Murin échocardiographie fœtale

L'objectif général de l'expérience suivante est d'étudier la structure et la fonction cardiaques in utero à l'aide d'une échographie à haute fréquence. Cela est réalisé en sédatant et en préparant correctement la femelle gestante. Dans un deuxième temps, identifier les fœtus à l'aide des cornes utérines.

Ensuite, obtenir les données en mode B, en mode M et en Doppler pulsé. Afin d'identifier et de quantifier les anomalies structurelles ou fonctionnelles, on obtient des résultats montrant la structure et la fonction cardiaques in vivo de souriceaux présentant des modifications génétiques. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, comme l'histopathologie, est que l'échocardiographie fœtale fournit un aperçu en temps réel de la fonction cardiaque et peut détecter in vivo des anomalies structurelles du cœur.

Préparez la souris pour l'imagerie en l'anesthésiant d'abord avec 2 à 3 % d'isoflurane dans une chambre d'induction. Placez la souris anesthésiée en position dorsale sur un tapis chauffant équipé de broches ECG intégrées afin de maintenir la température corporelle, fixez les pattes avec du ruban adhésif. Retirez la souris de la chambre et utilisez un tondeur à poils pour raser son pelage du niveau médian du thorax jusqu'aux membres inférieurs.

Utilisez une crème dépilatoire pour éliminer les poils résiduels du corps. Ensuite, placez le museau dans un cône nasal relié au système d'anesthésie afin de maintenir un niveau constant de sédation tout au long de la procédure. Ajustez le niveau d'anesthésie pour maintenir une fréquence cardiaque cible de 450 ± 50 battements par minute.

Appliquez ensuite du gel électrode sur les quatre pattes et fixez-les avec du ruban adhésif aux électrodes de l'ECG. Ensuite, lubrifiez et insérez délicatement une sonde rectale chez la souris afin de surveiller la température corporelle via le tapis chauffant. Maintenez la température corporelle à 37 degrés Celsius, plus ou moins 0,5 degré.

Une anesthésie contrôlée et une température corporelle constante sont essentielles pour la stabilité hémodynamique de la mère et des fœtus. Commencez l'imagerie en utilisant la vessie de la mère comme repère, réglez ensuite les manipulateurs Z, puis ajustez les manipulateurs XY. Les fœtus situés sur la corne utérine gauche sont désignés par L un, deux et trois.

Alors que ceux situés sur la corne utérine droite sont étiquetés R1, R2 et R3. Noter la localisation des embryons est utile lors de leur récupération. Après l'acquisition d'images, examiner les embryons situés profondément dans l'abdomen afin de confirmer leur présence, mais ne pas les inclure dans l'analyse des données en raison de leur faible résolution.

Modifiez les plans de balayage en changeant l'orientation de la souris par rapport au plan de balayage. Obtenez des images dans deux plans orthogonaux pour chaque embryon. Essayez d'obtenir des vues approchant les plans transversal frontal et sagittal, bien que parfois les vues soient limitées à des plans obliques en raison de la position de l'utérus dans l'abdomen.

Utilisez des images en mode B d'exploration pour identifier les structures cardiaques de base telles que les oreillettes, le septum interventriculaire, les cavités ventriculaires, ainsi que les voies d'éjection ventriculaires gauche et droite. Ensuite, obtenez des images en mode M à partir de la vue en axe court et utilisez-les pour mesurer l'épaisseur de la paroi ventriculaire et les dimensions des cavités. Puis, visualisez les ventricules gauche et droit.

Le sang embryonnaire échogène crée des flux visibles, ce qui facilite le positionnement précis du volume d'échantillonnage Doppler au niveau de l'orifice mitral. Déterminez la vitesse d'entrée ventriculaire gauche provenant des valves mitrales sur les vues apicales en long axe du ventricule gauche selon une fenêtre à quatre chambres. Mesurez le temps d'éjection systolique à l'aide des mesures du flux aortique.

Calculez la fréquence cardiaque à partir des mesures d’un cycle de flux au cycle de flux suivant. Utilisez des images en mode B en balayage pour identifier les anomalies congénitales structurelles courantes, telles que les défauts du septum ventriculaire. Identifiez le flux à travers le septum ventriculaire à l’aide d’un volume d’échantillonnage Doppler placé dans les ventricules.

Des évaluations représentatives des fonctions du ventricule droit sont présentées ici. Voici des images représentatives d'échographies en deux dimensions de la vue longitudinale du cœur au jour embryonnaire 14,5 et d'une vue à quatre cavités ici. Un tracé en mode M est montré, avec des lignes indiquant clairement le diamètre interne du ventricule gauche et du ventricule droit en diastole, marqué par la lettre minuscule D, et en systole, marqué par la lettre minuscule S. Le septum interventriculaire ou IVS est également visualisé ici.

Des images représentatives d'échocardiographies 2D du cœur au jour embryonnaire 14,5 selon une vue apicale à quatre chambres sont présentées. L'oreillette gauche et la cavité du ventricule gauche sont délimitées en bleu. On observe ici un positionnement typique du volume d'échantillonnage en onde de pouls Doppler utilisé pour enregistrer le flux mitral ; les tracés Doppler du flux mitral illustrés permettent de mesurer la vitesse en début de diastole, notée E, et la vitesse liée à la contraction atriale, notée a.

Voici un exemple de courbe représentative du doppler aortique. Le jet doppler aortique peut être utilisé pour mesurer le temps d'éjection. La fréquence cardiaque peut également être calculée à partir de la mesure d'un cycle de flux à l'autre.

Ici, nous observons une détection représentative d'un défaut du septum ventriculaire ou mode VSDB ; des images du cœur à 14,5 jours de développement embryonnaire, en vue apicale à quatre chambres, sont présentées. Les cavités ventriculaires droite et gauche sont délimitées respectivement en bleu et en rouge. Remarquez la présence du septum interventriculaire visible ici sur une coupe transversale de ce cœur analysé, coloré à l'hématoxyline, à l'éosine et à la toxine.

Il s'agit d'une imagerie en mode B d'un cœur de jour embryonnaire 14,5 présentant un DSA, indiqué par la flèche blanche. On observe ici les cavités ventriculaires droite et gauche délimitées en bleu et en rouge respectivement. Ce qui est efficacement montré ici est une coupe transversale de ce cœur imagé, colorée à l'hématine et à l'éosine.

Voici une image en mode B d'un cœur d'embryon de jour 14,5 présentant un défaut du septum ventriculaire indiqué par la flèche, avec la position superposée du volume d'échantillonnage en onde pulsée Doppler pour l'enregistrement du flux à travers le septum interventriculaire. Voici un tracé Doppler représentatif de la figure précédente, montrant un flux du ventricule gauche vers le ventricule droit après son développement. Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine du développement cardiaque pour explorer la fonction cardiaque avant l'apparition du champ des mines.