Name: Ex méthode in vivo pour limagerie haute résolution de la motilité Cilia dans Rongeur épithélium des voies respiratoires (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: Découvrez une méthode ex vivo pour imager et quantifier la motilité des cils respiratoires dans la trachée de souris. Cette technique permet d'analyser la fréquence des battements et le flux généré par les cils avec une microscopie vidéo haute vitesse.

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Le projet a été soutenu par le NIH subvention U01HL098180 du National Heart, Lung, and Blood Institute. Le contenu relève de la seule responsabilité des auteurs et ne représentent pas nécessairement les vues officielles de la National Heart, Lung, and Blood Institute ou le National Institutes of Health

1. Réactifs Setup 1.1 Dissection et l&#39;imagerie moyen L-15 du milieu de Leibovitz (L15) est complété avec du FBS (10%) et pénicilline-streptomycine (100 unités / ml de pénicilline G sodique et 100 pg / ml de sulfate de streptomycine) est utilisé à la fois pendant la récolte et de l&#39;imagerie d&#39;échantillons trachée. 2. Shallow fortifiée hémicycle de la culture La chambre utilisée pour maintenir le tissu trachée est illustré à la figure 1. Le sol de la chambre est le fond de verre 35 mm boîte de culture. Le haut et le côté de la chambre est généré en plaçant un petit morceau de 0,3 mm feuilles de silicone épaisse sur le plat en verre. Le bord de la feuille est coupée pour s&#39;adapter à la coupelle à fond rond et le centre est en outre découpé pour former une chambre centrale peu profonde (voir les étapes 2.1 à 2.3). Au sommet de cette assemblée, une lamelle de verre ronde de 18 mm est placé à générer une enceinte appropriée pour l&#39;imagerie. <ol><li> Recouvrir complètement un mm en verre ronde glissement 18 de couverture avec un carré de 0,3 mm feuilles de silicone épais. </li><li> Avec des ciseaux de dissection standards couper les feuilles de silicone excès de partout dans le bord de la lamelle (résultant en une couche circulaire de feuilles de silicone). </li><li> Avec un scalpel découper et enlever une place centrale de feuilles de silicone (environ 10 mm de côté) à partir du milieu de la lamelle couvert (formant ainsi le dessus et les côtés de la chambre d&#39;imagerie). </li></ol> 3. Trachée récolte et préparation <ol><li> Euthanasier les souris en conformité avec les soins aux animaux institutionnelles locales et utiliser comité et / ou les directives gouvernementales et enlever la trachée en plastique 35 mm boîte de culture standard avec suffisamment L15 médias au tissu de plonger (auteurs ont utilisé des souris juste avant la naissance au jour de gestation 16.5, par le biais de animaux nouveau-nés, néonatale et adulte 2). </li><li> Enlever le tissu non associé trachée fixé à l&#39;extérieur dela trachée en utilisant dissection. </li><li> Retirez le larynx avec une coupe transversale juste au-dessous du cartilage cricoïde l&#39;aide de micro ciseaux de dissection (figure 2A, ligne 1). </li><li> Retirez les branches bronchiques primaires à gauche et à droite avec une coupe transversale juste au-dessus de la carène avec des micro ciseaux de dissection (figure 2A, ligne 2). </li><li> Tenir délicatement la trachée avec une pince fine et rincer la lumière 2-3 fois avec environ 1 ml du milieu L15 de bain avec un P1000 et P1000 Pipteman pointe pour dégager le mucus et du sang. </li><li> Découpez un segment d&#39;anneau 3-4 de la trachée avec une coupe transversale avec micro ciseaux de dissection (figure 2B, ligne 1). </li><li> Couper longitudinalement à travers le milieu du muscle trachéal de ce segment trachée court l&#39;aide de micro ciseaux de dissection (figure 2B, ligne 2). </li><li> Couper longitudinalement au milieu des anneaux de cartilage trachéal l&#39;aide