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L’aptitude à réaliser avec succès des solutions est une compétence basique de laboratoire réalisée dans quasiment toutes les expériences de biologie et chimie. Une solution est un mélange homogène de soluté dissout dans un liquide en vrac connu comme le solvant. Les solutions peuvent être décrites par leur concentration en soluté, la mesure de combien de soluté est présent par unité de solution.
Dans cette vidéo, une procédure pas à pas pour comment faire une solution à base d’eau, ou aqueuse, pour des utilisations biologiques est présentée. La vidéo discute comment calculer et mesurer la quantité de soluté nécessaire pour un volume donné de solution. Les méthodes pour diluer le soluté dans de l’eau purifiée et ajuster le pH de la solution sont montrées. L’addition correcte de la quantité suffisante (QS) pour atteindre le volume désiré est montrée en parallèle avec le ménisque, cela avant de discuter des méthodes pour stériliser la solution. Les utilisations de la réalisation de solutions sont présentées à travers la discussion de plusieurs solutions biologiques communément utilisées, telle que le tampon phosphate salin (PBS), et leurs utilisations en recherche biologique. Ces solutions sont des tampons qui imitent le pH physiologique et l’osmolarité des fluides cellulaires.
La réalisation de solutions est une procédure essentielle impliquée dans quasiment toutes les expériences biologiques et chimiques réalisées à travers le globe.
Une solution est faite d’une substance dissoute dans un liquide. La substance dissoute est connue comme le soluté, et le fluide en vrac comme le solvant. Le mélange homogène résultant est référencé comme la solution.
Les solutions peuvent être décrites par leur concentration en soluté, qui mesure combien de soluté est présent dans chaque unité de solution.
Réaliser des solutions est peut être une compétence basique de laboratoire, mais une technique médiocre peut induire la différence entre une expérience réussie ou ratée.
La première considération lors de la réalisation de solutions est la sécurité. Il est important de prendre les précautions appropriées, telles que porter des gants et un tablier de laboratoire, en fonction du type de produits chimiques avec lesquels vous travaillez.
Il existe de nombreuses techniques pour réaliser une solution. Cette vidéo va montrer la façon la plus commune pour faire une solution à base d’eau, ou solution aqueuse.
Premièrement, déterminez les moles de soluté dont vous aurez besoin pour atteindre la concentration désirée dans un volume donné de solution. Ensuite convertissez cette valeur en grammes en utilisant le poids moléculaire, ou le nombre de grammes par mole, du réactif.
Les produits chimiques peuvent être pesés en utilisant une balance digitale et une coupelle.
Un cylindre gradué peut alors être utilisé pour mesurer un volume d’eau purifiée qui est à peu près trois quarts du volume final de la solution.
Il est impératif que les solutions aqueuses soient préparées avec de l’eau purifiée plutôt que de l’eau du robinet. Le manquement à cette règle peut non seulement compromettre la qualité de la solution, mais aussi celle des multiples expériences en aval.
A ce niveau, l’eau purifiée doit être transférée dans un bécher contenant un barreau d’agitation magnétique sur une plaque à agitation magnétique.
Les solutés mesurés peuvent alors être ajoutés à l’eau purifiée en agitation. L’agitation du mélange aide le soluté à se dissoudre. Chauffer peut aussi être utilisé dans ce but.
Une fois que tous les solutés ont été dissous dans le solvant, le pH de la solution peut être ajusté en utilisant un pH-mètre. Pour augmenter le pH, ajoutez de l’hydroxyde de sodium dilué à la solution sous agitation. Pour diminuer le pH, ajoutez de l’acide chlorhydrique dilué. Soyez attentif à ajouter lentement l’acide ou la base, vu que le pH peut changer rapidement.
Du papier pH peut aussi être utilisé pour mesurer le pH de la solution, cependant l’utilisation d’un pH-mètre calibré donne des mesures plus précises.
La solution est alors versée dans un flacon volumétrique à l’aide d’un entonnoir, de sorte qu’elle puisse être amenée jusqu’à son volume final. L’ajout de la quantité suffisante pour atteindre ce volume est connu comme le Q.S.’ing de la solution.
Soyez certain que le ménisque s’aligne avec la marque sur le flacon volumétrique. Dans une solution aqueuse, le ménisque est concave, et doit être lu au point le plus bas de la courbe.
Lors de la réalisation de recherche biologique, les solutions peuvent nécessiter d’être stérilisées avant leur utilisation. Ceci peut être fait par autoclave, qui soumet la solution à une vapeur à haute température sous haute pression.
