March 1st, 2014
Cet article présente un protocole pour un test de conditionnement peur contextuelle et indicé l'aide d'un système vidéo d'analyse pour évaluer l'apprentissage peur et la mémoire chez la souris.
Le test de conditionnement contextuel et aigu à la peur est un test comportemental qui est largement utilisé pour évaluer la capacité d’apprentissage de Lawrence. N’oubliez pas les associations entre une expérience agressive et les indices environnementaux. Cependant, dans ce test, il existe certaines différences méthodologiques entre les lieux de travail, ce qui peut entraîner la difficulté de comparer les données et de dupliquer les résultats.
Pour obtenir des données plus stables et plus tives, il est important de standardiser autant que possible le protocole de test. Dans ce document, nous démontrons le protocole de l’essai sur le terrain. Le test de fonctionnement de la peur est un test simple, sensible et fiable pour évaluer votre mémoire.
Ce test est souvent utilisé pour comprendre les mécanismes neurologiques et moléculaires et l’apprentissage et la mémoire sous-jacents, ainsi que pour évaluer la fonction cognitive de modèles murins potentiels de troubles psychiatriques tels que le trouble post-stress et la schizophrénie. Dans le test de comportement de face, qui est mesuré comme un indice d’apprentissage et de mémoire est noté par la définition d’observateurs humains, certains systèmes automatisés ont analysé automatiquement le comportement d’utilisation. Nous développons un système d’analyse d’images à l’aide d’un logiciel basé sur l’image FG et l’image A.
Nous distribuons un tel logiciel et il peut être téléchargé gratuitement à cette adresse. Nous y présentons notre protocole de test et le système d’analyse automatisé. Tout d’abord, nous montrons comment sécuriser l’opérateur de l’application en tant qu’image du logiciel.
Deuxièmement, nous montrons les protocoles détaillés du test, y compris le test de contexte de conditionnement et le test Q pour le dispositif utilisant le système. Enfin, nous présentons les résultats qui indiquent que le système FD à image N peut produire des résultats très fiables. Commençons.
Commencez rapidement le test de conditionnement de la peur. Une souris est placée dans une chambre avec un sol nivelé. L’OID se présente sous la forme d’un auditeur.
L’auditeur met en file d’attente pendant 30 secondes. Par la suite, un choc électrique est fourni. L’appariement d’une file d’attente d’auditeur et de l’amortisseur de pied est administré trois fois afin d’améliorer l’association entre la file d’attente d’auditeur et l’électrochoc.
Au cours du test, le comportement de blocage est mesuré comme un indice d’apprentissage associé et de mémoire injuste. Deuxièmement, après 24 heures, la souris est placée dans la même chambre de conditionnement et elle est notée pour le comportement de fuite. Pour mesurer la peur de contrôle contextuel, la souris est ensuite transférée dans un G de forme différente sans aucune file d’attente auditive, puis la file d’attente auditive est présentée.
Dans ce test, le comportement de congélation est utilisé comme indice de la mémoire de la peur aiguë. Pendant le test, le comportement de la souris est enregistré par une caméra connectée à un ordinateur. Le comportement est jugé comme figé ou non figé.
Par le logiciel d’image, le programme peut calculer le pourcentage de temps de congélation et le trafic de distance. Ici, par exemple, l’analyse d’images est démontrée pendant le test. Les images en direct sont capturées à une longueur par seconde.
L’image de la crée une image binaire à partir de chaque image en direct pour chaque paire. Avec des flammes successives, la quantité de surface à travers laquelle la souris se déplace est calculée par l’image du programme. Lorsque la zone est en dessous d’un certain seuil, le comportement est considéré comme un gel, qui est généralement défini comme une absence totale de tout mouvement à l’exception de la respiration et difficile à battre.
Un comportement de gel qui dure moins longtemps que le seuil de temps défini n’est pas considéré comme un gel. La valeur seuil doit être définie à l’avance afin qu’elle permette le meilleur ajustement entre les temps de gel mesurés par l’image Z et les observations humaines. Lorsque la quantité de surface est égale au seuil ou à X trois Z, le comportement est considéré comme non gelé.