de micro ciseaux de dissection (figure 2C </strong&gt;, ligne), laissant deux morceaux de tissu trachée adapté pour l&#39;imagerie (section unique montre la figure 2D). </li></ol> 4. Imagerie par Cilia <ol><li> Transfert segments de tissu trachée, côté lumière vers le bas, sur le milieu d&#39;un mm à fond de verre plat 35 de culture avec 100-200 pi de milieu L-15. </li><li> Pour quantifier les cils flux généré ajouter une petite quantité de fluorescence 0,20 um microsphères dans le milieu L-15 baignant l&#39;échantillon de tissu trachée (~ 1 x 10 11 particules / ml ou de 20 ul / ml de la suspension à 2,5% de microsphères aqueuse Fluoresbrite). </li><li> Placer la chambre d&#39;imagerie préparé précédemment (voir procédure 3.1 ci-dessus) au-dessus de l&#39;échantillon côté de la feuille de silicone trachée vers le bas, avec l&#39;échantillon trachée située au milieu de la chambre à paroi peu profonde formée par la fenêtre découpée dans la feuille de silicone (Figure 1 ). </li><li> Appuyez doucement sur la lamelle pour sécuriser en place et enlever l&#39;excédent L-15 médias de l&#39;usin bordsga P1000 et P1000 pointe Pipetman. </li><li> Monter le fond de verre plat de culture de 35 mm et un échantillon de trachée sur un microscope inversé avec optique 100X objectifs et DIC. </li><li> En utilisant une caméra à haute vitesse et le logiciel d&#39;acquisition de film recueillir films de la motilité des cils à 200 + images par seconde le long de l&#39;épithélium trachéal ciliées de l&#39;recroquevillés bord du muscle trachéal (figure 2D Décrit boîte, E: par exemple image fixe de vidéo enregistrée) (Film supplémentaire 1). </li><li> En utilisant l&#39;imagerie à fluorescence FITC et une caméra CCD bas de lumière (voir la liste des équipements ci-dessus), rassembler films de mouvement de microsphères fluorescentes à travers la surface de l&#39;épithélium trachéal ciliée pour permettre la quantification des cils plus tard flux généré (Movie supplémentaire 2). </li></ol> 5. La quantification de la motilité Cilia <ol><li> Chargez films imagés DIC dans le logiciel ImageJ et suivant la technique décrite par Iain Drummond 13 utiliser l&#39;outil Ligne pour tracer une ligne de trame traversant les cils battant. Un &quot;retrancher&quot; de cette ligne génère une image du type à kymographe où le mouvement des cils sur la ligne génère un motif d&#39;onde. Le nombre de pixels entre chaque crête de l&#39;onde est leur mesurés (un pixel = une séquence vidéo) à partir de laquelle le nombre de battements par minute (soit Hz) peut alors être calculée. </li><li> Pour mesurer les cils ont généré des flux de charge films perles fluorescentes dans le logiciel ImageJ, et utiliser le plugin MTrackJ 14 pour suivre manuellement billes fluorescentes sur la surface de l&#39;épithélium de la trachée et de laisser le logiciel génère vitesse perle et la directivité pour chaque perle suivi. </li></ol> Des précautions doivent être prises lors de l&#39;utilisation des billes fluorescentes pour quantifier le débit comme la distance entre les cils battant peut fortement influencer l&#39;ampleur du débit mesuré. Le mouvement bourrelet supplémentaire Movie 2 est un bon exemple de cela. Dans cet exemple perlele mouvement est rapide à la surface des cils battant et diminue considérablement hors de perles plus loin dans les médias de bain. Pour contrôler cela, tracés de perles ne devraient être collectées à une distance fixe au-dessus de l&#39;épithélium cilié dans tous les échantillons pour permettre des comparaisons appropriées à prendre. Enfin, pour obtenir des données représentatives sur l&#39;écoulement du fluide, perles devraient être suivis aussi longtemps que possible, nous préférons utiliser des pistes de perles qui couvrent les cellules ciliées 10 + pour le calcul de l&#39;écoulement du fluide.

