Name: Complexes métalliques anticancéreux: Synthèse et évaluation de la cytotoxicité par le dosage au MTT (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-10T21:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 14 s
Description: Découvrez la synthèse de complexes métalliques anticancéreux au titane et au vanadium et l'évaluation de leur cytotoxicité par le dosage MTT sur des lignées cellulaires cancéreuses humaines.

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Le financement a été reçu par le Conseil européen de la recherche sous septième programme-cadre de la Communauté européenne (FP7/2007-2013) / ERC convention de subvention ne [239603]

<ol><li> Préparation de la V (V) complexe (figure 2); 18 conduite étapes 1.1-1.4 dans une boîte à gants, si une boîte à gants n&#39;est pas disponible, passez à l&#39;alternative étapes 2 (2.1-2.6). <ol><li> Dissoudre 0,42 mmol des ligands H 2 L dans le THF sec et l&#39;ajouter à une solution sous agitation de quantités équivalentes de VO (O i Pr) 3 dans le THF. </li><li> On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 15 minutes, et retirer les substances volatiles sous vide. </li><li> Ajouter hexane froid et retirer sous vide. Une poudre violet foncé doit être obtenu avec un rendement quantitatif. </li><li> Peser 8 mg du composé obtenu dans un flacon Eppendorf. Passer à l&#39;étape 3. </li></ol></li><li> Préparer le complexe V (V) en utilisant un tube de Schlenk. <ol><li> Dissoudre 0,42 mmol du ligand H 2 L dans du THF sec dans un ballon de Schlenk sec avec un bouchon à septum, attacher à une ligne de Schlenk et s&#39;applique vide / gaz inerte (N 2 ou Ar) environnements alternatif, il est recommandé d&#39;appliquer trois sette tours et attendre 2-5 minutes sur les étages de vide. </li><li> Ajouter THF sec via une seringue à travers le septum. </li><li> Ajouter des quantités équivalentes de VO (O i Pr) 3 dans une solution de THF, qui a été préparé de manière similaire en l&#39;accrochant un ballon de Schlenk sec propre à la ligne, application d&#39;un milieu inerte et en ajoutant les réactifs par l&#39;intermédiaire d&#39;une seringue à partir de la solution de vanadium à celle de la le ligand. </li><li> Incorporer le mélange de réaction à température ambiante pendant 15 minutes et enlever les substances volatiles sous vide, si il ya une préoccupation de produits instables, effectuer le type Schlenk distillation des substances volatiles sous atmosphère inerte; utiliser les flux de gaz inerte pour fixer la verrerie nécessaire qui avait été préalablement séché . </li><li> Ajouter hexane froid et retirer sous vide. Une poudre violet foncé doit être obtenu avec un rendement quantitatif. </li><li> Peser 8 mg du composé obtenu dans un flacon Eppendorf. </li></ol></li><li> Préparation du Ti (IV) complexe (Figure 2), 28 </sup&gt; conduite étapes 3.1 à 3.3 dans une boîte à gants, et si une boîte à gants n&#39;est pas disponible, ajuster les étapes alternatives examinées pour l&#39;analogue de vanadium (étape 2) qui utilisent à la place un tube de Schlenk. <ol><li> Dissoudre 0,35 mmole du ligand L 2 H dans du THF sec, et l&#39;ajouter à une solution sous agitation de quantités équivalentes de Ti (O i Pr) 4 dans du THF. </li><li> On agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 2 h. Retirer les substances volatiles sous vide pour donner un produit jaune avec un rendement quantitatif. </li><li> Peser 8 mg du composé obtenu dans l&#39;Eppendorf flacon. </li></ol></li><li> Préparation des cellules HT-29 plaque de 96 puits <ol><li> Culture cellules HT-29 dans un flacon de 75 cm2 avec du milieu RPMI-1640 contenant 1% de pénicilline / antibiotiques streptomycine, 1% de L-glutamine et 10% de sérum bovin fœtal (FBS), à 37 ° C avec 5% de CO 2 . </li><li> Retirez le support lorsque les cellules HT-29 atteignent la confluence maximale (90-100%, tous les 3-4 jours sans sous-culture). Laver avec 1 mlde trypsine (0,25%) / EDTA (0,05%) solution et le retirer. </li><li> Ajouter 1 ml de trypsine (0,25%) / EDTA (0,05%) et incuber la solution pendant 5 min. </li><li> Détacher les cellules HT-29 de la fiole et ajouter 10 ml du milieu de désactiver l&#39;activité de la trypsine. Transférer 5 ml du mélange de cellules dans un tube. </li><li> Utilisez la pipette pour transférer quelques gouttes du mélange de cellules dans la chambre de compteur. La chambre de compteur comporte 5 x 5 carrés. </li><li> Compter les cellules à 5 places représentatives à l&#39;aide d&#39;un microscope: les 4 carrés dans les coins et celui qui est au milieu. </li><li> Calculer le montant estimé de cellules présentes. Additionner les cellules dans les 5 carrés représentatifs et diviser par 20. </li><li> Diviser par 0,6 la suite de l&#39;étape 4.7. Le nombre obtenu est la quantité de mélange de cellules requis par plaque. Ce calcul repose sur un plateau qui contient de 0,6 x 10 6 cellules (9.000 cellules par puits). </li><li> Utilisez la pipette pour transférer la quantité de mélange de cellules requises par pfin (tel que calculé à la section 4.8) et ajouter 13,2 ml du milieu (200 pi par puits × 66 puits). </li><li> Ajouter le mélange à la plaque de 96 puits par 11 canaux pipette (200 pi par puits, 6 lignes, 66 puits au total). Un puits de chaque ligne doit rester vide pour contrôle à blanc. </li><li> Incuber la plaque à 37 ° C avec 5% de CO2 pendant 24 heures pour permettre aux cellules de se fixer à la plaque. </li></ol></li><li> Insertion des composés <ol><li> Ajouter 200 ul (ou quantité différente en fonction de la plage de concentration souhaitée) de THF sec à 8 mg de chaque composé pesé comme décrit dans l&#39;étape 1.4 (ou 2.6) ou 3.3. Peser 8 mg du ligand L 2 H, aussi. </li><li> Diluer chaque solution de composé plus loin en ajoutant 60 pl de THF dans 9 des tubes Eppendorf différentes. </li><li> Aide d&#39;une pipette 60 ul du mélange à la section 5.1 de la première fiole Eppendorf, remettre en suspension et le transfert de 60 pi à l&#39;autre flacon, et ainsi de suite jusqu&#39;à 10 concentrations différentes sont obtained (y compris le mélange de parent dans la section 5.1). </li><li> Diluer 20 ul de chaque concentration dans le THF avec 180 ul de milieu. </li><li> Préparer une solution de contrôle uniquement avec du THF; 20 ul de THF avec 180 ul de milieu dans chaque mesure. </li><li> Ajouter 10 ul de la solution résultante (y compris le contrôle de THF), à chaque puits contenant déjà 200 ul de la solution mentionnée ci-dessus de cellules dans le milieu pour obtenir des concentrations finales du composé de jusqu&#39;à 200 mg / L (la plage de concentration