Name: Cette Novembre à JoVE (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 51 s
Description: Découvrez les avancées en neurosciences et biologie du numéro de novembre 2011 de JoVE. Explorez les nouvelles techniques expérimentales et les comportements neuronaux révélés par ces études visuelles.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3505/">Mesure des flux calciques rapides dans les cardiomyocytes</a></h2>
Urszula Golebiewska1, Suzanne Scarlata2 1Département des sciences biologiques et de la géologie, Queensborough Community College, 2Département de physiologie et de biophysique, Université Stony Brook
Nous présentons une méthode pour isoler les événements calciques rapides (microsecondes) des flux plus lents dans les cellules vivantes en utilisant la microscopie confocale à balayage laser. La méthode mesure les fluctuations d’intensité de fluorescence des indicateurs de calcium en enregistrant des balayages linéaires de plusieurs centaines de pixels dans une cellule. L’analyse des histogrammes nous permet d’isoler les échelles de temps des différents flux de calcium.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3373/">Synthèse de sous-monomères en phase solide de polymères peptoïdes et leur auto-assemblage en nanofeuilles hautement ordonnées </a></h2>
Helen Tran, Sarah L. Gael, Michael D. Connolly, Ronald N. Fonderie moléculaire Zuckermann , Laboratoire national Lawrence Berkeley
Une méthode simple et générale de synthèse manuelle des peptoïdes impliquant un équipement de base et des réactifs disponibles dans le commerce est décrite, permettant aux peptoïdes d’être facilement synthétisés dans la plupart des laboratoires. La synthèse, la purification et la caractérisation d’un peptoïde amphiphile 36mer sont décrites, ainsi que son auto-assemblage en nanofeuillets hautement ordonnés.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3258/">Évaluation comportementale de la dextérité manuelle chez les primates non humains</a></h2>
Eric Schmidlin*, Mélanie Kaeser*, Anne- Dominique Gindrat, Julie Savidan, Pauline Chatagny, Simon Badoud, Adjia Hamadjida, Marie-Laure Beaud, Thierry Wannier, Abderraouf Belhaj-Saif, Eric M. Rouiller Département de médecine, Université de Fribourg * Ces auteurs ont contribué à parts égales
Comme la dextérité manuelle est une prérogative principalement des primates, des tâches comportementales ont été développées chez les singes macaques. Quatre tâches de préhension de la portée et de la préhension, mesurant la capacité et la force de manipulation de la main, permettent d’établir une récupération fonctionnelle après une lésion du système nerveux central et de tester l’effet d’un traitement.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3588/">Détermination de l’activité phagocytaire d’échantillons d’anticorps cliniques</a></h2>
Elizabeth G. McAndrew1, Anne-Sophie Dugast1, Anna F. Licht1, Justin R. Eusebio1, Galit Alter1, Margaret E. Ackerman2 1Massachusetts General Hospital, Ragon Institute of MGH, MIT et Harvard, 2Thayer School of Engineering, Dartmouth College
