Name: Occlusion 2 Navire / Hypotension: un modèle de rat dischémie cérébrale globale (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: Découvrez comment induire une ischémie cérébrale globale transitoire chez le rat par occlusion carotidienne bilatérale et hypotension systémique. Cette méthode permet de quantifier les dommages neuronaux dans l'hippocampe avec une mortalité faible.

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<ol><li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li>
<li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li>
<li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax%2FBcl-XL+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+%28PERK%29+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li>
<li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li>
<li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li>
<li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia%2C+resuscitation%2C+and+reperfusion%3A+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li>
<li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion%3A+a+proposed+biochemical+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li>
<li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978(2011).</li>
<li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li>
<li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest%3A+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li>
<li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li>
<li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Death+by+design%3A+apoptosis%2C+necrosis+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li>
<li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li>
<li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39(1999).</li>
<li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li>
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<li>Soriano, M. A., Ferrer, I., Rodriguez-Farre, E., Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+and+c-Jun+in+the+thalamus+of+the+rat+following+cortical+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Apoptosis and c-Jun in the thalamus of the rat following cortical infarction.</a> Neuroreport. 7, 425-428 (1996).</li>
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<li>Busto, R., Dietrich, W. D., Globus, M. Y., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+brain+temperature+in+cerebral+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">The importance of brain temperature in cerebral ischemic injury.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 1113-1114 (1989).</li>
<li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage%3A+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li>
<li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li>
<li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont pas de conflits d&#39;intérêts financiers.

Le modèle décrit ici produit un accident ischémique dans le cerveau qui peuvent survenir à la suite de l&#39;arrestation et de réanimation cardiaque, fournissant une blessure similaire à celle trouvée chez l&#39;homme. Ce procédé de fabrication ischémie globale du cerveau est l&#39;un des protocoles multiples. Nous utilisons ce protocole avant tout pour son taux relativement bas de mortalité, une récupération rapide et des résultats reproductibles. Le modèle d&#39;arrêt / réanimation cardiaque est sans doute le modèle l...

