Name: Marbre enterrant et Nestlet déchiquetage comme tests de répétitives, comportements compulsifs comme-chez les souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-12-24T13:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Découvrez les tests d'enfouissement de billes et de déchiquetage de coton pour évaluer les comportements compulsifs chez la souris. Ces méthodes permettent d'étudier les troubles obsessionnels-compulsifs et les mécanismes neurobiologiques associés.

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Ce travail a été soutenu par des subventions du ministère des Anciens combattants et des National Institutes of Health.

Tous les protocoles utilisant des animaux ont été réalisés en stricte conformité avec les recommandations du Guide pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire des National Institutes of Health. Les protocoles ont été approuvés par le Comité de soins et d’utilisation institutionnels de l’Université d’État de Wayne (numéro de permis A3310-01).
1. Préparation des cages pour l’enfouissement du marbre et le broyage des nids
<ol>
	<li>Utilisez des cages à rats en polycarbonate standard (26 cm x 48 cm x 20 cm) avec des couvercles filtrants pour l’essai d’enfouissement du marbre. Ajoutez de la litière de souris fraîche et non parfumée dans chaque cage à une profondeur de 5 cm et nivelez la surface de la litière en insérant une autre cage de la même taille sur la surface de la litière. Cela a l’avantage supplémentaire d’imprimer un modèle de lignes parallèles sur la surface de la litière qui peut être utilisé pour le placement du marbre.</li>
	<li>Placez doucement des billes de jouets en verre standard (styles et couleurs assortis, 15 mm de diamètre, 5,2 g de poids) sur la surface de la literie en 5 rangées de 4 billes (voir Figure 1A). Lavez les billes avec un détergent de laboratoire doux, rincez-les abondamment à l’eau distillée-déminéralisée et séchez-les avant chaque utilisation.</li>
	<li>Utilisez des cages à rats en polycarbonate standard (19 cm x 29 cm x 13 cm) avec des couvercles filtrants ajustés pour l’essai de déchiquetage du nid. Ajoutez de la litière de souris fraîche et non parfumée dans chaque cage à une profondeur de 0,5 cm et emballez la litière en insérant une autre cage de la même taille sur la surface de la litière.</li>
	<li>Peser les nids en fibre de coton disponibles dans le commerce (5 cm x 5 cm, 5 mm d’épaisseur, ~2,5 g chacun) sur une balance analytique et placer un nid sur le litière dans chaque cage d’essai (voir figure 3A).</li>
	<li>Réglez des chronomètres ou des minuteries pour chronométrer la durée des sessions (30 min pour chaque test).</li>
</ol>
2. Manipulation des animaux avant l’essai
<ol>
	<li>Domestiquez les souris individuellement ou en groupe dans une pièce avec un cycle lumière/obscurité de 12 heures. Donnez à toutes les souris de la nourriture et de l’eau à volonté. Manipulez les souris avec douceur pendant trois à cinq jours avant le test. Utilisez des souris de l’un ou l’autre sexe pour les deux tests.</li>
	<li>Effectuez des tests comportementaux entre 9h00 et 16h00 et transportez toutes les cages domestiques contenant des souris à la salle d’essai 60 minutes avant le début des tests.</li>
</ol>
3. Test d’enfouissement du marbre
<ol>
	<li>Placez une souris dans un coin de la cage contenant des billes, en prenant soin de placer la souris sur une litière aussi loin que possible des billes, et placez le couvercle du filtre sur la cage. Retenez la nourriture et l’eau pendant le test. Laissez la souris dans la cage sans être dérangée pendant 30 min.</li>
	<li>Retirez la souris et remettez-la dans sa cage d’origine une fois le test terminé, en prenant soin de ne pas déplacer ou déloger les billes lors du retrait du sujet de la cage.</li>
	<li>Les marqueurs de tâches (2-3) ne connaissent pas les conditions de traitement ou le génotype de la souris testée pour compter le nombre de billes enterrées. Marquez une bille comme enterrée si les deux tiers de sa surface sont recouverts de litière. Scores moyens pour le nombre de billes enterrées pour chaque souris.</li>
	<li>Récupérez les 20 billes de la litière. Jetez la literie.</li>
</ol>
4. Test de broyage Nestlet
<ol>
	<li>Placez une souris dans une cage contenant un seul nid pré-pesé et placez le couvercle du filtre sur la cage. Retenez la nourriture et l’eau pendant le test. Laissez la souris tranquille dans la cage avec le nid pendant 30 min.</li>
	<li>Retirez la souris et retournez-la dans sa cage d’origine une fois le test terminé. Retirez le reste intact du matériau du nid de la cage à l’aide d’une pince et laissez sécher O/N.</li>
	<li>Pesez le nid restant non déchiqueté et divisez ce poids par le poids de départ pour calculer le pourcentage de nids déchiquetés. Si vous le souhaitez, notez la forme du nid produit par la souris sujette à l’aide d’une échelle d’évaluation définitive du nid à 5 points17, mais en sachant que cette échelle est généralement destinée à noter la construction du nid, et non le déchiquetage obsessionnel.</li>
	<li>Jetez le reste du matériel de nidification déchiqueté et de la litière.</li>
</ol>

