minutes avant le début du premier essai, afin d'éviter toute exposition à la lumière directe. Éviter de placer les cages sur l'étagère supérieure en raison de l'éclairage récent.

Avant de placer votre souris dans les opérateurs, vous devez d'abord essuyer les opérateurs avec une languette, afin d'ouvrir votre eau hypochloreuse super pour éviter un biais fondé sur les indices ProAct. Six esprits proches par souris sont ajoutés aujourd'hui au centre, conformément aux six commandements et répartis en une période dans chaque plateau des distributeurs de nourriture. Placez toutes les souris individuellement dans des cages au sein du Perus et laissez-les en liberté.

Explorez les Perus avec tous les dos ou avant 30 minutes. Un jour après l'arbitrage, les souris subiront un prélèvement sanguin quotidien avec la porte fermée et le dépôt de palettes dans le train alimentaire. Placez la souris dans le bras gauche si la souris consomme la palette pendant cinq minutes AOPs, transférez la souris dans le bras droit et recommencez l'entraînement préliminaire. Cette procédure d'entraînement est répétée jusqu'à cinq fois par jour et poursuivie jusqu'à ce que la souris les ait consommées.

Plus de 80 % des périodes, on a placé la souris dans le compartiment statique. Les portes sont ouvertes et la souris choisit en priorité un bras, puis revient d'elle-même au compartiment de départ. Ensuite, on donne à la souris le choix par la suite.

Maintenant, le bras opposé au quatrième bras est mordu. Ensuite, la souris retourne d'elle-même dans la boîte statique et la procédure est répétée. Ceci est répété jusqu'à 10 fois par jour chez les souris témoins et expérimentales.

Ces critères permettent de tester davantage les souris dans la tâche de rétention différée en insérant des retards de 3, 10, 30 ou 60 secondes entre le premier choix et les noms du choix complet. Voici une feuille de travail pour enregistrer les informations relatives à cette tâche : identifiant unique de la souris, génotype, motif de perforation d'oreille et espace pour noter les résultats manuellement dans le programme Land. Sélectionnez l'identifiant du projet de saisie en ligne Plug TM.

Par exemple, session de saisie du nom de la ligne principale. Par exemple, la date de test, les paramètres d'entrée tels que la formule avec l'image capturée par la caméra C, la durée d'acquisition et la taille de l'opérateur. Saisir ensuite l'identifiant de l'essai.

Par exemple, associez le numéro de station au nom du fichier de référence ou à cette tâche, et sélectionnez le numéro correspondant dans le menu déroulant, ainsi que le délai maximal avant erreur de la machine et la durée de pénalité. Ensuite, réglez les valeurs de netteté et de contraste sur l'image capturée, suivies par une image binaire spéciale courte. Enfin, après avoir vérifié que les régions d'intérêt appropriées sont bien collectées, configurez le motif complet afin que le programme soit prêt pour les tests.

Saisissez délicatement la souris et placez-la dans le compartiment de départ. Cliquez sur le bouton de démarrage pour lancer le choix forcé. Une fois le test commencé, vous pouvez observer des images en direct et des images binaires ainsi que des lésions dans l'intestin.

Dans ce cas, l'appareil a été placé dans le bras droit aujourd'hui, la souris est entrée dans la zone et la porte était ouverte. Un choix complet vers le bas a déclenché la période qui a été délivrée au bras gauche. Puisque la souris est entrée dans le bras gauche, la réponse a été marquée comme correcte.

Le résultat des réponses est affiché dans la fenêtre inférieure du moniteur. Ici, les exemples d'images en direct rejouées à l'esprit montré indiquent que les mots sont fermés et que le cycle jaune indique la période de croisement. Une souris est soumise à 10 essais consécutifs lors d'une séance par jour.

La souris est entraînée quotidiennement pour atteindre en moyenne 80 % de réponses correctes ; le pourcentage de réponses correctes, la latence de réponse, le temps nécessaire pour terminer la session, la distance parcourue jusqu’au niveau et le nombre d’erreurs de rémission sont calculés automatiquement par le programme. Après chaque session, l’animal est replacé dans sa cage d’origine. Nettoyez la plaque du distributeur, essuyez la plateforme avec une serviette en papier, puis rincez avec de l’eau propre pour éviter tout biais lié aux odeurs résiduelles. Si les souris témoins et expérimentales sont comparées, et si vous souhaitez tester davantage les souris dans une tâche de rétention différée, sélectionnez simplement le fichier différé dans les paramètres du programme et commencez la session suivante.