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<li>Shah, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+Bardet-Biedl+syndrome+proteins+alters+the+morphology+and+function+of+motile+cilia+in+airway+epithelia%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Loss of Bardet-Biedl syndrome proteins alters the morphology and function of motile cilia in airway epithelia.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 3380-3385 (2008).</li>
<li>Clary-Meinesz, C. F., Cosson, J., Huitorel, P., Blaive, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+effect+on+the+ciliary+beat+frequency+of+human+nasal+and+tracheal+ciliated+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+of+the+Cell+%2F+under+the+auspices+of+the+European+Cell+Biology+Organization%22%5BJournal%5D)">Temperature effect on the ciliary beat frequency of human nasal and tracheal ciliated cells.</a> Biology of the Cell / under the auspices of the European Cell Biology Organization. 76, 335-338 (1992).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à révéler.

Mesure de la fréquence de battement des cils (CBF) est relativement facile en utilisant objectifs de microscope haute puissance et l&#39;image matériel d&#39;acquisition rapide 13,15, et explique pourquoi les mesures CBF forment la base de la plupart des études portant sur ​​la clairance mucociliaire pendant la santé et la maladie. Cependant, alors que la mesure CBF est essentielle pour comprendre clairance muco-ciliaire, la mesure de CBF seul ignore l&#39;importance fondamentale des deux flux générés ciliair...

Analyse de la fonction de cils mobiles dans l&#39;épithélium des voies respiratoires est expérimentalement importantes pour comprendre les facteurs génétiques et environnementaux qui peuvent affecter la clairance muco-ciliaire et la santé pulmonaire 1. Le protocole simple mis au point pour l&#39;imagerie de la souris épithélium des voies respiratoires constitue une méthode efficace pour interroger voies cils motilité des modèles mutants et KO souris et ne nécessitent que des compétences de base chez la souris dissection du tissu trachéal et l&#39;imagerie ex vivo des voies respiratoires cils motilité avec vidéo-microscopie à haute résolution. Ce protocole a été établi et perfectionné au cours d&#39;un écran de mutagenèse souris à grande échelle pour permettre une évaluation rapide de la fonction de cils mobiles (fréquence de battement de cils, la forme de battement de cils, cils flow généré) dans des mutants présentant une cardiopathie congénitale associée à hétérotaxie 2-5. Les techniques actuelles utilisées pour étudier la motilité des cils des voies aériennes peuvent être regroupées en deux l&#39;ancien type vivo ou lon aiguëger terme dans les approches expérimentales in vitro. Expériences aigus comprennent visualisation ex vivo de nasales / voies aériennes biopsies humaines brosse 6,7 et une analyse des sections transversales des voies respiratoires simples 8. Les approches in vitro utilisent diverses techniques de culture cellulaire pour générer des feuilles de l&#39;épithélium cilié différenciée comme dans les cultures de l&#39;interface air liquide ou respiratoires cultures de suspension 9-11. Cependant, ces techniques de reciliation épithélium des voies respiratoires nécessitent des investissements très importants en temps et en formation avant les cellules épithéliales ciliées utilisables sont produites pour l&#39;expérimentation (4-6 semaines 9,10). Bien que l&#39;analyse ex vivo aiguë des voies respiratoires biopsies de pinceau épithéliales sont couramment utilisées pour les études cliniques chez l&#39;homme, cette méthode n&#39;est pas utilisable dans les études de souris dues à une lésion tissulaire mécanique exacerbée 12. La technique décrite dans ce protocole pour l&#39;analyse des protocoles d&#39;ententee trachéale épithélium des voies respiratoires n&#39;est pas seulement simple à réaliser, mais il ne nécessite pas de compétences particulières de dissection, ni aucun équipement spécialisé en dehors de celles norme d&#39;imagerie par vidéo-microscopie. Il ya de nombreux avantages à ce protocole très simple. Tout d&#39;abord, comme la récolte de tissus trachée de la souris est rapide et facile à réaliser, il permet une évaluation rapide de la fonction des cils des voies aériennes dans un grand nombre de souris. Cela peut inclure une analyse aiguë des effets à court terme des différents traitements in vitro. D&#39;autre part, étant une technique ex vivo, l&#39;épithélium respiratoire cilié reste attaché à elle sous-jacent tissus de soutien et de conserver ainsi les voies de signalisation cellulaire associées. Par conséquent, en comparaison avec in vitro reciliated épithélium des voies respiratoires, cette préparation est une meilleure représentation de la nature dans un environnement de tissus in vivo. Troisièmement, ce protocole permet l&#39;acquisition d&#39;un certain nombre de paramètres quantitatifs qui peuvent fournir une évaluation objective de la motilité ciliaire fonction. Enfin, contrairement à d&#39;autres méthodes actuelles de voies cils visualisation, ce protocole permet de visualiser des cils perpendiculairement à la direction de battement de cils, ce qui permet la vue de profil des cils qui est optimale pour l&#39;imagerie à haute résolution de battement de cils et de génération d&#39;ondes metachronal . Ce protocole peut être modifié dans un certain nombre de façons d&#39;aborder un large éventail de besoins expérimentaux tels que le rôle des agents pharmacologiques, des facteurs génétiques, expositions environnementales, et / ou des facteurs mécaniques tels que la charge de mucus sur la fonction des cils des voies respiratoires et de la production / maintenance de voies respiratoires battement de cils et de la propagation des ondes metachronal.