<ol><li>Chamberlain, S. R., Blackwell, A. D., Fineberg, N. A., Robbins, T. W., Sahakian, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuropsychology+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+the+importance+of+failures+in+cognitive+and+behavioural+inhibition+as+candidate+endophenotypic+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">The neuropsychology of obsessive compulsive disorder: the importance of failures in cognitive and behavioural inhibition as candidate endophenotypic markers.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 399-419 (2005).</li>
<li>McGuire, J. F., Lewin, A. B., Horng, B., Murphy, T. K., Storch, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nature%2C+assessment%2C+and+treatment+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Postgrad.+Med%22%5BJournal%5D)">The nature, assessment, and treatment of obsessive-compulsive disorder.</a> Postgrad. Med. 124, 152-165 (2012).</li>
<li>Fineberg, N. A., Brown, A., Reghunandanan, S., Pampaloni, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence-based+pharmacotherapy+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Evidence-based pharmacotherapy of obsessive-compulsive disorder.</a> Int. J. Neuropsychopharmacol. 15, 1173-1191 (2012).</li>
<li>Dove, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medications+for+adolescents+and+young+adults+with+autism+spectrum+disorders%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Medications for adolescents and young adults with autism spectrum disorders: a systematic review.</a> Pediatrics. 130, 717-726 (2012).</li>
<li>Doyle, C. A., McDougle, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacotherapy+to+control+behavioral+symptoms+in+children+with+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin.+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Pharmacotherapy to control behavioral symptoms in children with autism.</a> Expert Opin. Pharmacother. 13, 1615-1629 (2012).</li>
<li>Albelda, N., Joel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+animal+models+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Current animal models of obsessive compulsive disorder: an update.</a> Neuroscience. 211, 83-106 (2012).</li>
<li>Albelda, N., Joel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+obsessive-compulsive+disorder%3A+Exploring+pharmacology+and+neural+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models of obsessive-compulsive disorder: Exploring pharmacology and neural substrates.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 36, 47-63 (2012).</li>
<li>Wang, L., Simpson, H. B., Dulawa, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+validity+of+current+mouse+genetic+models+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Assessing the validity of current mouse genetic models of obsessive-compulsive disorder.</a> Behav. Pharmacol. 20, 119-133 (2009).</li>
<li>Joel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+animal+models+of+obsessive+compulsive+disorder%3A+a+critical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neuropsychopharmacol.+Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Current animal models of obsessive compulsive disorder: a critical review.</a> Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 30, 374-388 (2006).</li>
<li>Witkin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+obsessive-compulsive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Protoc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of obsessive-compulsive disorder.</a> Curr. Protoc. Neurosci. 30, 1-9 (2008).</li>
<li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+and+marble+burying+in+mice%3A+simple+methods+for+in+vivo+identification+of+biological+impacts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Digging and marble burying in mice: simple methods for in vivo identification of biological impacts.</a> Nat. Protoc. 1, 122-124 (2006).</li>
<li>Moy, S. S., Nadler, J. J., Magnuson, T. R., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+autism+spectrum+disorders%3A+the+challenge+for+behavioral+genetics%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Med.+Genet.+C+Semin.+Med.+Genet%22%5BJournal%5D)">Mouse models of autism spectrum disorders: the challenge for behavioral genetics.</a> Am. J. Med. Genet. C Semin. Med. Genet. 142, 40-51 (2006).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+behavioral+assays+relevant+to+the+symptoms+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Mouse behavioral assays relevant to the symptoms of autism.</a> Brain Pathol. 17, 448-459 (2007).</li>
<li>Silverman, J. L., Yang, M., Lord, C., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioural+phenotyping+assays+for+mouse+models+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavioural phenotyping assays for mouse models of autism.</a> Nat. Rev. Neurosci. 11, 490-502 (2010).</li>
<li>Angoa-Perez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+depletion+of+brain+5HT+reveals+a+common+molecular+pathway+mediating+compulsivity+and+impulsivity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Genetic depletion of brain 5HT reveals a common molecular pathway mediating compulsivity and impulsivity.</a> J. Neurochem. 121, 974-984 (2012).</li>
<li>Kane, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+genetically+depleted+of+brain+serotonin+display+social+impairments%2C+communication+deficits+and+repetitive+behaviors%3A+possible+relevance+to+autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mice genetically depleted of brain serotonin display social impairments, communication deficits and repetitive behaviors: possible relevance to autism.</a> PLoS One. 7, (2012).</li>
<li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+nest+building+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Assessing nest building in mice.</a> Nat. Protoc. 1, 1117-1119 (2006).</li>
<li>Thomas, D. M., Angoa Perez,, Francescutti-Verbeem, D. M., Shah, M. M., Kuhn, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+endogenous+serotonin+in+methamphetamine-induced+neurotoxicity+to+dopamine+nerve+endings+of+the+striatum%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">The role of endogenous serotonin in methamphetamine-induced neurotoxicity to dopamine nerve endings of the striatum.</a> J. Neurochem. 115, 595-605 (2010).</li>
<li>Gyertyan, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+marble+burying+response%3A+marbles+serve+to+measure+digging+rather+than+evoke+burying%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Analysis of the marble burying response: marbles serve to measure digging rather than evoke burying.</a> Behav. Pharmacol. 6, 24-31 (1995).</li>
<li>Thomas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marble+burying+reflects+a+repetitive+and+perseverative+behavior+more+than+novelty-induced+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety.</a> Psychopharmacology. 204, 361-373 (2009).</li>
<li>Hayashi, E., Kuratani, K., Kinoshita, M., Hara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologically+distinctive+behaviors+other+than+burying+marbles+during+the+marble+burying+test+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Pharmacologically distinctive behaviors other than burying marbles during the marble burying test in mice.</a> Pharmacology. 86, 293-296 (2010).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Les tests d’enfouissement de marbre et de déchiquetage de nids sont de bons exemples de méthodes comportementales pour étudier les comportements répétitifs et compulsifs chez la souris. Les deux tests montrent une excellente validité faciale, conceptuelle et prédictive pour les troubles humains qu’ils modélisent6-11. Ces comportements répétitifs sont naturels et spontanés chez les rongeurs et leur fréquence et leur intensité peuvent varier après des modifications génétiques, comme montré ci-dessous, ou après u...