peut être modifiée en fonction de l&#39;activité de composé). </li><li> Vous pouvez observer une certaine précipitation à la concentration maximale appliquée en fonction de la solubilité du composé. </li><li> Répéter chaque mesure des 3x composés (3 conducteurs de la plaque du même composé); chaque ligne contient: cellules traitées avec le composé à 10 concentrations différentes, une des cellules et contenant traités avec le solvant seul pour le contrôle et 1 puits sans cellules pour flan contrôle. </li><li> Incuber la plaque chargée pendant 3 jours à 37 ° C dans 5% de CO 2, atmosphère. </li></ol></li><li> la mesure de la cytotoxicité en utilisant l&#39;essai au MTT <ol><li> Préparer la solution de MTT en ajoutant 1 g de poudre de MTT à une solution de 200 ml de milieu RPMI-1640 sans rouge de phénol. La solution mère peut être divisée pour tubes de 15 ml et stocké à -20 ° C. </li><li> Ajouter 20 ul de solution de MTT à chaque canal de 11 puits en utilisant une pipette (sauf pour les puits témoins à blanc sans les cellules de l&#39;étape 4.10), et incuber la plaque pendant 3 heures supplémentaires. </li><li> Retirer la solution de milieu de chaque puits. </li><li> Ajouter 200 pi d&#39;isopropanol à chaque puits pour dissoudre le formazan. Incorporer la plaque pendant 0,5 heure jusqu&#39;à homogénéité est atteint. </li><li> Mesurer l&#39;absorbance à 550 nm de 200 pl de la solution mentionnée ci-dessus par un spectrophotomètre lecteur de microplaques. </li><li> Répétez chaque mesure (qui comprend 3 répétitions, voir étape 5.8) sur 3 jours différents. </li><li> Calculer til pourcentage de viabilité cellulaire en déduisant la valeur d&#39;absorbance de contrôle à blanc à partir de la valeur mesurée, en divisant le résultat par l&#39;absorbance de la valeur de commande de solvant THF et en multipliant par 100%. </li><li> Calculer les valeurs de CI50 en utilisant le logiciel GraphPad Prism (ou équivalent). </li><li> L&#39;IC 50 rapportée est la moyenne de toutes les valeurs de CI50 collectées sur au moins trois jours différents, et la valeur d&#39;erreur est la déviation standard. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Niles, A. L., Moravec, R. A., Riss, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+in+vitro+cytotoxicity+assays+for+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Update on in vitro cytotoxicity assays for drug development.</a> Expert Opinion on Drug Discovery. 3, 655-669 (2008).</li>
<li>Hatok, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+assays+for+the+evaluation+of+drug+resistance+in+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">In vitro assays for the evaluation of drug resistance in tumor cells.</a> Clinical and Experimental Medicine. 9, 1-7 (2009).</li>
<li>Wang, D., Lippard, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+processing+of+platinum+anticancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Cellular processing of platinum anticancer drugs.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4, 307-320 (2005).</li>
<li>Muggia, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platinum+compounds+30+years+after+the+introduction+of+cisplatin%3A+Implications+for+the+treatment+of+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Gynecologic+Oncology%22%5BJournal%5D)">Platinum compounds 30 years after the introduction of cisplatin: Implications for the treatment of ovarian cancer.</a> Gynecologic Oncology. 112, 275-281 (2009).</li>
<li>Bruijnincx, P. C., Sadler, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+trends+for+metal+complexes+with+anticancer+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Chemical+Biology%22%5BJournal%5D)">New trends for metal complexes with anticancer activity.</a> Current Opinion in Chemical Biology. 12, 197-206 (2008).</li>
<li>Ott, I., Gust, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non+platinum+metal+complexes+as+anti-cancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Archiv+der+Pharmazie+%28Weinheim%22%5BJournal%5D)">Non platinum metal complexes as anti-cancer drugs.</a> Archiv der Pharmazie (Weinheim. 340, 117-126 (2007).</li>
<li>Desoize, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metals+and+metal+compounds+in+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Anticancer+Research%22%5BJournal%5D)">Metals and metal compounds in cancer treatment.</a> Anticancer Research. 24, 1529-1544 (2004).</li>
<li>Jakupec, M. A., Galanski, M., Arion, V. B., Hartinger, C. G., Keppler, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antitumour+metal+compounds%3A+more+than+theme+and+variations%5BTitle%5D)+AND+%22Dalton+Transactions%22%5BJournal%5D)">Antitumour metal compounds: more than theme and variations.</a> Dalton Transactions. , 183-194 (2008).</li>
<li>Meléndez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Titanium+complexes+in+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Oncology%2FHematology%22%5BJournal%5D)">Titanium complexes in cancer treatment.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 42, 309-315 (2002).</li>
<li>Evangelou, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vanadium+in+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Oncology%2FHematology%22%5BJournal%5D)">Vanadium in cancer treatment.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 42, 249-265 (2002).</li>
<li>Djordjevic, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antitumor+activity+of+vanadium+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Metal+ions+in+biological+systems%22%5BJournal%5D)">Antitumor activity of vanadium compounds.</a> Metal ions in biological systems. 31, 595-616 (1995).</li>
<li>Caruso, F., Rossi, M., Pettinari, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anticancer+titanium+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Therapeutic+Patents%22%5BJournal%5D)">Anticancer titanium agents.</a> Expert Opinion on Therapeutic Patents. 11, 969-979 (2001).</li>
<li>Caruso, F., Rossi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antitumor+titanium+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Mini-Review+in+Medicinal+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Antitumor titanium compounds.</a> Mini-Review in Medicinal Chemistry. 4, 49-60 (2004).</li>
<li>Kostova, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Titanium+and+vanadium+complexes+as+anticancer+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Anti-Cancer+Agents+in+Medicinal+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Titanium and vanadium complexes as anticancer agents.</a> Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry. 9, 827-842 (2009).</li>