Nous démontrons ici notre protocole de test chez la souris à l’aide de ce système d’analyse vidéo. Dans ce protocole, l’opérateur est construit sur une chambre carrée de grille avec des grilles métalliques et découvert avec une image principale transparente. FD peut distinguer un sujet sombre d’un fond blanc dans chaque image vidéo capturée.
Mais ce processus nous permet d’analyser le comportement de congélation du sujet que la chambre doit être placée sur un sol blanc pour analyser le comportement des souris noires, bonnes ou noires directes. Le comportement de congélation des souris en aluminium peut également être analysé par l’image D à l’aide de grilles métalliques noires. La règle de la grille est éclairée sur 100 toits par les lumières LED.
Un haut-parleur connecté au générateur de tonalité de bruit blanc est monté sur une voile au-dessus du couvercle. Un bruit blanc de 55 est présenté comme une file d’attente auditive. Les réseaux sont câblés à un générateur de chocs pour fournir un choc alimentaire électrique.
Le test de vent de choc est fixé à 0,3 million de paires avant que le test ne soit lancé. L’intensité du courant sur la grille doit être vérifiée par un métal car le test de choc peut être diminué par une accumulation de fe et d’urine chez les souris, la chambre d’essai est placée dans un métier à tisser insonorisé pour minimiser le bruit externe. Pendant le test, l’appel est situé dans un son différent de celui où les tests de cône et de contexte sont effectués.
Il est composé d’une chambre qui a des propriétés différentes de la chambre de coning. En fournissant un contexte normal, il est nécessaire de changer les codes sensoriels autant que possible afin que la souris perçoive le contexte Nobel comme sans rapport avec la chambre de conting. Dans ce protocole, l’appareil est une chambre triangulaire acri avec une règle acri plate et le plomb transparent.
Un haut-parleur est monté sur une voile au-dessus du plomb pour présenter sur une ou trois files d’attente. Cette file d’attente est le même signal qui a été fourni aux souris lors du hachage. Le niveau d’éclairage du sol est réglé pour étudier les regards.
Chaque chambre est un cube avec une cabine de charge montée sur la voile, une caméra de l’appareil pour surveiller le comportement de la souris. Avant le début de chaque test, les murs et les sols en acrylique sont essuyés avec une languette donc dans de l’eau à très haute teneur en eau et les grilles sont nettoyées avec de l’éthanol à 70 %. Pour éviter un biais basé sur la coupe olfactive, les grilles sont essuyées avec de l’Ethan au lieu de super hype de l’eau brute pour éviter que les grilles ne déduisent leur conductivité électrique due aux deux à quatre dernières souris, un paquet de maison dans une salle de détention à température contrôlée pour réduire les augmentations possibles du transport en cage sur le comportement et pour adapter les souris à l’environnement expérimental.
La cage contenant les souris a été transférée dans une salle d’attente insonorisée au moins 30 minutes avant le début de chaque test. Toutes les expériences doivent être réalisées au cours de la même période afin de minimiser les variations de comportement qui peuvent être produites par des tests à différents moments. Les souris de chaque groupe doivent être testées dans un contrepoids afin de réduire les effets potentiels du temps expérimental.
Dans l’ordre de test du sujet sur la performance comportementale, l’image D peut contrôler un maximum de quatre appareils testant des souris simultanément pendant que le chercheur pour économiser du temps et numérique à la déduction dans les effets potentiels de la procédure expérimentale sur le comportement de la souris. Avant le début de la session continue, exécutez le logiciel d’application A FD. Sélectionnez le menu de prise FD concernant et FD en ligne et réglez les valeurs de paramètres définies par pas comme suit.
Première étape, l’ID du projet spécifie le dossier dans lequel vous souhaitez stocker la date de vos fichiers. Deuxième étape, tapez le nom de la session. Tous les mots dans la boîte de session sont la date d’expérimentation et le texte de conférence à classer dans lequel l’heure de début et la durée du bruit blanc et du choc alimentaire sont écrites dans la boîte de référence.