La procédure est quelque peu similaire à celle de la tâche de post-épreuve, mais soit du bras gauche au bras droit, c'est toujours Ed comme dans la tâche de rétention post-épreuve et le programme applicatif. Sélectionnez un nom de fichier différent pour cette tâche et le nom de la souris dans le menu déroulant, placez une souris dans le compartiment de départ. Cliquez sur le bouton de démarrage et le choix principal commence maintenant.

Dans ce cas, la sélection du bras s'effectue toujours à l'aide de la période. Une souris subit habituellement de 10 à 20 essais consécutifs par séance et par jour. Les souris sont entraînées quotidiennement jusqu'à atteindre un critère correspondant à une moyenne de 80 % de réponses correctes.

Les résultats sont automatiquement calculés après les souris. Selon ces critères, des séances supplémentaires avec les souris peuvent être réalisées afin d'évaluer la mémoire de rétention, en insérant un délai entre les séances, ou d'évaluer l'activité comportementale. En changeant la position du bras vers le bras opposé au cours des essais et des séances, la vidéo a été corrigée par une personne selon ce processus par alpha hétéro M complexe et contrôlé par le type LI dans la tâche d'automatisation forcée.

Le résultat démontre que la mémoire de travail est intacte chez les souris mutantes présentant un déficit du CBR dans la tâche du disque, car ces souris mutantes parviennent à réaliser cette tâche sans aucun problème et, même après un délai d'un mois, elles ne montrent aucun déficit dans l'apprentissage du bus. Toutefois, les mutantes présentent une performance altérée. Le test des compagnons d'équipe est l'un des tests comportementaux les plus utilisés pour évaluer la mémoire de marche et la mémoire de référence.

Chez le rongeur, nous avons amélioré l'appareil de test, qui présente plusieurs avantages. Premièrement, les portes coulissantes s'ouvrent automatiquement et la souris peut entrer seule dans la boîte S après chaque essai. Cette automatisation du MA réduit le temps et les efforts nécessaires pour actionner manuellement les cloisons et les distributeurs de nourriture.

Dans notre laboratoire, une expérience permet à jusqu'à quatre collaborateurs d'opérer simultanément. Deuxièmement, l'appareil nous permet d'utiliser des techniques nécessitant des branchements sur la tête, comme celles utilisées en microdialyse in vivo, en électrophysiologie in vivo ou en optogénétique in vivo, car les portes coulissantes s'ouvrent vers le bas. Enfin, le labyrinthe est conçu de manière à ce que la souris ne puisse se déplacer que vers l'avant et non vers l'arrière, ce qui peut faciliter un déplacement fluide de l'animal.

Dans cette vidéo, nous avons présenté cet appareil modifié d'équipe automatique et nos protocoles ici est le Dr. Hiro Pash. Dans notre laboratoire, Hirotaka démontrera les protocoles en utilisant cet appareil automatisé modifié dans ce film. Hirotaka, quelle a été votre première impression du test des coéquipiers utilisant cet appareil amélioré ?

Mon première impression était que l'appareil et le logiciel étaient très faciles à manipuler et que le test pouvait être réalisé sans difficulté. Pensez-vous que n'importe qui puisse manipuler ces opérateurs et ce programme, ou une formation particulière est-elle nécessaire ? J'accepte partiellement.

Tout le monde peut apprendre à manipuler les opérateurs. Aucune formation particulière n'est requise pour effectuer les procédures de test. Existe-t-il des conseils ou des points auxquels vous devez prêter attention lors de l'exécution du test ?

Oui. Je veille attentivement à maintenir la motivation liée à la nourriture distribuée en quantité importante en contrôlant quotidiennement le poids corporel. Des différences individuelles en matière de motivation peuvent entraîner des variations dans la performance des coéquipiers.