Nous présentons un test cytométrique en flux à haut débit pour déterminer l’activité phagocytaire des anticorps spécifiques de l’antigène à partir d’échantillons cliniques, en utilisant des billes fluorescentes enrobées d’antigène et une lignée cellulaire monocytaire exprimant plusieurs récepteurs Fc fournissant l’utilisation des récepteurs et les déterminations de l’activité phagocytaire de manière standardisée et reproductible pour tout antigène d’intérêt.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3187/">Etude du cytosquelette d’actine dans des cellules endothéliales vivantes exprimant la GFP-actine</a></h2>
Travis M. Doggett, Jerome W. L’imagerie microscopique de cellules endothéliales vivantes exprimant la GFP-actine permet de caractériser les changements dynamiques dans les structures du cytosquelette. Contrairement aux techniques qui utilisent des échantillons fixes, cette méthode fournit une évaluation détaillée des changements temporels du cytosquelette d’actine dans les mêmes cellules avant, pendant et après divers stimuli physiques, pharmacologiques ou inflammatoires.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3260/">Implantation d’émetteurs de radiotélémétrie fournissant des données sur l’ECG, la fréquence cardiaque, la température corporelle centrale et l’activité chez des souris de laboratoire se déplaçant librement</a></h2>
Nikola Cesarovic1, Paulin Jirkof2, Andreas Rettich2, Margarete Arras1 1Division de la recherche chirurgicale, Hôpital universitaire de Zurich, 2Institut des sciences des animaux de laboratoire, Université de Zurich
Une technique chirurgicale pour l’implantation d’émetteurs de télémétrie disponibles dans le commerce et utilisée pour la mesure continue du biopotentiel (ECG à une dérivation), de la fréquence cardiaque, de la température corporelle centrale et de l’activité locomotrice chez des souris se déplaçant librement est présentée. Des recommandations et des protocoles pour les soins postopératoires et le soulagement de la douleur, améliorant la récupération, le bien-être et le taux de survie sont également présentés.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3381">Électroporation du mésenchyme craniofacial</a></h2>
Jacqueline M. Tabler, Karen J. Département Liu du développement craniofacial, King's College de Londres
Les cartilages craniofaciaux se développent en contact étroit avec d’autres tissus et sont difficiles à manipuler chez les animaux vivants. Nous utilisons l’électroporation pour fournir des outils moléculaires pendant la croissance du squelette craniofacial tout en contournant les effets embryonnaires précoces. Cette approche nous permettra de tester efficacement des molécules candidates in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3379">Enregistrement électrophysiologique et stimulation optogénétique des neurones nés à l’âge adulte dans le bulbe olfactif</a></h2>
Matthew Valley, Sebastian Wagner, Benjamin W. Gallarda, Laboratoire Pierre-Marie Lledo pour la perception et la mémoire, Institut Pasteur et Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Les neurones nés adultes exprimant ChR2 peuvent être manipulés dans des préparations électrophysiologiques en tranches afin d’examiner leur contribution à la fonction des circuits neuronaux olfactifs.

