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La mise en œuvre Clamp dynamique avec conductances synaptiques et artificielle chez la souris cel...
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JoVE Journal Neuroscience
Implementing Dynamic Clamp with Synaptic and Artificial Conductances in Mouse Retinal Ganglion Cells

La mise en œuvre Clamp dynamique avec conductances synaptiques et artificielle chez la souris cellules ganglionnaires rétiniennes

Full Text
12,831 Views
11:46 min
May 16, 2013

DOI: 10.3791/50400-v

Jin Y. Huang1, Klaus M. Stiefel2, Dario A. Protti3

1Discipline of Biomedical Science, School of Medical Sciences, Sydney Medical School and Bosch Institute,University of Sydney , 2The MARCS Institute,University of Western Sydney, 3Discipline of Physiology, School of Medical Sciences, Sydney Medical School and Bosch Institute,University of Sydney

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Cet article de la vidéo illustre la mise en place, les procédures de patcher les corps cellulaires et la façon de mettre en œuvre les enregistrements de serrage dynamiques à partir de cellules ganglionnaires dans l'ensemble du montage souris rétines. Cette technique permet l'étude de la contribution précise des entrées synaptiques excitateurs et inhibiteurs, et leur importance relative et le calendrier de dopage neuronale.

L’objectif général de l’expérience suivante est d’étudier les effets des changements dans le rapport et le moment relatif des entrées synaptiques excitatrices et inhibitrices sur l’activité de pointe des neurones en utilisant des cellules ganglionnaires rétiniennes comme neurones modèles. Ceci est réalisé en patchant le corps cellulaire d’une cellule ganglionnaire dans une rétine entière, à l’aide d’une pipette en verre remplie d’une solution intracellulaire qui ressemble à la composition ionique physiologique et au jaune de Lucifer pour identifier morphologiquement le type de cellule comme une deuxième étape à l’aide d’une pince dynamique, un ensemble de formes d’onde de conductance excitatrices et inhibitrices sont injectées dans le corps cellulaire, qui produisent une modification du potentiel membranaire en réponse. Ensuite, diverses formes d’onde de conductance obtenues à partir d’expériences physiologiques dans des conditions de contrôle, ou en présence de médicaments, sont injectées dans le corps cellulaire afin d’obtenir les réponses neuronales correspondantes.

Les résultats montrent les effets des modifications du rapport d’excitation et d’inhibition sur l’activité de pointe des cellules ganglionnaires rétiniennes basées sur l’injection de courants composés de conductances excitatrices et inhibitrices via des enregistrements de pince dynamique. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes telles que la pince de courant ou la pince de tension, est qu’elle fournit un outil interactif par lequel le rapport et le timing relatif des conductances synaptiques excitatrices et inhibitrices peuvent être injectés dans les neurones pour étudier l’influence sur les réponses cellulaires. Cette méthodologie peut fournir des informations sur le fonctionnement des circuits rétiniens ainsi que de tout autre réseau neuronal du système nerveux central.

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Neuroscience Numéro 75 Neurobiologie Ingénierie Biomédicale anatomie physiologie biologie moléculaire biologie cellulaire les neurones les neurones rétiniens des cellules ganglionnaires de la rétine des yeux Retina neurosciences de la rétine les cellules ganglionnaires la conductance synaptique la conductance artificielle la tétrodotoxine (TTX) patch clamp pince dynamique collier de conductance souris modèle animal

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