<table><tbody><tr><td>Leibovitz' s L-15 Medium </td><td>Invitrogen</td><td>21083-027</td><td>Sans phénol rouge </td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin </td><td>Hyclone</td><td>SH30088.03</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine </td><td>Invitrogen</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>2x pince fine </td><td>Roboz</td><td>RS-4976</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux de dissection </td><td>Roboz</td><td>RS-5676</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux de micro-dissection </td><td>Roboz</td><td>RS-5620</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel </td><td>Roboz</td><td>RS-9801-15</td><td></td></tr><tr><td>P1000 pipetman </td><td>Gilson, Inc</td><td>F123602</td><td></td></tr><tr><td>pointes P1000 </td><td>Molecular BioProducts</td><td>2079E</td><td></td></tr><tr><td>18 mm rond en verre Couvercles </td><td>Fisher Scientific</td><td>430588</td><td></td></tr><tr><td>Plastique 35 mm Boîtes de culture </td><td>Corning</td><td>430588</td><td></td></tr><tr><td>Fond en verre 35 mm Boîtes de culture </td><td>Warner Instruments</td><td>W3 64-0758</td><td></td></tr><tr><td>Feuille de silicone 0,012" (0,3 mm) d’épaisseur </td><td>AAA Acme Rubber Co</td><td>CASS-.012X36-63908</td><td></td></tr><tr><td>0,20 &mu ; m de diamètre Fluoresbrite YG Carboxylate Microsphères Polysciences </td><td></td><td>09834-10</td><td></td></tr><tr><td>Microscope inversé, avec objectif à huile 100x et filtres DIC </td><td>La marque Lecia</td><td>DMIRE2</td><td>n’est pas critique. </td></tr><tr><td>Lampe au mercure de 100 watts, filtres d’excitation/émission FITC épifluorescents</td> La marque <td>Lecia n’est</td><td></td><td>pas critique.</td></tr><tr><td>Platine de microscope Incubateur</td><td>Lecia</td><td>11521749</td><td>Non requis si l’imagerie des cils à température ambiante</td></tr><tr><td>Caméra haute vitesse à champ lumineux </td><td>Vision Research</td><td>Phantom v4.2</td><td>La marque n’est pas critique. Doit être plus rapide que 125 fps</td></tr><tr><td>Caméra fluorescente à grande vitesse </td><td>Hamamatsu</td><td>C9100-12</td><td>La marque n’est pas critique. Doit être plus rapide que 10 fps</td></tr><tr><td>Logiciel d’analyse de films</td><td>National Institutes of Health</td><td>ImageJ avec plugin</td><td></td> MtrackJ</tr></tbody></table>

ex méthode in vivo pour l&#39;imagerie haute résolution de la motilité cilia dans rongeur épithélium des voies respiratoires

