17 mai 2012
Ici, nous décrivons une procédure rapide simple et fiable pour déterminer la température minimale à laquelle des rats ou des souris montrent un comportement nocifensive, C.-à- L' Seuil thermique nociceptive (TNT). Cette méthode s'applique un stimulus augmente lentement thermique permettant une estimation précise et reproductible de TNTs avec un minimum, le cas échéant, le stress des animaux.
L'objectif général de cette procédure est de déterminer le seuil de nociception thermique chez des rats témoins et diabétiques. La première étape consiste à placer un animal sur la plaque chauffante progressive et le mesureur d'analgésie. Ensuite, la température de la plaque chauffante est augmentée progressivement pendant que la surface se réchauffe.
L'animal est observé en l'absence de comportements offensifs. Lorsque ce comportement est observé, le chauffage est interrompu et la température de la plaque à ce moment précis est enregistrée. En fin de compte, des résultats peuvent être obtenus qui montrent des modifications du seuil de nociception thermique chez des animaux traités avec des analgésiques ou souffrant d'une neuropathie diabétique douloureuse.
L'avantage principal de cette technique par rapport aux méthodes existantes, comme la plaque chauffante, qui est généralement réglée à une température supraliminale, est que notre méthode augmente progressivement la température de la plaque, permettant ainsi une détermination précise du seuil nociceptif thermique. Le seuil nociceptif thermique, ou TNT, est déterminé à l'aide du dispositif d'analgesie par plaque chauffante progressive, ou IH pam. Les composants de ce système comprennent une chambre d'observation en plexiglas, une plaque en aluminium à température contrôlée, un clavier utilisé pour la programmation et un pédalier permettant une commande à distance de l'appareil.
Les données sont recueillies à l'aide d'un logiciel personnalisé sur un ordinateur voisin. En alternative, des copies papier peuvent être imprimées à l'aide d'un port série situé sur l'appareil. Placez un miroir derrière la chambre en plexiglas afin d'améliorer la visibilité du comportement de l'animal.
Ensuite, réglez les vitesses de chauffage souhaitées ainsi que les températures initiale de veille et finale de coupure. Appuyez sur la pédale pour démarrer et arrêter le système. Vérifiez que les températures initiale de veille et finale de coupure sont bien enregistrées, ainsi que le temps nécessaire pour atteindre la température finale.
Si désiré, l'expérimentateur peut tester le système sur lui-même. Retirer la main de la plaque métallique au moment de la douleur. La perception ne doit causer aucun dommage à la peau, ni provoquer d'inconfort ultérieur.
Commencez l'acclimatation la veille en plaçant les cages sur le plan de travail où aura lieu le test. Deux heures avant le test, allumez la plaque IH afin d'habituer les animaux au bruit de fond de l'appareil.
À ce stade, le système peut être installé et testé comme observé précédemment. Une fois que les animaux se sont habitués à l'environnement, placez délicatement un rat dans la chambre en plexiglas située au-dessus de la surface chaude. Laissez l'animal explorer la chambre pendant quelques minutes.
Commencez le test. Une fois que l'animal semble à l'aise pour démarrer l'essai, appuyez sur le commutateur au pied pour commencer à chauffer la plaque. Observez le comportement de l'animal pendant que la plaque chauffe.
En général, les personnes novices dans cette méthode éprouveront des difficultés, car l'identification d'un comportement offensif massif n'est pas toujours simple et nécessite de la pratique. Aucun comportement offensif n'est caractérisé par le léchage, le secouement ou le soulèvement d'un pore postérieur. Il est utile de noter que le premier comportement observé peut être le léchage des quatre pores, suivi d'une réaction des pores postérieurs.
Lorsqu'un comportement particulièrement offensif est observé, appuyez sur le commutateur au pied pour interrompre l'essai et retirer l'animal vers sa cage d'origine. La température qui provoque ce comportement est considérée comme le seuil nociceptif thermique ou TNT de l'animal témoin. L'appareil est nettoyé et le test est répété pour l'animal suivant.
Voici les seuils de nociception thermique chez les rats et souris adultes jeunes normaux. Ces données montrent que le seuil de nociception thermique (SNT) des rats n'a pas varié lorsqu'il a été mesuré sur une période de quatre jours. De même, le SNT des souris était constant entre différents âges.
Dans cet exemple, les seuils de température nociceptive (TN TS) de rats diabétiques STZ jeunes adultes ont été mesurés à plusieurs reprises. Une diminution progressive des seuils nociceptifs thermiques peut être observée à partir de deux semaines après l'induction du diabète. Ici, la méthode IH pam a été utilisée pour évaluer les propriétés antinociceptives aiguës du composé analgésique.
A, le composé a produit un effet analgésique modéré chez les animaux témoins par rapport à ceux recevant les véhicules. Toutefois, l’analgésie était plus prononcée chez les animaux diabétiques recevant le composé par rapport aux témoins traités au véhicule. Lors de la réalisation de cette procédure, il est très important de surveiller en continu le comportement de l’animal, en particulier les signes survenant près du point T de l’animal.
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Cet article décrit une procédure simple et fiable pour déterminer le seuil de nociception thermique (TNT) chez les rats et les souris. La méthode consiste à appliquer un stimulus thermique progressivement croissant afin d'estimer précisément le TNT avec un stress minimal pour les animaux.
La mesure précise du seuil de nociception thermique (TNT) permet une évaluation objective de la sensibilité à la douleur dans les modèles précliniques de neuropathie diabétique, soutenant ainsi la validation des cibles et les tests d'efficacité des analgésiques. La reproductibilité de la méthode et sa sensibilité aux états hyperalgésiques offrent une confiance prédictive pour l'identification des candidats analgésiques à faible risque avant leur passage à des études de stades ultérieurs. Cette approche répond à un défi majeur de la recherche sur la douleur en proposant un critère d'évaluation quantifiable et pertinent sur le plan translationnel pour l'analyse mécanistique et thérapeutique.
La méthode s'inscrit dans le continuum de découverte allant de la validation de la cible à l'identification de composés précurseurs, jusqu'aux tests d'efficacité préclinique, en particulier pour les programmes portant sur le système nerveux central et les analgésiques axés sur la douleur neuropathique.