cette novembre à jove

November 2011: This Month in JoVE

Le numéro de novembre du Journal of Visualized Experiments commence par une série d’expériences comportementales pour mesurer la capacité de préhension chez les primates. Des enquêteurs de l’Université de Fribourg ont fait la démonstration de quatre tâches de préhension et d’étirement, qui suivent toutes des étapes communes pour retenir confortablement l’animal et positionner correctement sa tête. Le test de la planche Brinkman est utilisé pour évaluer l’atteinte d’objets statiques, tandis que la planche Brinkman rotative présente une condition où les animaux doivent anticiper la position de l’objet. Le test de la boîte de Brinkman permet d’étudier la dextérité dans des conditions où le singe a moins de degrés de liberté pour effectuer une tâche de préhension et ne peut pas utiliser la vision pour guider le mouvement. Alors que les tests de planche et de boîte de brinkman reposent uniquement sur l’analyse de la vidéo obtenue lors des expériences, afin de générer des données, l’appareil de tâche d’atteinte de tiroir dispose de détecteurs qui surveillent les forces de préhension et de charge ainsi que la position du tiroir, ce qui rend ce test approprié pour mesurer la résistance ainsi que la capacité de préhension. Combinés, ces quatre tests constituent une approche puissante pour évaluer le contrôle moteur dans le membre antérieur distal, et le groupe fribourgeois présente des données provenant à la fois d’études de lésions et d’expériences visant à tester des thérapies potentielles pour les lésions de la moelle épinière. En médecine clinique et translationnelle, des collaborateurs de la Division de la recherche chirurgicale de l’Hôpital universitaire de Zurich et de l’Institut des sciences des animaux de laboratoire de l’Université de Zurich, Travailler ensemble pour implanter chez la souris un dispositif de radiotélémétrie qui peut être utilisé pour prendre des mesures physiologiques chez des animaux se déplaçant librement. Les appareils se composent de deux dérivations, capables de mesurer l’activité biopotentielle (ECG, EEG ou EMG) ainsi que la température, et d’un émetteur radio léger (bande passante de 1 à 200 Hz) qui peut être implanté dans la cavité abdominale. Le stress de la manipulation des animaux ainsi que l’anesthésie sont des éléments confondants connus, qui ont un impact sur les mesures physiologiques, de sorte que les appareils de radiotélémétrie sont un moyen pratique d’acquérir des données physiologiques d’animaux dans un état naturel non perturbé, ainsi que de prendre des mesures de plusieurs animaux, simultanément. JoVE ajoute également à sa multitude de protocoles d’électroporation une méthode pour introduire des macromoledules dans le mésenchyme craniofacial des têtards de Xenopus laevis en développement, du Liu Lab du King’s College de Londres. Les têtards de xénope sont transférés dans une chambre d’électroporation, où ils peuvent être injectés avec de l’acide nucléique, puis soumis à une électroporation, qui délivrera des vecteurs d’expression ou des morpholinos dans le tissu craniofacial en développement. L’administration de gènes dans le cartilage différencié est intrinsèquement problématique, et le laboratoire Liu montre que, par élécroporation, les morpholinos peuvent être introduits dans les tissus procartilagineux et cartilagineux du têtard de xénope tout au long d’une gamme de stades de développement. En bio-ingénierie, le groupe Zuckerman du Lawrence Berkeley National Laboratory illustre leur méthode de synthèse des peptoïdes, une classe de molécules organiques biologiquement actives qui ressemblent à des peptides. mais ont leurs chaînes latérales attachées à l’azote de la liaison peptidique, plutôt qu’au carbone alpha, ce qui les rend résistants à la protéolyse. Le groupe Zuckerman démontre la synthèse de sous-monomères, où les monomères peptidiques sont ajoutés séquentiellement dans les réactions de bromoacétylation et de déplacement du bromure, ce qui permet de contrôler avec précision la longueur et la composition de la chaîne peptoïde. De plus, le fait que la synthèse se fasse sur de la résine amide, et donc une synthèse en phase solide, simplifie considérablement la purification des peptoïdes synthétisés. Ces auteurs montrent également comment les peptoïdes nouvellement synthétisés peuvent être induits à s’auto-assembler en structures hautement ordonnées, appelées nanofeuilles, qui peuvent être visualisées par fluorescence et microscopie électronique à balayage. Ces nanofeuillets pourraient servir de plate-forme potentielle pour les mimétiques des protéines et des membranes. Plus tard dans le mois, JoVE présentera un test permettant de mesurer l’activité phagocytaire dans les cellules exposées à des échantillons d’anticorps cliniques pour notre section Immunologie et infection. Des collaborateurs du Massachusetts General Hospital et du Dartmouth College montrent que les cellules THP-1 engloutissent des billes recouvertes d’antigène lié aux anticorps dans une microscopie vidéo timelapse et présentent une méthode de cytométrie en flux basée sur des plaques pour quantifier l’étendue de la phagocytose. Nos auteurs utilisent cette méthode pour déterminer la capacité de différents échantillons d’anticorps à induire une phagocytose, tels que ceux de patients atteints du VIH traités et non traités par des thérapies antirétrovirales. Ce résumé du contenu de JoVE en novembre donne un bref aperçu des faits saillants de JoVE pour le mois. D’autres articles notables incluent des méthodes d’imagerie en direct de la dynamique du cytosquelette dans les cellules endothéliales, la mesure du flux de calcium dans les cardiomyocytes et l’électrophysiologie en coupe des neurones nés adultes dans le bulbe olfactif.

Cette Novembre à JoVE

The November issue of the Journal of Visualized Experiments begins with a series of behavioral experiments for measuring prehension ability in primates. ...

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Découvrez les avancées en neurosciences et biologie du numéro de novembre 2011 de JoVE. Explorez les nouvelles techniques expérimentales et les comportements neuronaux révélés par ces études visuelles.

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Aaron Kolski-Andreaco

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