Alternativement, la solution peut être stérilisée par le passage à travers un filtre de 0,22 micron, ce qui exclura toutes les cellules bactériennes.
Maintenant que vous avez une compréhension fondamentale de la réalisation de solutions, il est temps de jeter un oeil à quelques solutions habituellement utilisées en laboratoire et à leurs utilisations.
En recherche biologique, de nombreuses solutions sont conçues pour imiter des fluides physiologiques. Ces solutions sont tamponnées, ce qui signifie qu’elles résistent au changement de pH dans une plage spécifique; habituellement, le pH est maintenu aux environs de 7,4 pour simuler les fluides intracellulaires et extracellulaires.
Le tampon phosphate salin, ou PBS, est un tampon communément utilisé en recherche biologique qui imite le pH physiologique et l’osmolarité. L’osmolarité fait référence au nombre total de moles de soluté dans une solution. Par exemple, une solution contenant 1 mole de NaCl a 2 osmoles de soluté, parce que les ions sodium et chlorure se dissocient en solution. Le PBS a des concentrations en ion qui correspondent étroitement à celles des cellules, le rendant isotonique, ce qui signifie que la quantité de soluté à l’extérieur de la cellule est équivalente à celle à l’intérieur de la cellule. Le PBS est fait de plusieurs sels différents dans l’eau, incluant des sels avec des groupes phosphate qui maintiennent un pH constant dans une plage de 7,2 à 7,6.
Les utilisations habituelles du PBS au labo inclues le lavage des cellules et la dilution de biomolécules telles que les protéines.
Le liquide céphalorachidien artificiel, ou ACSF, imite les concentrations en électrolyte du liquide céphalorachidien. Cette solution doit être fraichement préparée, et le pH, l’osmolarité, et la composition ionique doivent être attentivement suivis pour correspondre aux conditions in vivo.
L’ACSF est généralement utilisé dans les études électro-physiologiques pour préparer les morceaux de cerveau et pour les injecter pendant les expériences. Il peut aussi servir comme solution extracellulaire pendant des mesures de courants ioniques traversant les membranes cellulaires.
Le liquide de Ringer est une solution saline isotonique avec un pH équilibré utilisée en recherche biologique. Il est communément utilisé dans des expériences in vivo avec des organes et des tissus.
Vous venez de regarder l’introduction à la réalisation de solutions par JoVE. Dans cette vidéo nous avons vu comment faire une solution du début à la fin... incluant comment déterminer la quantité requise de soluté, comment QSer correctement une solution, et des méthodes de stérilisation. Nous avons aussi vu quelques solutions habituelles ainsi que leurs applications en recherche biologique .
Merci de nous avoir regardé, et souvenez-vous de toujours utiliser la technique appropriée pour réaliser des solutions.
La fabrication de solutions est une procédure essentielle impliquée dans pratiquement toutes les expériences biologiques et chimiques réalisées dans le monde entier.
Une solution est constituée d’une substance dissoute dans un liquide. La substance dissoute est connue sous le nom de soluté et le fluide en vrac sous le nom de solvant. Le mélange homogène qui en résulte est appelé solution.
Les solutions peuvent être décrites par leur concentration en soluté, une mesure de la quantité de soluté présente par unité de solution.
La formulation de solutions peut être une compétence de base en laboratoire, mais une mauvaise technique peut faire la différence entre une expérience réussie ou ratée.
La sécurité est la première chose à prendre en compte lors de l’élaboration de solutions. Il est important de prendre les précautions appropriées, comme porter des gants et une blouse de laboratoire, selon le type de produits chimiques avec lesquels vous travaillez.
Il existe de nombreuses façons différentes de trouver une solution. Cette vidéo montrera la façon la plus courante de fabriquer une solution à base d’eau ou aqueuse.
Déterminez d’abord les moles de soluté dont vous aurez besoin pour atteindre la concentration souhaitée dans un volume donné de solution. Convertissez ensuite cette valeur en grammes en utilisant le poids moléculaire, ou le nombre de grammes par mole, du produit chimique.
Les produits chimiques peuvent être pesés à l’aide d’une balance numérique et d’un bateau de pesée.
Un cylindre gradué peut ensuite être utilisé pour mesurer un volume d’eau purifiée qui représente environ les trois quarts du volume final de la solution.
Il est impératif que les solutions aqueuses soient préparées avec de l’eau purifiée plutôt qu’avec de l’eau du robinet. Ne pas le faire peut compromettre la qualité non seulement de la solution, mais aussi de plusieurs expériences ultérieures.