Les modèles murins de comportements humains, et en particulier de troubles psychiatriques, constituent des approches expérimentales importantes et essentielles pour l’étude des mécanismes de la maladie et pour le développement de nouvelles thérapies. De nombreuses maladies psychiatriques restent extrêmement difficiles à modéliser chez l’animal (par exemple, la schizophrénie). Cependant, les animaux présentent un grand nombre de comportements naturels et distinctifs qui peuvent facilement être liés à des comportements similaires chez les humains. Le mouvement ou l’activité locomotrice est un exemple de comportement chez les animaux qui a une contrepartie chez l’homme. Les rongeurs adoptent souvent une variété de comportements répétitifs, par exemple le toilettage ou le creusement. Le trouble obsessionnel-compulsif (TOC) est une condition psychiatrique qui implique l’apparition de comportements récurrents et indésirables chez l’homme. Les comportements très caractéristiques du TOC comprennent la vérification, le comptage et le lavage ou le toilettage excessifs. Le TOC est un trouble psychiatrique très répandu (qui touche 1 à 3 % de la population) et débilitant1. Un grand nombre d’approches pharmacologiques et comportementales ont été utilisées pour traiter le TOC. Beaucoup d’entre eux ne fournissent pas de soulagement à long terme et la rechute est fréquente à la fin d’un régime de traitement2,3. Une autre condition psychiatrique qui implique l’expression de comportements répétitifs est le trouble du spectre autistique (TSA). Les TSA se caractérisent par des déficits de communication et d’interaction sociale et des comportements répétitifs et stéréotypés, notamment la rotation, le balancement, le battement des doigts et des mouvements corporels complexes. Les Centers for Disease Control and Prevention ont estimé qu’environ 1 enfant sur 88 est diagnostiqué avec des TSA. Les options de traitement de ce trouble sont extrêmement limitées en nombre et en efficacité4,5. L’intensité et la fréquence d’apparition de comportements répétitifs dans les TOC et les TSA peuvent devenir suffisamment importantes pour remplacer la plupart des autres comportements normaux et des interactions sociales chez les patients atteints de ces conditions. À la lumière de la prévalence et de la nature débilitante des troubles psychiatriques caractérisés par des comportements répétitifs, et compte tenu de la mauvaise compréhension de leurs causes et des options de traitement limitées, l’utilisation de modèles animaux pour étudier ces comportements devient encore plus urgente.
Un grand nombre de modèles animaux de comportements répétitifs tels que vus dans les TOC et les TSA ont été développés au cours des 30 dernières années et de nombreuses excellentes revues décrivant ces modèles ont été publiées6-14. En général, ces modèles établis peuvent être classés comme génétiques, pharmacologiques, neurodéveloppementaux et comportementaux et la plupart montrent une bonne valeur apparente, conceptuelle et prédictive6,7. Nous avons utilisé deux modèles comportementaux - l’enfouissement de marbre et le déchiquetage de nids - pour évaluer les comportements répétitifs chez des souris génétiquement appauvries en sérotonine15,16. Ces méthodes présentent de nombreux avantages, dont la facilité d’utilisation, la précision avec laquelle les comportements peuvent être notés, l’exposition spontanée de ces comportements chez les rongeurs et leur utilisation dans le criblage à haut débit de souris génétiquement modifiées pour des phénotypes comportementaux anormaux. De plus, chaque test est effectué dans des cages d'habitation pour rongeurs standard et familières contenant la même litière que celle utilisée dans les cages domestiques des sujets, minimisant ainsi la nécessité d'habituer les souris à de nouvelles chambres d'essai. Il n’est pas nécessaire de restreindre la nourriture et/ou l’eau pour « motiver » les souris à performer. Le test d’enfouissement du marbre tire parti de la propension des souris à creuser dans des milieux naturels (p. ex. terriers, tunnels d’évacuation) et dans la litière standard des cages, et le test de déchiquetage du nid tire parti du fait que les souris sont des animaux nicheurs par nature qui construisent des nids pour se protéger et protéger leur progéniture contre les conditions environnementales (p. ex.son, lumière, température). À l’aide de matériaux de logement pour rongeurs non spécialisés et couramment disponibles, les tâches d’enfouissement du marbre et de déchiquetage des nids sont des tests comportementaux simples et puissants de comportements répétitifs et compulsifs chez la souris.