<li>Tshuva, E. Y., Ashenhurst, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxic+Titanium%28IV%29+Complexes%3A+Renaissance%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Inorganic+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Cytotoxic Titanium(IV) Complexes: Renaissance.</a> European Journal of Inorganic Chemistry. , 2203-2218 (2009).</li>
<li>Buettner, K. M., Valentine, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioinorganic+Chemistry+of+Titanium%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Reviews%22%5BJournal%5D)">Bioinorganic Chemistry of Titanium.</a> Chemical Reviews. 112, 1863-1881 (2012).</li>
<li>Meker, S., Margulis-Goshen, K., Weiss, E., Magdassi, S., Tshuva, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+antitumor+activity+of+highly+resistant+salan-titanium%28IV%29+complexes+in+nanoparticles%3A+an+identified+active+species%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition+in+English%22%5BJournal%5D)">High antitumor activity of highly resistant salan-titanium(IV) complexes in nanoparticles: an identified active species.</a> Angewandte Chemie International Edition in English. 51, 10515-10517 (2012).</li>
<li>Reytman, L., Braitbard, O., Tshuva, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+cytotoxic+vanadium%28V%29+complexes+of+salan+ligands%3B+insights+on+the+role+of+hydrolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Dalton+Transactions%22%5BJournal%5D)">Highly cytotoxic vanadium(V) complexes of salan ligands; insights on the role of hydrolysis.</a> Dalton Transactions. 41, 5241-5247 (2012).</li>
<li>Tzubery, A., Tshuva, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytotoxicity+and+Hydrolysis+of+trans-Ti%28IV%29+Complexes+of+Salen+Ligands%3A+Structure-Activity+Relationship+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22Inorganic+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Cytotoxicity and Hydrolysis of trans-Ti(IV) Complexes of Salen Ligands: Structure-Activity Relationship Studies.</a> Inorganic Chemistry. 51, 1796-1804 (2012).</li>
<li>Tshuva, E. Y., Peri, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modern+cytotoxic+titanium%28IV%29+complexes%3B+Insights+on+the+enigmatic+involvement+of+hydrolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Coordination+Chemistry+Reviews%22%5BJournal%5D)">Modern cytotoxic titanium(IV) complexes; Insights on the enigmatic involvement of hydrolysis.</a> Coordination Chemistry Reviews. 253, 2098-2115 (2009).</li>
<li>Shavit, M., Peri, D., Manna, C. M., Alexander, J. S., Tshuva, E. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+cytotoxic+reagents+based+on+non-metallocene+non-diketonato+well-defined+C-2-symmetrical+titanium+complexes+of+tetradentate+bis%28phenolato%29+ligands%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Active cytotoxic reagents based on non-metallocene non-diketonato well-defined C-2-symmetrical titanium complexes of tetradentate bis(phenolato) ligands.</a> Journal of the American Chemical Society. 129, 12098-12099 (2007).</li>
<li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+Colorimetric+Assay+for+Cellular+Growth+and+Survival+-+Application+to+Proliferation+and+Cyto-Toxicity+Assays%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival - Application to Proliferation and Cyto-Toxicity Assays.</a> Journal of Immunological Methods. 65 (83), 55-63 (1983).</li>
<li>Ahmadian, S., Barar, J., Saei, A. A., Fakhree, M. A. A., Omidi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+Toxicity+of+Nanogenomedicine+in+MCF-7+Cell+Line%3A+MTT+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Cellular Toxicity of Nanogenomedicine in MCF-7 Cell Line: MTT assay.</a> Journal of Visualized Experiments. (26), e1191(2009).</li>
<li>Gonzalez, R. J., Tarloff, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+hepatic+subcellular+fractions+for+Alamar+blue+and+MTT+reductase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">Evaluation of hepatic subcellular fractions for Alamar blue and MTT reductase activity.</a> Toxicology in Vitro. 15, 257-259 (2001).</li>
<li>Denizot, F., Lang, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+Colorimetric+Assay+for+Cell-Growth+and+Survival+-+Modifications+to+the+Tetrazolium+Dye+Procedure+Giving+Improved+Sensitivity+and+Reliability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Rapid Colorimetric Assay for Cell-Growth and Survival - Modifications to the Tetrazolium Dye Procedure Giving Improved Sensitivity and Reliability.</a> Journal of Immunological Methods. 89, 271-277 (1986).</li>
<li>Alley, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feasibility+of+drug+screening+with+panels+of+human+tumor+cell+lines+using+a+microculture+tetrazolium+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay.</a> Cancer Research. 48, 589-601 (1988).</li>
<li>Weyermann, J., Lochmann, D., Zimmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+note+on+the+use+of+cytotoxicity+assays%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">A practical note on the use of cytotoxicity assays.</a> International Journal of Pharmaceutics. 288, 369-376 (2005).</li>
<li>Chmura, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Group+4+complexes+with+aminebisphenolate+ligands+and+their+application+for+the+ring+opening+polymerization+of+cyclic+esters%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Group 4 complexes with aminebisphenolate ligands and their application for the ring opening polymerization of cyclic esters.</a> Macromolecules. 39, 7250-7257 (2006).</li>
<li>Sebaugh, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+accurate+EC50%2FIC50+estimation%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutical+Statistics%22%5BJournal%5D)">Guidelines for accurate EC50/IC50 estimation.</a> Pharmaceutical Statistics. 10, 128-134 (2011).</li>
<li>Yung, W. K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+Chemosensitivity+Testing+and+its+Clinical-Application+in+Human+Gliomas%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgical+Review%22%5BJournal%5D)">In vitro Chemosensitivity Testing and its Clinical-Application in Human Gliomas.</a> Neurosurgical Review. 12, 197-203 (1989).</li>
<li>McCarthy, N. J., Evan, G. I. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMcCarthy%2C+NJ+%22Current+Topics+in+Developmental+Biology%22">Current Topics in Developmental Biology</a>. 36, 259-278 (1997).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent qu&#39;ils n&#39;ont aucun intérêt financier concurrents.