À ce stade, l’eau purifiée doit être transférée dans un bécher contenant une barre d’agitation sur une plaque d’agitation magnétique.
Les solutés mesurés peuvent ensuite être ajoutés à l’eau purifiée d’agitation. Remuer le mélange aide le soluté à se dissoudre. L’application de chaleur peut également être utilisée à cette fin.
Une fois que tous les solutés ont été dissous dans le solvant, le pH de la solution peut être ajusté à l’aide d’un pH-mètre. Pour augmenter le pH, ajoutez de l’hydroxyde de sodium dilué à la solution d’agitation. Pour faire baisser le pH, ajoutez de l’acide chlorhydrique dilué. Assurez-vous d’ajouter lentement l’acide ou la base, car le pH peut changer rapidement.
Le papier pH peut également être utilisé pour mesurer le pH d’une solution, mais l’utilisation d’un pH-mètre calibré permet une mesure plus précise.
La solution est ensuite versée dans une fiole jaugée à l’aide d’un entonnoir afin de pouvoir la porter jusqu’à son volume final. L’addition de la quantité suffisante pour atteindre ce volume est connue sous le nom de Q.S. ? la solution.
Assurez-vous que le ménisque est aligné avec la marque sur la fiole jaugée. Dans une solution aqueuse, le ménisque est concave et doit être lu au point le plus bas de la courbe.
Lors de recherches biologiques, en particulier celles impliquant des cellules vivantes, il peut être nécessaire de stériliser les solutions avant d’être utilisées. Cela peut être fait par autoclavage, qui soumet la solution à de la vapeur à haute température sous haute pression.
Alternativement, la solution peut être stérilisée en passant sur un filtre de 0,22 micron, ce qui exclura toute cellule bactérienne.
Maintenant que vous avez une compréhension fondamentale de la façon de créer des solutions, il est temps de jeter un coup d’œil à certaines solutions couramment utilisées en laboratoire et à leurs applications.
Dans la recherche biologique, de nombreuses solutions sont conçues pour imiter les fluides physiologiques. Ces solutions sont tamponnées, ce qui signifie qu’elles résistent aux changements de pH dans une plage spécifique ; habituellement, le pH est maintenu à environ 7,4 pour simuler les fluides intracellulaires et extracellulaires.
La solution saline tamponnée au phosphate, ou PBS, est un tampon couramment utilisé dans la recherche biologique qui imite le pH physiologique et l’osmolarité. L’osmolarité fait référence aux moles totales de soluté dans une solution. Par exemple, une solution contenant 1 mole de NaCl a 2 osmoles de soluté, car les ions sodium et cloure se dissocient en solution. Le PBS a des concentrations ioniques qui correspondent étroitement à celles des cellules, ce qui en fait une solution isotonique, ce qui signifie que la quantité de soluté à l’extérieur de la cellule est équivalente à ce que l’on trouve à l’intérieur de la cellule. Le PBS est composé de plusieurs sels différents dans l’eau, y compris des sels avec des groupes phosphate qui maintiennent un pH constant dans la plage de 7,2 à 7,6.
Les utilisations courantes du PBS en laboratoire comprennent le lavage des cellules et la dilution de biomolécules telles que les protéines.
Le liquide céphalo-rachidien artificiel, ou ACSF, imite les concentrations d’électrolytes du liquide céphalo-rachidien. Cette solution doit être fraîchement préparée, et le pH, l’osmolarité et la composition ionique doivent être soigneusement surveillés pour correspondre aux conditions in vivo.
L’ACSF est généralement utilisé dans les études électrophysiologiques pour préparer des coupes de cerveau et les perfuser lors d’expériences. Il peut également servir de solution extracellulaire lors de la mesure du patch clamp.
La solution de Ringer est une solution saline isotonique au pH équilibré utilisée dans la recherche biologique. Il est couramment utilisé dans les expériences in vitro avec des organes et des tissus.
Vous venez de regarder l’introduction de JoVE à la création de solutions. Dans cette vidéo, nous avons vu comment créer une solution du début à la fin ? y compris comment déterminer la quantité requise de soluté (A), comment QS correctement une solution (B) et les méthodes de stérilisation (C). Nous avons également passé en revue certaines solutions courantes ainsi que leurs applications dans la recherche biologique (D).
Merci d’avoir regardé, et n’oubliez pas de toujours utiliser la bonne technique lors de la préparation de solutions.
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