Contrôlé blessures de lacération du col chez la souris

L’objectif global de l’expérience est de générer une lésion de lacération reproductible de la moelle épinière de la souris. Ceci est réalisé en exposant la lame cervicale vers l’arrière lorsque l’animal est positionné dans l’appareil du système de blessure de Louisville. Dans un deuxième temps, un dispositif de stabilisation spécialement conçu est utilisé pour la fixation de la vertèbre cible de la colonne vertébrale de la souris.

Ensuite, la moelle épinière cible entre les arcs laminaires est identifiée après l’ablation du ligamentum flavum à l’extrémité. La section hémisphérique dorsale cervicale à une profondeur de 0,75 millimètre est créée avec précision à l’aide d’une lame oscillante et d’un micro-pilote. Le principal avantage de la technique que nous avons développée en laboratoire est la création d’une méthode très précise de production d’une lésion de la moelle épinière par lacération.

Ceci est important car les techniques qui ont été utilisées jusqu’à présent, c’est-à-dire les ciseaux ou le scalpel, ont créé des problèmes qui sont des méthodes incomplètes et imprécises de lésion de la moelle épinière. Nous disposons maintenant de méthodes pour éviter la contusion de la moelle épinière, le déplacement de la moelle épinière loin du dispositif de lacération et l’hémorragie excessive qui se produit dans la lésion de la moelle épinière. En utilisant cette technique, nous sommes en mesure de créer une méthode très précise qui évite la méthode d’estimation visuelle de la profondeur de la lésion de la moelle épinière.

En utilisant cette technique, nous pensons que nous pouvons révolutionner les méthodes expérimentales de lésions de la moelle épinière utilisées dans le modèle de lacération, qui peuvent être intrinsèquement importantes dans la régénération des axones, ainsi que dans la création d’un remède pour les lésions de la moelle épinière. La démonstration de cette procédure est eing Jang, un neurochirurgien qui est un scientifique de recherche en neurochirurgie dans notre laboratoire, Commencez cette procédure en stérilisant les instruments chirurgicaux suivants, deux à trois paires de pinces, trois paires de micro-ciseaux, une aiguille de calibre 30, une micro suture URS, et un porte-aiguille, des pinces cutanées et un applicateur de clip. Ensuite, désinfectez le stabilisateur de la colonne vertébrale, anesthésiez la souris avec un cocktail de kétamine, de xylazine ou de triéthanol intrapéritonéal.

Ensuite, rasez les poils du cou de la souris. Nettoyez la peau avec une solution de povidone iodée et 70 % d’alcool. Transférez ensuite la souris sur la table d’opération à l’aide d’un coussin chauffant préchauffé.

Appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux pour prévenir le dessèchement de la cornée. Après l’induction anesthésique, faites une incision cutanée médiane cervicale postérieure de l’oput à la graisse sous-cutanée de la colonne cervicale inférieure. Au microscope, faites une incision cutanée médiane entre les muscles trapèzes en C deux et rétractez latéralement les muscles capitaux demi-finalistes.

Ensuite, étendez la dissection musculaire médiane de manière codorée à l’apophyse épineuse T deux qui sert de point de repère fiable. Séparez les muscles de l’apophyse épineuse T deux. Retirez ensuite la partie cartilagineuse de l’apophyse épineuse T deux.

Ensuite, disséquez les muscles paraspinaux des arcs laminaires de manière bilatérale de C quatre à T deux à l’aide d’une paire de micro-ciseaux. Il commence à côté des apophyses épineuses et s’étend sur les deux arcs laminaires jusqu’aux articulations facettaires. Une fois les facettes latérales exposées, placez la souris sur le canal en forme de U du stabilisateur de colonne vertébrale de la souris.

Placez ensuite les bras en acier inoxydable du stabilisateur de souris sous les facettes exposées de manière bilatérale. Une fois les bras en place, serrez les vis à oreilles des bras en acier pour immobiliser la colonne vertébrale sous le microscope. Retirez le ligamentum flam entre les arcs laminaires C cinq et C six pour exposer la dure-mère sous-jacente entre l’espace interlaminaire.

Utilisez une aiguille de calibre 30 pour créer une petite otomie dure et des micro-ciseaux pour élargir l’otomie dur. La moelle épinière est maintenant prête à subir la lésion de lacération contrôlée. Dans cette procédure, placez le stabilisateur de colonne vertébrale et la souris sur la scène de l’appareil du système de blessure Louisville dans laquelle une lame est attachée avec sa position contrôlée par des micro-pilotes.

Capable de trois amplitudes de mouvement pour effectuer une lésion de section HEMI dorsale entre la lame C cinq et six avec une lame plate de 2,3 millimètres attachée à l’oscillateur. Réglez l’amplitude de la lame oscillante à 0,5 millimètre, car des amplitudes plus faibles peuvent diminuer la facilité de lacération complète du cordon. Allumez ensuite l’interrupteur du vibromasseur à lame sous le microscope, placez la moelle épinière de la souris directement sous la lame vibrante.

Ensuite, élevez l’étage vers la lame oscillante avec l’enregistrement de contrôle du micro-pilote. La position zéro lorsque la lame touche à peine la veine dorsale de la moelle épinière, la profondeur de la lacération de la moelle épinière est mesurée par rapport à la position zéro. Ensuite, élevez la position de la scène avec la commande du micro-pilote.

Une rotation à 360 degrés du bouton du micro-pilote élève la platine de 0,25 millimètre. Ainsi, une lésion de section hémique dorsale de 0,75 millimètre est créée en tournant trois fois le bouton du micro-pilote lorsque la lame commence à lacérer la moelle épinière lubrifiez le champ chirurgical avec une irrigation saline. Une fois la profondeur prédéterminée atteinte, éteignez l’interrupteur du vibromasseur, abaissez la platine supportant la souris et la pince de la lame de coupe.

Retirez le sang en irriguant avec une solution saline sur le site chirurgical. Séchez ensuite la zone avec des cotons-tiges en coton, car l’hémostase se produit généralement dans la minute qui suit. À la fin, retirez la souris du stabilisateur de colonne vertébrale et fermez la peau avec de l’acier inoxydable.

Michelle clipse. La colonne cervicale est fixée en plaçant les bras sous les facettes latérales, puis en verrouillant les vis à oreilles comme le montre cette figure, la dure-mère est exposée entre le stratifié de C cinq à six C, six à sept et C sept à T un sans aucune ablation d’os. Voici les vues sagittales de quatre lacérations de la moelle épinière dorsale à des profondeurs de 0,5, 0,8, 1,1 et 1,4 millimètres.

Ils indiquent le haut degré de précision utilisé par cette technique. L’un des problèmes inhérents à la création de lésions de la moelle épinière a été le manque de stabilisation de la colonne cervicale. En utilisant le stabilisateur de colonne vertébrale qui a été développé par notre groupe, nous sommes maintenant en mesure de créer une colonne cervicale absolument immobile.

Cela permettra d’améliorer la lésion de la moelle épinière à l’aide de la contusion de la moelle épinière, des injections de la moelle épinière, ainsi que de la transplantation cellulaire dans la moelle épinière pour toutes les méthodes de recherche sur la moelle épinière.