La méthode décrite dans ce manuscrit combine synthèse chimique biologique avec dosage de la viabilité cellulaire. Comme avec toutes les méthodes biologiques concernant les cellules viables, il est essentiel de travailler sous une hotte laminaire, et de maintenir des conditions stériles, y compris l&#39;utilisation de solvants organiques stériles. De plus, la préparation et le stockage de médicaments à base métallique hydrolytiquement instables doivent être effectuées dans des conditions inertes, pour lequel les techniqu...

La chimiothérapie est encore l&#39;un des principaux cours de traitements utilisés dans la clinique pour diverses maladies cancéreuses, et donc grande quantité de recherche est menée dans le monde entier dans le but de développer de nouvelles et améliorées des médicaments anticancéreux. Ces études commencent surtout au niveau chimique, la conception et la préparation de composés, suivie par l&#39;évaluation biologique des propriétés cytotoxiques in vitro. La viabilité cellulaire peut être évaluée par des dosages différents qui fournissent des informations sur l&#39;activité cellulaire 2.1. Le cisplatine est un exemple d&#39;un complexe de platine qui est largement utilisé comme un médicament chimiothérapeutique, qui est considéré comme un traitement efficace surtout pour les cancers testiculaires et ovariennes 4.3. Toutefois, son domaine d&#39;activité étroit et des effets secondaires graves déclenchent des études d&#39;autres complexes de métaux de transition puissant 5-8. Entre autres, le titane (IV) et de vanadium (V) complexes ont montré des résultats prometteurs de haute activité et de réduire9-16 toxicité. Ti (IV) complexes ont été les premiers à entrer en essais cliniques après le cisplatine en raison de ces propriétés, mais ils ont échoué les essais en raison de difficultés de formulation et de l&#39;instabilité à l&#39;hydrolyse. Il existe donc un besoin de développer des dérivés de courant améliorées de ces complexes métalliques qui peuvent combiner une forte activité anti-cancéreuse de la résistance à l&#39;eau 15,17-21. Un défi dans la préparation de Ti (IV) et V (V) se réfère à des complexes de l&#39;instabilité hydrolytique des réactifs précurseurs et, par conséquent, une atmosphère inerte doit être maintenue. La préparation de Ti (IV) et V (V) est effectuée dans des composés N 2 ou Ar conditions dans une boîte à gants ou en utilisant des techniques de ligne de Schlenk. Une méthode courante pour l&#39;évaluation de l&#39;activité anti-cancer est basée sur le MTT (3 - (4,5-dimethylthiazolyl) de bromure -2,5-diphényltétrazolium) dosage. Ce test est un test de viabilité colorimétrique qui a été présenté en 1983 par Mosmann22. Il est très bien étudié et caractérisé, et il est considéré comme très efficace pour évaluer l&#39;efficacité de nouveaux composés cytotoxiques en raison de sa précision, de rapidité, et sa capacité à être appliqué sur la variété de lignées cellulaires. Ce test de viabilité est basé sur le changement de couleur de la molécule de MTT quand il est exposé à des cellules viables. La mesure de l&#39;absorbance, qui est proportionnelle au nombre de cellules viables, et la comparaison à des témoins non traités, l&#39;évaluation de la capacité d&#39;inhibition de croissance des cellules du composé testé permet. Le test colorimétrique MTT est conduite dans un format de plaque à 96 puits 23. Les cellules peuvent nécessiter une pré-incubation dans les puits avant l&#39;ajout du médicament testé. Les temps de pré-incubation peut varier de 0 à 24 heures en fonction des propriétés de la ligne de cellule. Les cellules sont généralement exposés à la drogue pour 24-96 heures en fonction de l&#39;activité du médicament. Solution de MTT est ensuite ajouté à des cellules traitées, où le hurlentow MTT est réduit en formazan pourpre par une variété d&#39;enzymes mitochondriales et cytosoliques qui sont opérationnels dans les cellules viables (figure 1) 24. La molécule MTT n&#39;est pas réduite par les cellules mortes ou des cellules rouges du sang (cellules métaboliquement inactives), des cellules de rate (cellules au repos) et la concanavaline A lymphocytes stimulés par les cellules activées (22). Après 3-4 heures d&#39;incubation avec les MTT Les précipités formazan. La formation de formazan commence après 0,5 h d&#39;incubation, mais pour des résultats optimaux, il est préférable d&#39;exposer les cellules à du MTT pendant au moins 3 heures 22. Par conséquent, le milieu de culture est éliminé et le formazan est solubilisé dans un solvant organique, de préférence l&#39;isopropanol 25, bien que le DMSO peut également être utilisé 26. L&#39;élimination du milieu est crucial pour l&#39;obtention de résultats précis puisque le rouge de phénol, qui est largement commun dans le milieu de croissance, et en précipitant les protéines peuvent interférer avec la mesure de l&#39;absorbance 25. Lorsque la formazan solution homogène atteint, l&#39;absorbance de la solution est mesurée en utilisant un spectrophotomètre lecteur de microplaques. L&#39;absorbance à 550 nm est directement proportionnelle au nombre de cellules dans la gamme de 200-50,000 cellules par puits, et donc de très petites quantités de cellules peut être détectée 22. L&#39;absorbance indique la quantité de cellules viables qui reste après le traitement avec le médicament, et est comparée à l&#39;absorbance des cellules témoins qui n&#39;ont pas été exposés au médicament. L&#39;analyse des résultats par un logiciel approprié fournit la (concentration d&#39;inhibition; 50%) IC 50 valeurs et leurs erreurs statistiques basées sur plusieurs répétitions de la mesure. Le test MTT est largement commun dans des études de cytotoxicité pour le criblage de nouveaux composés anti-cancéreux, en raison de sa précision et sa relative simplicité. Cependant, lors de l&#39;utilisation du test MTT, qui est dépend de la réaction enzymatique, on doit considérer que les différents inhibiteurs d&#39;enzymes peuvent affecter la réduction du MTT und conduire à des résultats erronés 27. En outre, le test MTT ne fournit pas d&#39;informations sur le mécanisme moléculaire de l&#39;activité cytotoxique du médicament 2.