Les lésions cérébrales à la suite d&#39;une arrestation et d&#39;AVC cardiaque est une cause majeure de décès et d&#39;invalidité à long terme. Alors que la réanimation cardiorespiratoire pour les victimes d&#39;un arrêt cardiaque réussit à rétablir la circulation spontanée dans environ 70.000 patients par an aux Etats-Unis 7,8 au moins 60% de ces patients décèdent par la suite à l&#39;hôpital à la suite d&#39;importants dommages au cerveau et seulement 3-10% des patients réanimés peuvent reprendre leurs anciens modes de vie 9,10. De toute évidence, la compréhension des mécanismes qui conduisent à des lésions cérébrales suite à une ischémie globale du cerveau et de concevoir des interventions thérapeutiques visant à minimiser le traumatisme neurologique est d&#39;une importance critique. ischémie cérébrale peut être modélisée en utilisant plusieurs méthodes. Le plus souvent, l&#39;ischémie cérébrale est produite chez le rongeur par occlusion d&#39;un vaisseau sanguin dans le cerveau, l&#39;artère cérébrale moyenne, produisant ainsi un accident vasculaire cérébral ischémique focal 11,12. Bien que cliniquement importante,ischémie cérébrale focale n&#39;est pas une méthode précise pour étudier les lésions cérébrales produites par arrêt / réanimation cardiaque. Pour modéliser ce paradigme clinique le cerveau entier doit être effectué ischémique suivie par la réintroduction du flux sanguin. Pour imiter étroitement cette présentation clinique, les chercheurs induisent expérimentalement arrêt cardiaque suivi d&#39;une réanimation avec RCR et la défibrillation 13,14. Ce modèle est cliniquement pertinente, les temps de réanimation cependant imprévisibles peuvent augmenter la variabilité et peuvent faire l&#39;analyse des données difficiles à interpréter. En outre, ce modèle est associé à un taux de mortalité élevé, augmentant encore nombre d&#39;animaux nécessaires pour tester une hypothèse. Etude de la réponse cérébrale à une ischémie globale et / ou de reperfusion dans une insulte plus reproductible, cohérente et survivre peut être préféré. Ischémie globale peut être induite dans le cerveau, tout en préservant une certaine circulation sanguine systémique. Cela permet de réduire la mortalité, tout en permettant investigation des mécanismes de lésions tissulaires dans le cerveau 2. Pour produire une ischémie globale du cerveau, il est nécessaire d&#39;interrompre ou de limiter considérablement l&#39;écoulement dans les quatre vaisseaux qui irriguent le cerveau, les artères carotides internes et les artères vertébrales. Ces navires alimentent le cerveau avec le flux sanguin à travers une structure vasculaire appelé le Cercle de Willis, qui forme une boucle anastomotique. Cette architecture permet vasculaire du cerveau à retenir perfusion en cas d&#39;occlusion vasculaire proximale. Par conséquent, pour induire une ischémie complète du cerveau, le flux sanguin à travers tous les navires de cotisation doit se produire. Carotide occlusion peut être accompli en utilisant un cou ventral minimalement invasive coupe-bas et l&#39;application de clips anévrisme pendant une période désirée. Interruption de la circulation sanguine à travers les artères vertébrales peut être difficile, car ils sont incased dans les trous transversale de la colonne vertébrale. Les enquêteurs se sont penchés sur cette electrocauterizing par les artères vertébrales 24-48 heures avant carotideocclusion et l&#39;ischémie cérébrale (4VO modèle) 15. Contrairement à cette approche, Smith et al. Développé une méthode pour induire une ischémie globale du cerveau en réduisant signifie la pression artérielle (MAP) systémique à 40 mmHg pour réduire perfusion à travers les artères vertébrales à un point où le débit sanguin est perdue ou fortement réduit 2 . Lorsqu&#39;il est couplé avec l&#39;occlusion carotidienne, cette méthode produit tout au long de l&#39;ischémie du cerveau antérieur, résultant en un modèle de lésion cérébrale qui imite étroitement que des survivants d&#39;arrêt cardiaque. Dans un autre raffinement de cette méthode, le modèle que nous présentons ici nécessite une réglementation MAP serré à 30 mmHg ± 1mHg pendant toute la 8 min d&#39;ischémie. Nous avons trouvé cette modification améliore la reproductibilité des lésions cérébrales induites par ce modèle tout en préservant le faible taux de mortalité de la technique originale conçue par Smith et al. Le phénotype précise de la mort cellulaire et de l&#39;étendue globale de dommages aux tissus causés parLe modèle présenté ici est directement dépendante de la durée ischémique 16. Après 8 minutes d&#39;ischémie, neurones CA1 présentent des retardé la mort cellulaire, suggérant qu&#39;il existe une fenêtre temporelle pour l&#39;intervention thérapeutique au cours de la phase de reperfusion 15,17. Au début de la reperfusion, les neurones retrouver rapidement la fonction et