Décollement de la rétine modèle chez les rongeurs par injection sous-rétinienne de hyaluronate de sodium

L’objectif global de cette procédure est de créer des décollements de rétine expérimentaux avec une hauteur de décollement reproductible et soutenue sans hémorragie sous-rétinienne. Ceci est accompli par first inci, la conjonctive temporale au niveau du limbe postérieur pour séparer la conjonctive de la sclérotique. Dans la deuxième étape, la pointe d’une aiguille de calibre 30 est utilisée pour faire une incision sclérale auto-obturante et une ponction cornéenne.

Ensuite, l’urine de sodium est injectée dans l’espace sous-rétinien pour détacher la rétine neurosensorielle de l’épithélium pigmentaire rétinien sous-jacent. Dans la dernière étape, de la colle cyanoacrylate est placée sur la plaie sclérale et la conjonctive est rattachée à sa position d’origine, réduisant ainsi le risque de fuite urinaire à effet Hall sodique. En fin de compte, le fond d’œil est examiné à l’aide d’un verre de protection pour confirmer la création d’un décollement rétinien en bolus sans hémorragie sous-rétinienne.

Les méthodes existantes pour réduire le décollement de la rétine chez les rongeurs peuvent entraîner une variabilité de la hauteur et la persistance du décollement de la rétine, ce qui entraîne des taux de mortalité cellulaire incohérents mesurés. Avec cette technique, il est possible de créer des décollements de rétine bulleux et persistants reproductibles avec un risque réduit d’hémorroïdes sous-rétiniennes, ce qui permet d’obtenir un modèle fiable de décollement de rétine chez les rongeurs. Le décollement expérimental de la rétine chez les rongeurs est relativement simple à réaliser, a une durée raisonnable et est assez similaire à la maladie humaine.

C’est donc un excellent modèle pour étudier les mécanismes de la mort cellulaire des photorécepteurs et les thérapies pour prévenir la perte de vision. Dans les troubles dégénératifs de la rétine, il est avantageux de créer un décollement reproductible sans hémorragie sous-rétinienne. En effet, la durée accrue du décollement de la rétine ou l’apparition d’une hémorragie sous-rétinienne peut affecter la mort des cellules photoréceptrices.

Après avoir anesthésié une souris de huit semaines, coupez les moustaches de l’animal, puis dilatez la pupille avec une solution contenant 5 % de chlorure de phényle et 0,5 % de tropique sous un microscope chirurgical. Coupez le clia animal, appliquez une anesthésie topique, une solution ophtalmique de chlorhydrate de propane à 0,5 %. Placez la souris en position latérale avec le nez vers le chirurgien, puis insérez la conjonctive temporale au niveau du limbe postérieur, en séparant la conjonctive de la sclérotique à l’aide d’une paire de pinces.

Saisissez la conjonctive au niveau du limbe pour contrôler l’œil. Ensuite, il tenait une aiguille de calibre 30 avec un biseau pointé vers le haut. Utilisez la pointe de l’aiguille pour faire un tunnel à travers la sclère, pénétrant la sclérotique dans la choroïde sans pénétrer la rétine.

Ensuite, en tenant l’aiguille de calibre 30 parallèlement à l’iris, percez la cornée pour réduire la pression intraoculaire. Pointant maintenant le biseau vers le bas. Insérez une aiguille de calibre 33 reliée à une seringue Hamilton de 10 microlitres dans l’espace sous-rétinien et injectez 3,5 microlitres d’urine de sodium.

Cela détachera environ 50 % de la rétine neurosensorielle de l’épithélium pigmentaire rétinien sous-jacent. À l’aide d’une pince, poussez la cornée autour de la ponction cornéenne pour laisser l’humeur aqueuse s’écouler de la ponction cornéenne, puis utilisez une lance chirurgicale en cellulose pour confirmer l’absence de fuite de la plaie sclérale afin de réduire le risque de fuite d’urine au sodium. Placez de la colle cyanoacrylate sur la plaie sclérale, puis fixez la conjonctive à sa position d’origine.

Utilisez une vitre de protection pour vérifier le fond d’œil et confirmer la création d’un décollement de rétine en bolus sans hémorragie sous-rétinienne. Enfin, appliquez une pommade antibiotique sur l’œil pour réduire le risque d’infection. Gardez la souris sur un coussin chauffant pour éviter une température corporelle basse.

Suite à une pression artérielle basse. Renvoyez l’animal dans sa cage après son réveil de l’anesthésie. Pour évaluer la persistance du décollement de rétine provoqué par ce protocole, des cryosections ont été effectuées les jours trois, sept et 14 après l’induction du décollement.

Six yeux ont été utilisés pour chaque point temporel, l’hématine et l’éosine. La coloration a été utilisée pour visualiser les sections qui présentaient chacune un bolus. Décollement de la rétine à l’approche du cristallin.

Aucun œil n’a montré de signe d’infection ou de blessure à la lentille. Une fois maîtrisée, cette chirurgie peut être effectuée en environ cinq minutes En tentant cette procédure, il est important d’effectuer chaque étape en douceur pour éviter de provoquer une fuite de sodium, une hémorragie sous-rétinienne à haute lumière ou une blessure du cristallin, qui peuvent tous affecter la mort des cellules réceptrices dans la rétine détachée. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de créer un décollement de rétine expérimental chez des rongeurs avec une hauteur de décollement reproductible et soutenue sans hémorragie sous-rétinienne.