Progressive-ratio de répondre pour l'alimentation riche en graisse et en sucre Palatable chez la souris

Les détails présent rapport le protocole utilisé pour mesurer les effets de récompense de haute teneur en graisses des aliments chez les souris en utilisant une tâche progressive rapport conditionnement opérant.

Le but de l’expérience suivante est d’entraîner et de tester des souris dans une tâche motivée par la nourriture en utilisant un programme de renforcement à rapport progressif. Ceci est réalisé en limitant d’abord l’alimentation des souris à 60 à 70 % de l’apport alimentaire Ad Liam à une réduction stable de 5 à 10 % du poids corporel. Pour améliorer l’acquisition d’un comportement de pression à levier motivé par la nourriture, les souris sont ensuite entraînées à la presse à levier pour une récompense alimentaire riche en graisses et en sucre dans un rapport fixe, en utilisant une procédure de mise en forme automatique.

Miser s’est ensuite entraîné à répondre pour la nourriture sur des calendriers de renforcement plus complexes, y compris le rapport fixe cinq, puis enfin sur la tâche du rapport progressif, qui fournit une mesure fiable des effets gratifiants de la nourriture. Ensuite, après une performance stable sur le schéma de rapport progressif, ces souris sont soit privées de nourriture pendant 12 à 24 heures, soit reçoivent une injection intrapéritonéale d’agents rétiques pour valider les altérations du comportement motivé par la nourriture sur le schéma de renforcement à rapport progressif. Les résultats de cette expérience montrent que la privation de nourriture augmente le comportement motivé par la nourriture, tandis que l’administration de l’hormone rétique leptine diminue le comportement motivé par la nourriture pour des récompenses alimentaires riches en graisses et en sucre.

Les tâches de conditionnement supérieur fournissent un moyen utile d’évaluer les effets gratifiants et motivants de différents stimuli et comportements. La tâche du rapport progressif est un programme de renforcement bien validé qui a été largement utilisé pour évaluer l’effet gratifiant de la drogue ou de l’abus et des récompenses naturelles telles que la nourriture, bien que plus couramment utilisé dans les études rouges, l’application des tâches de l’opéra du rapport progressif aux souris est devenue de plus en plus importante avec la génération croissante de modèles de souris génétiquement modifiés. En particulier, l’utilisation de modèles murins dans la recherche sur l’obésité et la reconnaissance que les effets gratifiants des aliments riches en calories et appétissants contribuent de manière significative à la suralimentation et à l’obésité ont mis en évidence la nécessité de mesurer la récompense alimentaire chez la souris.

Ici, nous expliquons et discutons des méthodes utilisées pour entraîner et tester les souris à la presse hépatique pour un aliment riche en graisses et en sucre acceptable sur un programme de renforcement progressif avant de commencer. Le protocole garantit que toutes les procédures impliquant l’utilisation d’animaux ont été approuvées par le service de protection des animaux de l’établissement. En comité d’utilisation, il est recommandé de tester dans la phase sombre du cycle d’obscurité claire si nécessaire.

Acclimatez les souris à un cycle d’obscurité inversé pendant sept à 10 jours. À ce stade, les souris ont un accès ad libitum à la nourriture standard et à l’eau après cette période d’acclimatation de 10 jours. Les souris sont logées individuellement et limitées en nourriture en fournissant 60 à 70 % de leur apport alimentaire ad libitum jusqu’à ce qu’elles atteignent 90 à 95 % de leur poids corporel d’alimentation libre.

Cela facilite l’acquisition de la presse à la réponse des souris quotidiennement. Une fois que la perte de poids est de 5 à 10 %, la nourriture quotidienne allouée est ajustée pour stabiliser les poids corporels inférieurs pour le reste de la période d’entraînement trois jours avant la première séance d’entraînement, transportez les souris dans leurs cages domestiques jusqu’à la salle d’essai, puis retirez chaque souris de sa cage une par une. et manipulez la souris pendant deux à trois minutes. Après la manipulation, retournez la souris dans la cage domestique, acclimatez-la à la pièce et manipulez-la pendant trois jours consécutifs la veille du début de l’entraînement.

10 à 15 granulés riches en matières grasses et en sucre sont placés dans la cage domestique pour éviter l’influence potentielle de la nourriture. Néophobie sur la performance opérante, 20 milligrammes de granulés alimentaires de précision riches en matières grasses, riches en sucre et sans poussière contenant 49 % de vache tueuse comme graisse sont utilisés ici. Chaque chambre opérante de souris est logée à l’intérieur d’une cabine d’atténuation du bruit avec ventilateur de ventilation.

Les chambres opérantes de la souris sont équipées de deux leviers rétractables ultra légers positionnés de part et d’autre du récipient alimentaire. Une lumière de stimulus est située au-dessus de chaque levier et il y a une lumière de maison en haut de la cage. Le distributeur d’appel est situé à l’extérieur de la chambre.

Les chambres sont connectées à un ordinateur PC avec le logiciel Med PC four via une armoire d’interface de commande intelligente. Les souris sont introduites dans la chambre opérante. Le paradigme de la formation initiale consiste en un programme de renforcement à rapport fixe, dans lequel une presse à levier unique déclenche la distribution d’une pastille de nourriture dans le récipient.