<table><tbody><tr><td colspan="4"><fort>Réactif/Matériel</fort></td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin (FBS)</td><td>Biological Industries</td><td>04-007-1A</td><td></td></tr><tr><td>Hexane AR</td><td>Gadot</td><td>830122313</td><td>Séché à l’aide d’un système de séchage par solvant</td></tr><tr><td>Lignée cellulaire HT-29</td><td>ATCC</td><td>HTB-38</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol AR</td><td>Gadot</td><td>830111370</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamine</td><td>Biological Industries</td><td>03-020-1B</td><td></td></tr><tr><td>MTT</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5655-1G</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotiques pénicilline/streptomycine</td><td>Biological Industries</td><td>03-031-1B</td><td></td></tr><tr><td>RPMI-1640 avec rouge de phénol avec L-glutamine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R8758</td><td></td></tr><tr><td>RPMI sans rouge de phénol</td><td>Biological Industries</td><td>01-103-1A</td><td></td></tr><tr><td>Tétrahydrofurane (THF) AR</td><td>Gadot</td><td>830156391</td><td>séché à l’aide d’un système de séchage par solvant</td></tr><tr><td>Ti(OiPr)4</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>205273-500ML</td><td>sensible à l’humidité</td></tr><tr><td>Trypsine/EDTA</td><td>Biological Industries</td><td>03-052-1B</td><td></td></tr><tr><td>VO(OiPr)3</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>404926-10G</td><td>humidité sensitive</td></tr><tr><td colspan="4">Equipment</td></tr><tr><td>Pipette 12 canaux 30-300 &mu ; l</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipette 12 canaux 5-50 &mu ; l</td><td>Finnpipette</td><td></td><td></td></tr><tr><td>75 cm2 flacon</td><td>NUNC</td><td>156472</td><td></td></tr><tr><td>96 puits avec couvercle (fond plat)</td><td>NUNC</td><td>167008</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Incubateur</td><td>Liant</td><td>APT.line C150</td><td></td></tr><tr><td>Chambre de comptoir</td><td>Marienfeld-Superior</td><td>650030</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf flacon</td><td>KARTELL</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Boîte à gants</td><td>M. Braun</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hotte à flux laminaire</td><td>ADS LAMINAIRE</td><td>OPTIMALE 12</td><td></td></tr><tr><td>Spectrophotomètre lecteur de microplaques</td><td>Bio-Tek</td><td>El-800</td><td></td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Nikon</td><td>Eclipse TS100</td><td></td></tr><tr><td>Pipette 20-200 &mu ; l</td><td>Finnpipette</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pipette 5-50 &mu ; l</td><td>Finnpipette</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