Le texte de déférence au fichier doit être préparé dans le dossier de déférence dans l’image, le dossier au préalable. Troisième étape : réglage des paramètres. Entrez les valeurs des paramètres tels que la durée, la durée et les critères de figement, comme indiqué dans la vidéo.
Quatrième étape, identification de l’objet. Entrez l’identification de l’objet. Cinquième étape, les paramètres de l’appareil photo contrastent la luminosité et le contraste de l’image capturée.
Sixième étape, paramètres de seuil. Tout d’abord, pour mesurer la distance parcourue à partir des images consécutives, ajustez la valeur principale du seuil du programme, qui est configurée pour segmenter les images en particules noires et en fond blanc. La distance parcourue est calculée entre chaque ensemble avec des coordonnées XY pour le centre de gravité avec la particule dans les images consécutives.
Deuxièmement, pour le comportement des images consécutives, en supposant simplement x valeur supplémentaire du programme qui est configuré pour segmenter les images en particules noires sous l’arrière-plan, puis calculer la quantité de surface des régions non chevauchantes entre les particules de quelle paire de fenêtre d’admission d’images consécutives la région non chevauchante est affichée. Change express signifie que la valeur sur la quantité de valeur de la région doit être inférieure à la valeur du cri ING lorsque la souris montre un comportement ing. Ces valeurs doivent être ajustées de sorte que les données par fatigue d’image correspondent à l’équipe par l’homme lui-même.
À la septième étape, le champ défini sur l’attrapage a spécifié le champ, la chambre que vous souhaitez capturer après avoir cliqué avec le bouton rectangulaire dans la boîte à outils pour rectangulaire autour du sol de celle-ci. Chambre sur la fenêtre d’image en direct. Ensuite, sélectionnez le roman de chambre et cliquez sur le bouton définir pour enfin cliquer sur le bouton Terminer.
Une fois que les paramètres ont été définis, un test préparatoire doit être effectué à l’aide de souris d’entraînement avant le premier test de la date pour déterminer si le système d’analyse d’image et les générateurs de chocs sonores fonctionnent avec ces problèmes, déplacer la cage en peigne contient les souris d’entraînement à l’obscurité de test sonore de l’obscurité adjacente à l’obscurité d’attente et placer chaque souris dans la chambre de conditionnement immédiatement après avoir placé les souris dans la chambre, cliquez sur le bas de l’image de Z.Les souris sont autorisées à explorer complètement la chambre pendant 120 secondes. Après. Un bruit blanc sous forme de file d’attente auditive est présenté pendant 30 secondes et pendant les deux dernières secondes du son, un choc alimentaire est administré aux souris. Cette procédure est répétée trois fois en séance pour renforcer l’association entre la file d’attente et le choc alimentaire.
Les masques sont laissés dans la chambre pendant 90 secondes après le dernier appariement. Établir davantage l’association entre le contexte de la chambre et l’expérience passive. Après 480 secondes d’élop, la souris est renvoyée dans la cage d’accueil et la cage est renvoyée sur l’étagère de la salle de détention.
Après chaque test, nettoyez soigneusement les chambres et la grille. Cliquez ensuite sur le bouton d’analyse suivant et répétez la session sur les souris de test. Environ 24 heures après le déplacement inquiétant, la cage continue pour les souris vers une salle d’attente insonorisée.
Le métier à tisser au moins 30 minutes avant le début de chaque essai. Image longue de la et définissez les valeurs des paramètres du logiciel de la même manière que dans le conditionnement. Toutefois, définissez la durée sur 300 secondes et sélectionnez 35 texte à archiver pour le test contextuel.
35 Le texte du fichier est vide. Placez la souris dans la chambre de conditionnement et cliquez sur le bas de l’écran. Les souris sont autorisées à explorer complètement la chambre pendant 300 secondes sans aucune présentation de stimulus.
Après 300 secondes, précipitez les souris dans leur cage et nettoyez les chambres. Cliquez ensuite sur le bas de l’analyse suivante et répétez la procédure dans l’image longue de D de la souris de test et définissez les valeurs des paramètres de la même manière que dans le texte de référence continu à déposer pour ce test et définissez la durée jusqu’à 360 secondes. Il s’agit d’un texte de référence à déposer pour ce test.