pas de mort cellulaire immédiate est détectable 18. Cependant, cette insulte provoque l&#39;induction de cascades de mort cellulaire (apoptose) qui aboutissent à la libération de protéines apoptogènes des mitochondries, y compris cytochrome c, entre 4-6 heures de reperfusion 3,19. Entre 6 et 24 heures de reperfusion, les neurones de l&#39;hippocampe CA1 se sont engagés à mort de la cellule, et le programme de mort cellulaire par apoptose est exécutée 19. Il convient de noter que le phénotype de mort cellulaire responsable de la lésion ischémique est très controversée. Les premières études ont suggéré nécrose est la principale phénotype de mort cellulaire 20,21, tandis que d&#39;autres d&#39;autres rapportent apoptosis comme le principal mécanisme de 22,23. Au total, les données actuelles suggèrent que les cellules meurent d&#39;un spectre de phénotypes de mort cellulaire allant de l&#39;apoptose classique à la nécrose. Le mode précis de la mort cellulaire dépend de nombreux facteurs, avec le degré de contribution de chaque phénotype en fonction de la gravité de l&#39;insulte, parmi d&#39;autres facteurs 24,25. En 24 heures de reperfusion, les cellules meurent possèdent noyaux pycnotiques, cytosol condensée avec une preuve claire de contenus cellulaires globales, et la perte de la morphologie mitochondriale fonctionnel. Les cellules mortes sont ventilés, engloutis par les cellules immunitaires comme les macrophages et / ou de la microglie, et effacées de la région hippocampique CA1. En 4-7 jours de reperfusion, les cellules mortes sont éliminées, et tout ce qui reste sont des cellules inflammatoires et les cellules gliales activées 17,26. Par conséquent, les 7 jours de reperfusion représente un moment optimal où CA1 mort neuronale hippocampique peut être quantifiée en utilisant des taches de cellules simples, non spécifiques, eny compris Le violet de crésyl ou hématoxyline-éosine et comptés sur la base de critères d&#39;inclusion morphologiques. Les cellules restantes à cet intervalle de reperfusion tardive peuvent être considérés comme des cellules survivantes, fournissant ainsi un indice de lésions cérébrales. Si ce modèle doit être utilisé pour tester des interventions thérapeutiques, il est suggéré que le protocole expérimental suivi des critères d&#39;escalier (Stroke Therapy Industrie Académique Table ronde) 27. Ces directives doivent être suivies lors de la conception et la réalisation d&#39;une étude, mais ne sont pas discutés ici.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Nom du matériau</td></tr><tr><td>5-0 Suture VICRYL, coupe inversée </td><td>Ethicon</td><td>J391H</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel, No.10</td><td>Swann-Morton</td><td>6601</td><td></td></tr><tr><td>Éponges de gaze</td><td>Fisher</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>18G x 1 &frac12 ; en aiguille</td><td>BD</td><td>305201</td><td></td></tr><tr><td>23G x 1 en aiguille</td><td>BD</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 3/8 po aiguille</td><td>BD</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>18 G x 1 &#188 ; cathéter</td><td>EXEL</td><td>26735</td><td></td></tr><tr><td>1 ml seringue</td><td>BD</td><td>309659</td> 10 ml 309604 <td></td></tr><tr><td>seringue de 60 ml</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Surgilube</td><td>Henry Schein</td><td>1152666,9</td><td></td></tr> % <tr><td>solution saline, plastique IV sac</td><td>Henry Schein</td><td>1537468</td><td></td></tr><tr><td>Suture 3-0 Soie</td><td>Henry Schein</td><td>1007842</td><td></td></tr><tr><td>Puralube Pommade Ophtalmique</td><td>Henry Schein</td><td>3390017</td><td></td></tr><tr><td>Bétadine</td><td>Henry Schein</td><td>6903564</td><td></td></tr><tr><td>Serviette Stérile</td><td>Drape Moore Medical</td><td>14170</td><td></td></tr><tr><td>Tube en polyéthylène, 50</td><td>Intramedic</td><td>427411</td><td></td></tr><tr><td>Robinet d’arrêt, 3 voies</td><td>Smiths medical</td><td>MX9311L</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Nom du médicament</td></tr><tr><td>AERRANE (isoflurane)</td><td>Henry Schein</td><td>2091966</td><td></td></tr><tr><td>Mapap Liquid (Tylenol)</td><td>Major Pharmaceuticals</td><td>1556</td><td></td></tr><tr><td>Kedavet (kétamine)</td><td>Ketathesia Butney</td><td>NDC 50989-996-06</td><td></td></tr><tr><td>Butorphic (butorphanol)</td><td>Lloyd Labs</td><td>4881</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>504011</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Nom chimique </td></tr><tr><td>Paraformaldehyde prills</td><td>Elecron Microscopy Sci.</td><td>19202</td><td></td></tr><tr><td>2-méthylbutane</td><td>Sigma</td><td>270342</td><td></td></tr><tr><td>Cresyl Violet Acétate</td><td>Sigma</td><td>C5042</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Software</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