complexes métalliques anticancéreux: synthèse et évaluation de la cytotoxicité par le dosage au mtt

Anticancer Metal Complexes: Synthesis and Cytotoxicity Evaluation by the MTT Assay

Titane (IV) et de vanadium (V) les complexes sont des agents anticancéreux très puissants. Un défi dans leur synthèse se réfère à leur instabilité hydrolytique; par conséquent, leur préparation doit être effectuée sous une atmosphère inerte. Evaluation de l&#39;activité anti-cancéreuse de ces complexes peut être réalisée par le test MTT. Le test MTT est un test colorimétrique basé sur la viabilité de la réduction enzymatique de la molécule de MTT en formazan quand il est exposé à des cellules viables. Le résultat de la réduction est un changement de couleur de la molécule de MTT. Les mesures de l&#39;absorbance par rapport à un contrôle déterminent le pourcentage restant de cellules cancéreuses viables après leur traitement avec des concentrations variables d&#39;un composé testé, ce qui se traduit pour l&#39;activité anticancéreuse du composé et de ses valeurs de CI50. Le test MTT est largement commune dans les études de cytotoxicité en raison de sa précision, la rapidité et la simplicité relative. Ici nous avons préenvoyer un protocole détaillé pour la synthèse de médicaments à base d&#39;air en métal sensible et les mesures de viabilité cellulaire, y compris la préparation des plaques de la cellule, l&#39;incubation des composés avec des cellules, des mesures de viabilité en utilisant le test MTT, et la détermination des valeurs de CI50.