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Une technique ex vivo pour l&#39;imagerie souris épithélium des voies respiratoires pour l&#39;analyse quantitative de la fonction de cils mobiles importante pour comprendre la fonction de la clairance mucociliaire a été établi. Fraîchement récoltées souris trachée est coupé longitudinalement à travers le muscle trachéal et monté dans une chambre fortifiée peu profonde sur un plat à fond de verre. L&#39;échantillon trachée est positionné le long de son axe pour tirer profit du muscle trachéal à se recourber longitudinalement. Cela permet à l&#39;imagerie du mouvement ciliaire dans la vue de profil sur toute la longueur trachéale. Vidéos à 200 images / sec sont obtenus en utilisant l&#39;interférence différentiel microscopie en contraste et une caméra numérique à haute vitesse pour permettre une analyse quantitative de la fréquence de battement des cils et forme d&#39;onde ciliaire. Avec l&#39;ajout de billes fluorescentes lors de l&#39;imagerie, les cils écoulement de fluide générée peut également être déterminé. Le temps de protocole couvre environ 30 min, à 5 min de préparation chambre, 5-10 min pour l&#39;échantillonmontage et 10-15 min pour vidéomicroscopie.

Contrôle des voies aériennes cils doit être clairement visible et vu à battre de manière coordonnée (Film 1 supplémentaire; la lecture du film est ralentie à 15% en temps réel), avec un débit notable dans le sens du battement de cils (Film complémentaire 2; la lecture du film est de 100% temps réel). La quantification des films de cils devrait donner des résultats similaires à ceux observés dans la figure 3. Collection de films DIC à grande vitesse permet la quantificat...

Une technique simple et fiable pour la visualisation et quantification des voies respiratoires motilité des cils et cils de flux générés en utilisant la souris trachée est décrite. Cette technique peut être modifiée pour déterminer comment un grand nombre de facteurs influencent la motilité des cils, y compris les agents pharmacologiques, des facteurs génétiques, expositions environnementales, et / ou des facteurs mécaniques tels que la charge de mucus.

Ex méthode in vivo pour l&#39;imagerie haute résolution de la motilité Cilia dans Rongeur épithélium des voies respiratoires

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

L'objectif général de cette procédure est de visualiser et de quantifier la motilité des CLIA respiratoires et les flux générés par les CLIA à l'aide de trachées de souris fraîchement isolées. Cette opération s'effectue en préparant tout d'abord une chambre d'imagerie peu profonde. Les étapes suivantes consistent à récolter et à monter le tissu trachéal pour l'imagerie.Ensuite, on montre comment visualiser et enregistrer la motilité C et l'écoulement généré par les CLIA à l'aide d'un microscope inversé équipé d'une vidéographie à grande vitesse à travers un objectif 100 XDIC. La dernière étape consiste à analyser la vidéo en quantifiant la fréquence de battement des CLIA et l'écoulement généré par les CLIA à l'aide du logiciel Image J. En définitive, les résultats peuvent montrer des modifications de la motilité respiratoire des CLIA et de l'écoulement généré par les CLIA grâce à la microscopie vidéo à grande vitesse.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes réside dans sa capacité à permettre une imagerie reproductible de l'épithélium tra des rongeurs, permettant ainsi des évaluations quantitatives cohérentes du mouvement cilié. Cela peut être ré

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Ici, nous développons les outils nécessaires...

Ex vivo d&#39;imagerie en temps réel de simples divisions cellulaires dans neuroépithélium de souris

Les cils des neurones sensoriels olfactifs contiennent des protéines de la cascade de transduction du signal, mais une analyse spatiale détaillée de leur distribution est difficile dans les cryosections. Nous décrivons ici une approche optimisée pour le marquage de l’ensemble du montage et la visualisation en face des protéines ciliaires.

Mont entiers étiquetage des Cilia dans le système olfactif principal de souris

Utilisation de haute résolution contraste d'interférence différentiel (DIC) microscopie, un ex vivo observation du battement des cils épendymaire mobiles situés dans les ventricules du cerveau de souris est démontrée par live-imagerie. La technique permet un enregistrement de l'unique fréquence ciliaire battant et l'angle battant ainsi que leurs propriétés calcium intracellulaire oscillation de stimulation.

