Name: Dynamique présynaptique de la dopamine dans le striatum avec des tranches de cerveau de voltampérométrie cyclique à balayage rapide (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: Découvrez la voltampérométrie cyclique à balayage rapide pour mesurer la dynamique présynaptique de la dopamine dans des tranches de striatum. Cette méthode permet d'étudier la libération et la recapture de la dopamine en temps réel.

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<li>Zhang, L., Doyon, W. M., Clark, J. J., Phillips, P. E., Dani, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controls+of+tonic+and+phasic+dopamine+transmission+in+the+dorsal+and+ventral%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Controls of tonic and phasic dopamine transmission in the dorsal and ventral.</a> 76, 396-404 (2009).</li>
<li>Paredes, D., Grnaholm, A. C., Bickford, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+NGF+and+BDNF+on+baseline+glutamate+and+dopamine+release+in+the+hippocampal+formation+of+the+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of NGF and BDNF on baseline glutamate and dopamine release in the hippocampal formation of the adult rat.</a> Brain. Res. 11141, 56-64 (2007).</li>
<li>Goggi, J., Puller, I. A., Carney, S. L., Bradford, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signalling+pathways+involved+in+the+short-term+potentiation+of+dopamine+release+by+BDNF%5BTitle%5D)+AND+%22Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Signalling pathways involved in the short-term potentiation of dopamine release by BDNF.</a> Brain. Res. 968, 156-161 (2003).</li>
<li>Cheer, J. F., Wassum, K. M., Heien, M. L., Phillips, P. E., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabinoids+enhance+subsecond+doapmine+relese+in+the+nucleus+accumbens+of+awake+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cannabinoids enhance subsecond doapmine relese in the nucleus accumbens of awake rats.</a> J. Neurosci. 24, 4393-4400 (2004).</li>
<li>Phillips, P. E., Stuber, G. D., Heien, M. L., Wightman, R. M., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subsecond+dopamine+release+promotes+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Subsecond dopamine release promotes cocaine seeking.</a> Nature. 422, 614-618 (2003).</li>
<li>Robinson, D. L., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+of+dopamine+concentration+transients+increases+in+dorsal+and+ventral+striatum+of+male+rats+duing+introduction+of+conspecifics%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Frequency of dopamine concentration transients increases in dorsal and ventral striatum of male rats duing introduction of conspecifics.</a> J. Neurosci. 22, 10477-10486 (2002).</li>
</ol>

Pas de conflits d&#39;intérêt déclarés.

Le protocole présenté ici montre comment préparer et utiliser des tranches de cerveau de souris pour des expériences FSCV coronale. Bien que cette méthode est spécifique à l&#39;obtention et la mesure de la dynamique de la dopamine, d&#39;autres neurotransmetteurs tels que l&#39;adénosine, le peroxyde d&#39;hydrogène, la noradrénaline et la sérotonine ont été suivis in vivo ou in vitro avec FSCV 3, 8 - 11. FSCV peut être utilisé pour surveiller certains de ces autres neurotransmetteurs par d...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Société </td><td> Numéro CAS </td></tr><tr><td width="274"> Réactif </td><td></td><td></td></tr><tr><td width="274"> Chlorure de Potassium </td><td> Fisher </td><td width="142" valign="top"> 7447407 </td></tr><tr><td width="274"> Le chlorure de sodium </td><td> EMD Chemicals </td><td width="142" valign="top"> 7647145 </td></tr><tr><td width="274"> Le chlorure de magnésium </td><td width="194" valign="top"> Fisher </td><td width="142" valign="top"> 7791186 </td></tr><tr><td width="274"> Le chlorure de calcium </td><td width="194" valign="top"> Fisher </td><td width="142" valign="top"> 10035048 </td></tr><tr><td width="274"> Le bicarbonate de sodium </td><td width="194" valign="top"> EMD Chemicals </td><td width="142" valign="top"> 144558 </td></tr><tr><td width="274"> Phosphate de sodium dibasique </td><td width="194" valign="top"> EMD chimiques </td><td width="142" valign="top"> 7558794 </td></tr><tr><td width="274"> D-glucose </td><td width="194" valign="top"> Fisher </td><td width="142" valign="top"> 50997 </td></tr><tr><td width="274"> L&#39;acide ascorbique </td><td width="194" valign="top"> Fisher </td><td width="142" valign="top"> 50817 </td></tr><tr><td width="274"> Saccharose </td><td width="194" valign="top"> Fisher </td><td> 57501 </td></tr><tr><td width="274">&nbsp;</td><td width="194" valign="top">&nbsp;</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td width="274"> Matériaux </td><td width="194" valign="top"> Vendeur </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td width="274"> La fibre de carbone </td><td> Goodfellow Oakdale, PA </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Capillaires en verre </td><td> AM Systems Carlsborg WA. </td><td> 602000 </td></tr><tr><td width="274"> Fil d&#39;Argent </td><td> A-M Systems Carlsborg WA. </td><td> 787000 </td></tr><tr><td width="274"> Électrode de tungstène stimulante </td><td> Plastics One, Roanoke, Virginie </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Fil de platine </td><td></td><td></td></tr><tr><td width="274"> Le plomb métallique </td><td> Electronics Squires, Corneille, OU </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Adhésif Loctite 404 instantanée </td><td> Hankal Corp Rocky Hill CT. </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Lame de rasoir </td><td> Mondiale de précision Instruments Inc Floride. </td><td></td></tr><tr><td width="274"> BD épinière aiguille </td><td> BD Medical Systems, Franlin Lake, NJ </td><td> REF 405234 </td></tr><tr><td width="274"> Lame chirurgicale </td><td> Plume de rasoirs de sûreté Co. LTD. Le Japon </td><td></td></tr><tr><td width="274"></td><td></td><td></td></tr><tr><td width="274"> Logiciel </td><td width="194" valign = &quot;top&quot;&gt; Vendeur </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td width="274"> Logiciel de TH </td><td> ESA Inc, Chelmsford, MA </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Instrument </td><td width="194" valign="top"> Vendeur </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td width="274"> Chambre d&#39;enregistrement de submersion </td><td> Personnalisé scientifique, Denver, CO </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Sectionneur de relance Neorolog </td><td> Digitmeter, Hertfordshire, Angleterre </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Régulateur de température automatique </td><td> Warner Instrument Corporation </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Microscope (SZX7) </td><td> Olympus </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Microscope </td><td> Fisher </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Système de sectionnement Vibratome 3000 </td><td> Saint-Louest, MO. </td><td></td></tr><tr><td width="274"> Pompe à perfusion </td><td> Watson Marlow Limited, Falmouth Cornouailles - Angleterre </td><td> H110708 </td></tr><tr><td width="274"> Micropipette extracteur </td><td> Narishige, Tokyo, Japon </td><td></td></tr><tr><td width="274"> ChemClamp potentiostat </td><td> Sociétés Dagan, Minneapolis, MN. </td><td></td></tr></tbody></table>

