Les modèles de souris pour l'artériosclérose Graft

L’objectif global de l’expérience suivante est de transplanter un vaisseau donneur dans l’aorte abdominale d’un receveur. La première étape consiste à disséquer l’aorte thoracique de la souris donneuse. Ensuite, des sites anastomotiques sont créés dans l’aorte abdominale de la souris receveuse.

Le vaisseau donneur est ensuite implanté dans l’aorte abdominale receveuse. En fin de compte, la transplantation réussie peut être obtenue par la fonction motrice intacte des membres postérieurs de la souris receveuse. Ce modèle va donc nous aider à comprendre la pathogenèse de la sclérose artérielle du greffon.

Et c’est un défi technique, qui nécessite beaucoup de pratique et le patient pour être parfait. Ainsi, la démonstration de la procédure sera faite par le Dr Chen et l’assistant de Louanne. Pour commencer, confirmez la bonne profondeur de l’anesthésie chez la souris donneuse.

Une fois anesthésiée, placez la souris en position couchée sur un plateau sous un microscope opératoire. Nettoyez la poitrine avec des frottages répétés d’iode et d’alcool après avoir exposé le cœur et l’avoir rincé avec une solution saline, retirez le cœur et les poumons pour exposer toute la longueur de l’aorte thoracique. Une fois visualisé, commencez à disséquer soigneusement l’aorte thoracique en l’éloignant des tissus environnants.

Lorsque les branches lombaires sont atteintes, ligaturez-les près de l’aorte avec une suture en soie avant de les couper. Lorsqu’il est libéré des tissus environnants, excisez toute l’aorte thoracique. Une fois isolé, rincez l’aorte du donneur avec une solution saline héparinée et conservez-la dans cette solution sur de la glace jusqu’à la transplantation.

Après avoir assuré une anesthésie adéquate chez la souris receveuse, rasez la fourrure de la région abdominale antérieure. Couvrez les yeux avec une pommade ophtalmique et nettoyez la zone comme vu précédemment. Lorsque vous êtes prêt, placez la souris en position couchée sur un plateau sous un microscope opératoire.

Incisez la paroi abdominale sur la ligne médiane de la xiphoïde au pubis, puis utilisez un écarteur pour écarter la paroi et exposer la cavité abdominale Une fois exposé, enveloppez les intestins dans de la gaze humide de solution saline et poussez-les vers le haut et loin de la cavité abdominale. Utilisez plus de gaze humide de solution saline pour envelopper les zones abdominales restantes et utilisez-la pour rétracter le rectum vers le côté droit de l’abdomen. Ensuite, déplacez les organes reproducteurs vers le bas.

N’oubliez pas de garder les tissus exposés humides en appliquant une solution saline. Identifiez régulièrement l’aorte infrarénale située à proximité du vaisseau rénal et distale à la bifurcation aortique émoussée. Disséquez-le soigneusement pour le séparer de la veine cva inférieure.

Identifiez ligaturer et coupez toutes les petites branches provenant de ce segment de l’aorte. Une fois le segment aortique isolé, placez une pince vasculaire à chaque extrémité à environ cinq millimètres de distance. Ensuite, créez les sites anastomotiques en transectant l’aorte abdominale entre les pinces.

À l’aide de micro-ciseaux tranchants, séquez un petit segment de l’aorte à partir d’une extrémité coupée pour accueillir le greffon aortique donneur. Rincer les segments aortiques entre les pinces à l’aide d’une solution saline héparinée pour éliminer le sang résiduel. N’oubliez pas d’irriguer périodiquement les deux échantillons aortiques avec une solution saline héparinée tout au long de la procédure.

Ensuite, transectez les deux côtés de l’aorte du donneur pour créer une greffe de segment de 2,5 millimètres de long pour la transplantation. Placez le greffon aortique du donneur en position, en alignant les extrémités proximale et distale pour des sutures continues. Placez d’abord les sutures de hauban aux positions trois et neuf heures des deux extrémités.

Ensuite, joignez les bords coupés avec trois à quatre sutures courantes et attachez les sutures courantes aux sutures de maintien avec un double nœud pour les sutures interrompues. Construisez quatre sites d’anastomose aux positions trois et neuf heures des deux côtés du greffon. Premier. Ensuite, joignez les bords coupés avec trois à quatre points placés entre chacun de ces sites.

Une fois les sutures en place, relâchez la pince distale pour permettre un écoulement rétrograde dans le greffon. Identifiez les sites de saignement et faites des points de suture supplémentaires dans les trois minutes. Lorsque l’hémostase satisfaisante est obtenue, relâchez la pince ampli proximale.

La perméabilité des greffons peut être confirmée par la présence d’une pulsation vigoureuse. Si la pulsation diminue, injectez de l’héparine dans le vaisseau pour prévenir la thrombose. Lorsque vous êtes prêt, retournez les intestins dans la cavité abdominale et suturez les couches musculaires et cutanées fermées.

Placez la souris réceptrice dans une cage chaude et propre et surveillez pendant une à deux heures jusqu’à ce que la conscience revienne. Évaluez la fonction motrice de la souris après la récupération et à nouveau, le deuxième jour, une chirurgie de transplantation est réussie si aucun dysfonctionnement des membres postérieurs n’est observé. L’analyse histologique des greffes d’artères prélevées quatre semaines après l’intervention a révélé une augmentation de l’épaisseur de la paroi vasculaire chez les receveuses d’un donneur masculin.

Cependant, aucune artériosclérose du greffon n’a été observée dans le groupe d’homme à homme. Dans cet exemple, l’artère thoracique d’un donneur masculin a été transplantée dans une souris knock-out d’interféron gamma, puis l’expression de l’interféron gamma a été induite chez la souris receveuse. Avant que les échantillons ne soient prélevés.

Quelques semaines plus tard, l’analyse histologique des greffes d’artères montre qu’aucune artériosclérose du greffon n’a été observée dans le groupe traité. Vous savez maintenant comment faire cette chirurgie. Continuez d’essayer.