Placez chaque souris dans la chambre triangulaire et cliquez sur le bouton de démarrage de l’image Z.Les souris doivent toutes explorer la chambre dans les trois premières minutes. Ni bruit blanc ni choc du pied ne sont présentés. Cette chambre a des propriétés différentes qui fournissent un nouveau contexte et sont liées à la chambre continue.
Dans cette chambre, il faut généralement beaucoup bouger et ne pas montrer de comportement. À la fin des trois premières minutes, le bruit blanc qui est présenté à Concho est fourni aux souris pendant trois minutes. Au cours de la présentation de l’auditeur, l’auditeur met les souris en file d’attente ou présente un comportement écrit après 360 secondes d’éruption, ramène les souris dans leur cage d’accueil et remet la cage sur l’étagère de la salle d’attente.
Après le test, nettoyez soigneusement les chambres. Cliquez ensuite sur le bas de l’analyse suivante et répétez la procédure en utilisant les souris de test. Cette vidéo montre que le passage de la congélation analysé par l’image du système semble être plus étroitement lié à la pensée mesurée par un observateur humain.
L’observation a été confirmée par les détails qui ont montré que le pourcentage de location mesuré par l’image physique dans chaque test était fortement corrélé ou score de pensée par l’observateur humain. De plus, ce chiffre démontre que les différences entre les pourcentages de congélation mesurés par les observations humaines et l’image du système dans son image étaient les plus faibles. Ces résultats ont indiqué que le pourcentage de congélation mesuré par l’image du système était similaire à ceux obtenus par l’observation humaine et que la précision de la mesure de la quantité de raison par l’image Z est élevée. D’accord.
Comment l’avez-vous aimé ? Comme vous le voyez dans le test, l’analyse comportementale standard peut être effectuée facilement. Il y a quelques conseils et points importants pour utiliser l’image du système, alors permettez-moi de demander à ika à ce sujet. D’accord.
Tout d’abord, que pensez-vous de la procédure de test de l’image du système ? Je pense que notre procédure de test est très simple et que l’image du système est un outil utile pour mesurer la raison, le comportement avec précision et rapidité. N’importe qui peut facilement utiliser un logiciel avec une formation préalable En conséquence, ce système peut être utilisé pour évaluer sa mémoire en plusieurs mois en peu de temps, ce qui nous fera gagner du temps et plus tard.
Je vois. Alors, y a-t-il quelque chose auquel nous devrions faire attention lorsque nous effectuons le test ? Oui, parce que l’opérateur déclare qu’il est important d’obtenir l’image la plus nette pour mesurer avec précision le comportement, et vous devez donc ajuster la longueur de la caméra et les choses d’écriture en conséquence.
De plus, dans l’étude du programme, vous devez définir soigneusement les valeurs sexuelles et les critères de raison pour juger si le comportement peut ou non être considéré comme une raison. Il est important que le résultat ait été immédiat, le programme comme avec pensé par l’observation humaine Comme le montre le résultat actuel. D’accord. Comme vous pouvez le voir, cet article peut être fourni des informations détaillées concernant la procédure de test et l’utilisation du logiciel.
Nous espérons que cet article pourra être publié. Favorisez votre compréhension du test et contribuez à la standardisation du protocole.
Cet article présente un protocole pour un test de conditionnement de la peur contextuelle et indicée en utilisant un système d'analyse vidéo pour évaluer l'apprentissage et la mémoire de la peur chez les souris. L'étude vise à standardiser les méthodologies pour améliorer la fiabilité des évaluations comportementales dans la recherche en neurosciences.
Standardized behavioral phenotyping is critical for de-risking target validation in neuroscience drug discovery. Automated video analysis systems improve data reliability and reproducibility, reducing variability in fear conditioning assays used to evaluate cognitive phenotypes in psychiatric disorder models. This supports predictive confidence in early discovery by enabling consistent, quantitative assessment of learning and memory mechanisms.
The method integrates into the discovery continuum from target hypothesis testing through lead optimization, where reliable cognitive phenotyping informs target selection and compound prioritization.