occlusion 2 navire / hypotension: un modèle de rat d&#39;ischémie cérébrale globale

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

L&#39;arrêt cardiaque suivi d&#39;une réanimation se traduit souvent par des dommages au cerveau dramatique causée par l&#39;ischémie et la reperfusion subséquente du cerveau. Ischémie globale du cerveau produit des dommages à des régions spécifiques du cerveau révélés être très sensible à l&#39;ischémie 1. Neurones de l&#39;hippocampe ont une plus grande sensibilité aux agressions ischémiques par rapport à d&#39;autres populations de cellules, et en particulier, la région CA1 de l&#39;hippocampe est particulièrement vulnérable à l&#39;ischémie / reperfusion 2. La conception des interventions thérapeutiques, ou l&#39;étude des mécanismes impliqués dans la lésion cérébrale, nécessite un modèle qui produit des dommages semblables à l&#39;état clinique et de façon reproductible. Occlusion du vaisseau carotide bilatérale avec hypotension (2VOH) est un modèle qui produit une ischémie du cerveau antérieur réversible, imitant les événements cérébraux qui peuvent survenir lors de l&#39;arrestation et de réanimation cardiaque. Nous décrivons un modèle modifié de Smith et al. (1984) 2, En tant que premier présenté sous sa forme actuelle en 3 Sanderson et al. (2008), qui produit des blessures reproductible sélectivement les régions du cerveau vulnérables 3-6. La fiabilité de ce modèle est dicté par un contrôle précis de la pression artérielle systémique pendant hypotension appliquée, la durée de l&#39;ischémie, un contrôle étroit de la température, un régime d&#39;anesthésie spécifique, et diligent soins post-opératoires. Un accident ischémique 8 minutes produit la mort cellulaire des neurones CA1 hippocampique qui progresse au cours de 6 à 24 heures de reperfusion, tandis que les régions du cerveau les moins vulnérables sont épargnés. Cette mort cellulaire progressive est facilement quantifiable après 7-14 jours de reperfusion, comme une perte presque complète des neurones CA1 est évident en ce moment. En plus de ce modèle de lésion cérébrale, nous présentons une méthode de quantification des dommages CA1 l&#39;aide d&#39;un simple, mais complète, de la méthodologie. Surtout, la quantification peut être réalisée à l&#39;aide d&#39;un simple microscope caméra montée, unda gratuit ImageJ (NIH) plugin, éliminant ainsi la nécessité pour les logiciels stéréologie coûts prohibitifs et une scène microscopique motorisé pour l&#39;évaluation des dommages.

Le modèle 2VOH d&#39;ischémie / reperfusion cérébrale globale provoque la mort des neurones dans la région CA1 de l&#39;hippocampe. Figure 2 représente la blessure produite par 8 min d&#39;ischémie globale du cerveau, traitement 14 jours après la reperfusion. Figures 2A et 2B comparer les hippocampes d&#39;imposture et cerveaux post-ischémiques, colorées avec du violet de crésyl. Figure 2a montre un hippocampe d&#39;un rat opération fictive qui présente...

Occlusion carotidienne bilatérale associée à une hypotension systémique produit ischémie globale du cerveau chez le rat, causant des dommages à l&#39;hippocampe avec sévérité reproductible. sujets animaux sont altérées avec des modèles prévisibles de lésions cérébrales, ils récupèrent opportunément, et les taux de mortalité sont relativement faibles.

Occlusion 2 Navire / Hypotension: un modèle de rat d&#39;ischémie cérébrale globale

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

L'objectif général est d'induire un épisode ischémique transitoire dans le cerveau afin de simuler l'atteinte cérébrale provoquée par un arrêt cardiaque et la réanimation. Dans un premier temps, une hypotension systémique est provoquée par le prélèvement de sang à partir de l'artère fémorale. Ensuite, les artères carotides sont occluses pour restreindre le flux sanguin vers le cerveau.Le cerveau est maintenu en état d'ischémie pendant huit minutes grâce à un contrôle rigoureux de la pression artérielle systémique. Enfin, les pinces sont retirées et le sang prélevé est réintroduit. En définitive, les lésions neuronales peuvent être quantifiées à différents moments après l'ischémie.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes telles que l'arrêt cardiaque et la réanimation réside dans la possibilité de simuler un épisode ischémique cérébral sans les mortalités ni les comorbidités associées à l'ischémie systémique. La démonstration visuelle de cette chirurgie nous permet d'insister sur l'importance de certaines subtilités procédurales afin d'assurer la reproductibilité. Commencez par fabriquer un cathéter vasculaire. Pour ce faire, coupez un morceau de t

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L'induction chirurgicale d'une lésion cérébrale ischémique chez le rat est un modèle largement utilisé pour la recherche sur les AVC. Ici nous démontrons l'induction d'une ischémie cérébrale focale par occlusion de l'artère cérébrale moyenne. Visualisation de l'infarctus entraînant par coloration histologique et l'imagerie par résonance magnétique est également représentée.