dynamique présynaptique de la dopamine dans le striatum avec des tranches de cerveau de voltampérométrie cyclique à balayage rapide

Presynaptic Dopamine Dynamics in Striatal Brain Slices with Fast-scan Cyclic Voltammetry

Des recherches approfondies ont porté sur la dopamine, un neurotransmetteur en raison de son importance dans le mécanisme d&#39;action de l&#39;abus des drogues (cocaïne et d&#39;amphétamines par exemple), le rôle qu&#39;elle joue dans les maladies psychiatriques (schizophrénie et de trouble d&#39;hyperactivité avec déficit de l&#39;attention), et son implication dans dégénératives troubles comme le Parkinson et la maladie de Huntington. Sous des conditions physiologiques normales, la dopamine est connue pour réguler l&#39;activité locomotrice, la cognition, l&#39;apprentissage, affectent émotionnel, et la sécrétion d&#39;hormones neuroendocrines. Une des plus grandes densités de neurones dopaminergiques est dans le striatum, qui peut être divisé en deux régions distinctes neuroanatomiques connu comme le noyau accumbens et le noyau caudé-putamen. L&#39;objectif est d&#39;illustrer un protocole général pour la voltamétrie cyclique tranche de balayage rapide (FSCV) dans le striatum de souris. FSCV est une technique bien définie électrochimique fournissant l&#39;occasion de mesurer la libération de dopamine et de l&#39;absorption en temps réel dans drégions du cerveau iscrete. Microélectrodes en fibre de carbone (diamètre de ~ 7 pm) sont utilisés dans FSCV pour détecter l&#39;oxydation de dopamine. L&#39;avantage d&#39;utiliser des analyses pour détecter FSCV dopamine est sa résolution temporelle accrue de 100 millisecondes et une résolution spatiale de moins de dix microns, fournissant des informations complémentaires à la microdialyse in vivo.

L&#39;utilisation de voltampérométrie cyclique balayage rapide pour mesurer la dynamique évoquée électriquement présynaptique de la dopamine dans le striatum des tranches de cerveau.

Dynamique présynaptique de la dopamine dans le striatum avec des tranches de cerveau de voltampérométrie cyclique à balayage rapide

Des recherches approfondies se sont penchées sur le neurotransmetteur dopamine en raison de son importance dans le mécanisme d'action des drogues d'abus (par exemple, la cocaïne et ...

L'objectif général de cette procédure est d'illustrer un protocole général pour la télémétrie à balayage rapide par tranches en voltammétrie cyclique. Cela est réalisé en préparant d'abord le tissu cérébral pour des coupes coronales. Ensuite, des électrodes sont placées sur la région cérébrale discrète d'intérêt.L'étape suivante consiste à appliquer une tension sous forme d'onde triangulaire via l'électrode afin de détecter la dopamine. Enfin, un agent pharmacologique d'intérêt est appliqué sur la tranche de cerveau et son effet sur la dynamique présynaptique de la dopamine est observé. En définitive, ce protocole met en évidence des modifications de la dynamique présynaptique de la dopamine, telles que la libération de dopamine induite et les taux de captation de la dopamine par voltampérométrie cyclique rapide.Bien que cette méthode puisse fournir des informations sur la dynamique de la dopamine présynaptique, elle peut également être appliquée à d'autres systèmes, y compris des animaux et des neurotransmetteurs, tels que les rats et les mouches drosophiles, ainsi que la sérotonine et la norépinéphrine. La démonstration de la procédure sera effectuée par Francis Mena, MEA Khalid

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Découvrez la voltampérométrie cyclique à balayage rapide pour mesurer la dynamique présynaptique de la dopamine dans des tranches de striatum. Cette méthode permet d'étudier la libération et la recapture de la dopamine en temps réel.

Dynamique présynaptique de la dopamine dans le striatum avec des tranches de cerveau de voltampérométrie cyclique à balayage rapide (Vidéo) | JoVE Journal

Dynamique présynaptique de la dopamine dans le striatum avec des tranches de cerveau de voltampérométrie cyclique à balayage rapide

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