Imagerie en direct de la épendymaire Cilia dans les ventricules latéraux du cerveau de souris

Dans cette étude, une technique détaillée de microscopie optique a été optimisée pour l’observation et l’analyse en temps réel du mouvement des cils CPEC ex vivo, ainsi qu’une méthode de microscopie électronique pour l’analyse ultrastructurale.

Observation du Mouvement ciliaire des cellules épithéliales plexus choroïde<em&gt; Ex Vivo</em

Nous décrivons une méthode pour visualiser gFP-étiquetée IELs utilisant l'imagerie intravitale de l'intestin grêle murine par microscopie confocale de disque de rotation inversée. Cette technique permet le suivi des cellules vivantes dans la muqueuse jusqu'à 4 h et peut être utilisée pour étudier une variété d'interactions intestinales immunisées-épithéliales.

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Nous décrivons un protocole simple pour développer des organoïdes épithéliales mucociliary des cellules profondes d’ectoderm isolées des embryons de Xenopus laevis. Les progéniteurs multipotents régénèrent les précurseurs épithéliales des cellules gobelet et permettent un suivi en direct de l’initiation et de la progression des transitions cellulaires à la surface des organoïdes.

Organoïdes épithéliales mucociliaires des cellules embryonnaires de Xenopus : génération, culture et imagerie vivante haute résolution

Dans cette publication, nous décrivons des protocoles pour évaluer le dégagement mucociliary de voie aérienne (MCC) chez les souris in vivo utilisant la formation image de radionucléide de double modalité. Ce protocole est conçu pour une seule tomographie calculée par émission de photons (SPECT) et un protocole d’acquisition de tomographie calculée (CT) à l’aide de collimateurs de corps entier de souris (MWB) dans un système spect/CT double.

Évaluation in vivo de l’autorisation mucociliaire chez la souris

Pour garantir une analyse fonctionnelle ciliaire réussie et de haute qualité pour le diagnostic de la DCP, une méthode précise et minutieuse d’échantillonnage et de traitement de l’épithélium respiratoire est essentielle. Afin de continuer à fournir des services de diagnostic de la DCP pendant la pandémie de COVID-19, le protocole de vidéomicroscopie ciliaire a été mis à jour pour inclure des mesures appropriées de contrôle des infections.

Échantillonnage et traitement du brossage nasal à l’aide de la vidéomicroscopie ciliaire numérique à grande vitesse – Adaptation à la pandémie de COVID-19

Ce protocole décrit la collecte, l’expansion et la différenciation des cellules épithéliales nasales en modèles organotypiques de cellules épithéliales des voies respiratoires et la quantification de la fréquence des battements de cils via l’imagerie de cellules vivantes et des scripts personnalisés.

Collecte, expansion et différenciation de modèles de cellules épithéliales nasales nasales humaines primaires pour la quantification de la fréquence des battements de cils

La culture d’interface air-liquide est couramment utilisée pour développer un épithélium des voies respiratoires pseudostratifié en différenciant les cellules épithéliales bronchiques humaines normales primaires qui imitent la face apicale des voies respiratoires pulmonaires. Nous décrivons ici un protocole simple pour déterminer sa qualité en surveillant ses propriétés biophysiques, telles que la fonction ciliaire et l’intégrité de la membrane.

Détermination de la fonction ciliaire et de l’imperméabilité membranaire de l’épithélium des voies respiratoires pulmonaires pseudostratifié

Cette méthode décrit l’exploitation du signal endogène dans un modèle murin transgénique ARL13B-CENTRIN-2 pour imager des cils primaires in situ, en trois dimensions sur de grandes surfaces de tissu minéralisé, de la collecte de tissus à l’analyse de l’organisation des cils. Ce protocole peut également être appliqué à d’autres types de tissus.

Imagerie volumétrique et analyse des cils primaires dans le tissu musculo-squelettique à l’aide du modèle murin ARL13B-CENTRIN-2

Découvrez une méthode ex vivo pour imager et quantifier la motilité des cils respiratoires dans la trachée de souris. Cette technique permet d'analyser la fréquence des battements et le flux généré par les cils avec une microscopie vidéo haute vitesse.

Ex méthode in vivo pour l'imagerie haute résolution de la motilité Cilia dans Rongeur épithélium des voies respiratoires

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