Focale modèle d&#39;ischémie cérébrale par occlusion suture endovasculaire de l&#39;artère cérébrale moyenne chez le rat

Cette vidéo montre la procédure d’occlusion distale permanente de l’artère cérébrale moyenne, ou MCAO, avec la ligature de l’artère carotide commune, ou ligature CCA, chez des rats âgés pour modéliser l’AVC ischémique. Cela bloque le flux sanguin vers le cerveau, entraînant la mort neuronale et générant un modèle pour étudier les mécanismes de l’AVC et les traitements potentiels.

Induction d’une ischémie par occlusion de l’artère cérébrale moyenne et de l’artère carotide commune dans un modèle de rat

Source : Larpthaveesarp, A., et. al. Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne d’un accident vasculaire cérébral néonatal chez des rats P10. J. vis. exp. (2017)Cette vidéo démontre l’établissement du modèle d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne chez un rat. L’artère carotide interne (ICA) est exposée et une ligature est sécurisée pour limiter l’afflux sanguin. Une occlusion est insérée à travers l’ICA pour atteindre l’artère cérébrale moyenne. Le petit est ensuite laissé...

Génération d’une occlusion de l’artère cérébrale moyenne chez un petit rat pour induire une ischémie cérébrale locale

Nous décrivons une méthode hautement reproductible pour l'occlusion permanente d'un important vaisseau sanguin cérébral des rongeurs. Cette technique peut être accompli avec très peu de dommages périphérique, la perte de sang minime, un taux élevé de survie à long terme, et le volume de l'infarctus cohérent en rapport avec la population clinique humaine.

Permanent occlusion des vaisseaux cérébraux<em&gt; Via</em&gt; Double ligature et Transection

Les modèles d’AVC thromboemboliques sont des outils essentiels pour optimiser la thérapie de recanalisation. Nous rapportons ici un modèle murin d’AVC thrombotique basé sur une agression hypoxique-ischémique cérébrale transitoire (tHI), qui déclenche une thrombose et un infarctus, et répond favorablement à la fibrinolyse médiée par l’activateur tissulaire du plasminogène (tPA) dans une fenêtre thérapeutique similaire à celles des patients victimes d’AVC.

Un modèle de course thrombotique Basé sur cérébrale transitoire hypoxie-ischémie

L’objectif global de cette procédure est de fournir une technique hautement reproductible pour évaluer in vivo la rupture de la barrière hémato - encéphalique dans les modèles de rat d’accident vasculaire cérébral ischémique.

Une évaluation In Vivo de la perturbation de la barrière hémato - encéphalique dans un modèle de Rat d’accident vasculaire cérébral ischémique

Un modèle murin d’ischémie-reperfusion cérébrale est mis en place pour étudier la physiopathologie des accidents vasculaires cérébraux. Nous distalement ligaturer l’artère cérébrale moyenne droite et artère carotide commune droite et restaurer le flux sanguin après 10 ou 40 min d’ischémie.

Modèle de souris de deux vaisseaux Occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale

Le protocole actuel décrit un modèle de rat d’occlusion/reperfusion de l’artère cérébrale moyenne qui préserve la structure anatomique des vaisseaux cérébraux sans causer de dommages.

Un modèle chez le rat d’occlusion/reperfusion de l’artère cérébrale moyenne sans endommager la structure anatomique des vaisseaux cérébraux

Ce protocole décrit le processus d’induction d’un modèle de coma ischémique cérébral à l’aide d’une méthode d’occlusion modifiée à quatre vaisseaux.

Modèle de coma ischémique cérébral induit par une occlusion modifiée à quatre vaisseaux

Les modèles in vivo chez le rat sont des outils indispensables pour étudier les mécanismes pathologiques et les cibles thérapeutiques de l’AVC ischémique. Ce travail décrira la réalisation d’une coloration par immunofluorescence dans des coupes de cerveau infarctus après une occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCAO) chez le rat.

Évaluation de la signalisation de la mort cellulaire par immunofluorescence dans un modèle d’AVC ischémique chez le rat

Découvrez comment induire une ischémie cérébrale globale transitoire chez le rat par occlusion carotidienne bilatérale et hypotension systémique. Cette méthode permet de quantifier les dommages neuronaux dans l'hippocampe avec une mortalité faible.

Occlusion 2 Navire / Hypotension: un modèle de rat d'ischémie cérébrale globale

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