Les complexes ont été préparés sur la base de procédures établies 18,28 et leur pureté peut être évaluée par analyse RMN et élémentaire. Les données reçues à partir du test MTT est analysé pour évaluer la cytotoxicité du composé 18,21. Tout d&#39;abord, la soustraction de la valeur d&#39;absorbance de contrôle à blanc à partir de toutes les autres valeurs est réalisée. En second lieu, le solvant THF valeur de commande est réglée à 100% de viabilité, comme a été ajouté a...

Procédé pour la synthèse de titane et de vanadium agents anticancéreux sensibles à l&#39;air est décrite, ainsi que l&#39;évaluation de leur activité cytotoxique envers la lignée cellulaire de cancer humain par le test MTT.

Complexes métalliques anticancéreux: Synthèse et évaluation de la cytotoxicité par le dosage au MTT

Titanium (IV) and vanadium (V) complexes are highly potent anticancer agents. A challenge in their synthesis refers to their hydrolytic instability; ...

L'objectif général de cette procédure est de préparer des médicaments métalliques anticancéreux et d'évaluer leur cytotoxicité par le test MTT. Cela s'accomplit en premier lieu en synthétisant des composés anticancéreux à base de métaux. La deuxième étape consiste à préparer des plaques de 96 puits contenant des cellules cancéreuses.Ensuite, les composés anticancéreux à base de métaux sont introduits dans les cellules cancéreuses. L'étape finale consiste à mesurer la viabilité cellulaire par le test MTT, où la réduction du MTT par les enzymes mitochondriales et cytosoliques pour former du formazan est mesurée, permettant ainsi d'évaluer l'activité anticancéreuse et la concentration inhibitrice maximale demi-50. Les valeurs IC50 des composés sont ainsi déterminées.En général, les personnes novices dans cette méthode peuvent éprouver des difficultés, car il s'agit d'une procédure en plusieurs étapes qui exige une attention soutenue de la part de l'opérateur de laboratoire et qui doit être réalisée selon un calendrier strict. La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle, car la préparation de la plaque cellulaire n'est pas simple, étant donné que la manipulation de cellules viables nécessite le respect de consignes particulières. Dans une boîte à gants, préparez le complexe de vanadium V en dissolvant 0,42 millimole du précurseur du ligand dans du THF anhydre.Ensuite, ajoutez-le à une solution sous agitation contenant des quantités équivalentes d'oxyde de vanadium tris isopropyle dans le THF. Agitez le mélange réactionnel à température ambiante pendant 15 minutes avant d'éliminer les volatils sous vide. Ajoutez ensuite de l'hexane froid et éliminez-le sous vide.Une poudre violette foncé doit être obtenue avec un rendement quantitatif. Peser huit milligrammes du composé obtenu dans un flacon Eppendorf. Pour préparer le complexe de titane quatre, dissoudre 0,35 millimole du précurseur de ligand dans du THF anhydre, puis ajouter cette solution à une solution sous agitation contenant des quantités équivalentes d'isopropoxyde de titane(IV) dans le THF.Agiter le mélange réactionnel à température ambiante pendant deux heures. Ensuite, éliminer les composés volatils sous vide pour obtenir un produit jaune en rendement quantitatif. Peser huit milligrammes du composé obtenu dans un flacon d'échantillonnage pour préparer les cellules HT 29 dans une plaque de culture de 96 puits. Les cellules dans un flacon de 75 centimètres carrés tel que décrit dans le protocole, retirez le milieu lorsque les cellules HT 29 atteignent une confluence maximale. Après avoir lavé les cellules avec un millilitre de solution de trypsine-EDTA, ajoutez un millilitre de la même solution et incubez pendant cinq minutes. Détachez les cellules HT 29 du flacon et ajoutez 10 millilitres de milieu pour inhiber l'activité de la trypsine.Transférez cinq millilitres du mélange cellulaire dans un tube. Utilisez une pipette pour transférer quelques gouttes du mélange cellulaire dans une chambre de comptage. La chambre de comptage comprend deux parties constituées de carrés de cinq par cinq.Compter les cellules dans cinq carrés représentatifs de chaque partie à l’aide d’un microscope. Quatre carrés aux coins et un carré au centre. Calculer la quantité estimée de cellules présentes.Additionnez les cellules dans les cinq carrés représentatifs de chaque partie. Calculez la somme moyenne des deux parties et divisez-la par 20. Ensuite, divisez 0,6 par le quotient obtenu.Le nombre reçu correspond au volume de mélange cellulaire nécessaire par plaque. Ce calcul se rapporte à une plaque contenant 9 000 cellules par puits. À l’aide d’une pipette, mélangez le volume de mélange cellulaire nécessaire par plaque avec 13,2 millilitres de milieu.Ajouter le mélange dans une plaque de 96 puits. Utiliser une pipette à 11 canaux avec un volume de 200 microlitres par puit sur six lignes, au total 66 puits. Un puit par ligne doit rester vide pour le témoin de blanc.Incuber la plaque à 37 degrés Celsius avec 5 % de