Un seul levier est désigné comme actif et déclenche la livraison d’une récompense alimentaire. L’attribution des leviers droit et gauche est contrebalancée entre les souris. La formation nécessite également une procédure de mise en forme dans laquelle des granulés d’aliments broyés sont placés sur le levier pour améliorer le comportement de pression du levier.

Au cours de cette formation initiale, une réponse active du levier déclenche la livraison de la récompense alimentaire et il n’y a pas de délai entre l’appui sur le levier et la livraison de la nourriture. Une fois que les souris ont appris à appuyer sur le levier pendant cinq secondes, un délai d’attente est déclenché pendant lequel une pression supplémentaire n’entraîne pas la livraison d’une pastille. La période d’attente permet aux souris de consommer la pastille.

Des délais d’attente plus longs peuvent être utilisés si nécessaire après le délai d’attente en appuyant sur le levier actif. Une fois de plus, il en résulte la libération d’une pastille de nourriture à raison fixe d’un rapport de cinq secondes. La séance d’entraînement au temps mort dure une heure ou lorsque 50 granulés ont été livrés.

L’opéra et l’entraînement se poursuivent pendant sept à 10 jours jusqu’à ce que l’acquisition de la nourriture soit maintenue et que les souris répondantes présentent une discrimination égale ou supérieure à trois contre un pour le levier actif par rapport au levier inactif et obtiennent une récompense égale ou supérieure à 20 par session. Au cours de trois sessions consécutives, les critères d’acquisition sont réputés avoir été atteints. Les souris qui n’atteignent pas les critères d’acquisition dans la période de sept à 10 jours suivent un entraînement supplémentaire pendant cinq à sept jours supplémentaires.

Les souris sont exclues des tests lorsqu’il n’y a pas de progrès au cinquième jour d’entraînement. Il est important de garder à l’esprit qu’une altération de l’acquisition opérante peut être le résultat de certaines interventions pharmacologiques et génétiques et doit donc être documentée. Après trois séances successives d’obtention d’un nombre égal ou supérieur à 20 granulés, le calendrier est passé au protocole FR cinq T oh cinq secondes dans lequel cinq pressions actives déclenchent la livraison du granulé alimentaire.

L’entraînement sur le programme FR cinq T oh cinq secondes dure environ trois à cinq jours jusqu’à ce que la réponse soit stable. Le maître s’est ensuite entraîné au programme de renforcement à rapport progressif. Le barème du taux de réponse lors des tests de RP peut être calculé selon Richardson et Roberts, où R est égal au nombre de récompenses alimentaires déjà gagnées, plus un.

Ainsi, le nombre de réponses nécessaires pour gagner une récompense alimentaire suit l’ordre suivant l’ordre : 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95, etc. Le rapport final complété est le point de rupture. La séance de relations publiques dure au maximum une heure, sans appuyer sur le levier dans une période de 10 minutes.

Entraîne la fin de la session. La performance sur le calendrier de renforcement RP est considérée comme stable lorsque le nombre de récompenses gagnées dans une session d’une heure ne s’écarte pas de plus de 20 % pendant au moins trois jours consécutifs pour valider la réponse opérante maintenue de la nourriture dans la tâche de RP, la réponse au point d’arrêt suite à des manipulations connues pour moduler la récompense alimentaire sont évaluées. Un test relativement facile à réaliser est la privation de nourriture, qui augmentera l’état de motivation de la souris pour la nourriture et augmentera ainsi les points de rupture.

Les souris sont d’abord testées dans la tâche PR pendant une période d’alimentation ad liberton jusqu’à ce que des performances de base stables soient atteintes le lendemain du dernier jour de référence. La nourriture est retirée de la cage domestique et les souris sont ensuite testées dans la tâche PR 12 à 24 heures après le début du jeûne, ou pour étudier un effet opposé sur les seuils de seuil, on peut tester l’administration périphérique de l’hormone antique. Le test de PR de la leptine est effectué après une injection IP de PBS un jour, puis après une injection de cinq milligrammes par kilogramme de leptine le lendemain.

La leptine est injectée une heure avant le test de RP, comme on le voit ici. Le jeûne augmente les effets gratifiants de la nourriture un jeûne de 24 heures, des points de rupture considérablement augmentés sur un programme de renforcement progressif chez la souris, comme on le voit ici. La leptine diminue la récompense alimentaire chez les souris depuis que l’administration de leptine périphérique a diminué les seuils de réponse au point de rupture Lors de la tentative de cette procédure, il est important de se rappeler que l’acquisition de la nourriture maintient la réponse opérante est considérablement améliorée par un entraînement régulier et par l’augmentation de l’état de motivation de la souris par la mise en œuvre d’un régime de restriction alimentaire.

De plus, il est essentiel de s’assurer que les souris présentent une réponse relativement stable sur un programme de renforcement avant de passer à des programmes plus complexes pour minimiser les performances variables pendant les tests. L’obésité et les maladies liées à l’obésité sont un problème croissant qui a accru l’urgence d’identifier les molécules et les voies neuronales impliquées. Le schéma de rapport progressif est un outil précieux pour mesurer l’impact des manipulations neurobiologiques, génétiques ou pharmacologiques sur les effets gratifiants de l’aliment.