dioxyde de carbone pendant 24 heures pour permettre aux cellules de s'attacher à la plaque. Pour insérer les composés, ajouter d'abord 200 microlitres de THF anhydre à huit milligrammes du composé pesé. Diluer davantage la solution du composé en ajoutant d'abord 60 microlitres de THF dans neuf fichiers EINOR différents. Pour chaque solution, utiliser une pipette pour transférer 60 microlitres de la solution du composé vers le premier fichier EINOR.Ensuite, resuspendre et transférer 60 microlitres dans le flacon suivant, et ainsi de suite jusqu'à l'obtention de 10 concentrations différentes. Procéder à la dilution de 20 microlitres de chaque concentration dans le THF avec 180 microlitres de milieu. Préparer également une solution témoin contenant uniquement le solvant en ajoutant 20 microlitres de THF à 180 microlitres de milieu.Ensuite, ajoutez 10 microlitres de chaque solution obtenue dans chaque puits, qui contient déjà 200 microlitres de la solution susmentionnée de cellules dans le milieu, afin d'obtenir des concentrations finales du composé allant jusqu'à 200 milligrammes par litre. Chaque ligne contient des cellules traitées avec le composé à 10 concentrations différentes.Un puits témoin contenant des cellules traitées uniquement avec le solvant et un puits sans cellules pour le témoin de blanc. Configurez les lignes de manière à répéter chaque mesure du composé trois fois. Incubez la plaque chargée pendant trois jours à 37 degrés Celsius dans une atmosphère à 5 % de dioxyde de carbone. Préparez la solution de MTT comme décrit dans le protocole écrit en utilisant une pipette à 11 canaux.Ajouter 20 microlitres de solution MTT dans chaque puits, sauf dans les puits témoins sans ajout. Incuber la plaque pendant trois heures supplémentaires après l'incubation. Retirer la solution du milieu de chaque puits et ajouter 200 microlitres d'isopropanol dans chaque puits.Pour dissoudre la formine, agiter la plaque pendant 30 minutes jusqu'à homogénéité. Mesurer l'absorbance à 550 nanomètres pour 200 microlitres de la solution homogène à l'aide d'un lecteur de microplaque ou d'un spectrophotomètre, en répétant chaque mesure sur trois jours différents. Ensuite, calculer le pourcentage de viabilité cellulaire en soustrayant la valeur d'absorbance du témoin blanc de la valeur mesurée, en divisant le résultat par l'absorbance du témoin solvant THF et en multipliant par 100 %. Calculer les valeurs de concentration inhibitrice demi-maximale à l'aide d'un logiciel de représentation graphique.La CI 50 indiquée correspond à la moyenne de toutes les valeurs de CI 50 recueillies au cours d'au moins trois jours différents, et la valeur d'erreur représente l'écart type. Les données obtenues à partir du test MTT sont analysées afin d'évaluer la cytotoxicité du composé. Les mesures doivent être effectuées sur une gamme de concentrations permettant d'obtenir un graphique présentant une répartition régulière des points, avec au moins trois points sur chaque plateau et trois points définissant la pente.Des mesures insuffisantes à des concentrations élevées ou faibles altéreront l'ajustement de régression non linéaire de la courbe nécessaire à la détermination des valeurs d'IC50, réduisant ainsi leur précision. Les valeurs d'IC50 relatives, déterminées par l'ajustement de régression non linéaire, correspondent aux concentrations entraînant une inhibition de croissance cellulaire de 50 % par rapport à l'effet maximal possible du composé testé. Cette valeur est calculée comme le point médian entre la viabilité cellulaire maximale et minimale mesurée, qui ne sont pas nécessairement de 100 % et 0 % respectivement.Lors de l'analyse des résultats des expériences décrites dans le protocole, il apparaît clairement que le cisplatine ainsi que les complexes de titane et de vanadium sont très actifs. On observe également que plus la valeur maximale d'inhibition d'un composé donné est proche de 100 %, plus la valeur relative de la CI50 se rapproche de la valeur absolue, lors de la comparaison des CI50 entre les différents composés.Le complexe au titane quatre présente la cytotoxicité la plus élevée, et ses valeurs d'IC50 sont inférieures à celles du cisplatine et du complexe au vanadium cinq. Toutefois, le ligand libre montre une activité nettement réduite, car après ajout du ligand à différentes concentrations, la viabilité cellulaire ne diminue pas de manière aussi marquée que pour ses complexes.Cela garantit que la forte activité anti-cancéreuse des complexes repose sur les centres métalliques. Lors de l'exécution de cette procédure, il est important de maintenir des conditions stériles en tout temps. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment évaluer la cytotoxicité de vos composés anti-cancéreux par le test M-T-T-S-A.

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Complexes métalliques anticancéreux: Synthèse et évaluation de la cytotoxicité par le dosage au MTT

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