<table><tbody><tr><td>Jouets en verre billes magasin de</td><td>jouets local</td><td>N/A</td><td>styles assortis, couleurs, clairs et opaques</td></tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr><tr><td>N10 série Cage à souris</td><td>Ancare</td><td>N10HT</td> cage <td>à rongeurs standard avec fil de fer</td></tr><tr><td>Cage à rats série R20 Ancare</td><td></td><td>R20</td><td>cage à rongeurs standard avec dessus en fil de fer</td></tr><tr><td>Bed-o’Cobs</td><td>The Andersons</td><td>8B</td><td>Litière standard pour rongeurs, 1/8 po</td></tr></tbody></table>

marbre enterrant et nestlet déchiquetage comme tests de répétitives, comportements compulsifs comme-chez les souris

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Le trouble obsessionnel-compulsif (TOC) et les troubles du spectre autistique (TSA) sont des affections psychiatriques graves et débilitantes qui constituent chacune un problème de santé publique important, en particulier chez les enfants. Ces deux conditions sont mises en évidence par l’expression répétée de comportements dénués de sens. Les personnes atteintes de TOC montrent souvent des vérifications, des lavages fréquents des mains et des comptages. Les enfants atteints de TSA se livrent également à des tapotements répétitifs, à des battements de bras ou de mains et à des balancements. Ces comportements peuvent varier considérablement en intensité et en fréquence d’expression. Des formes plus intenses de comportements répétitifs peuvent même entraîner des blessures (par exemple, un toilettage excessif, le lavage des mains et l’autostimulation). Ces comportements sont donc très perturbateurs et rendent difficile le discours social normal. Les options de traitement des comportements répétitifs dans les TOC et les TSA sont quelque peu limitées et il y a un grand intérêt à développer des thérapies plus efficaces pour chaque condition. De nombreux modèles animaux pour évaluer les comportements compulsifs ont été développés au cours des trois dernières décennies. Les modèles d’animaux les plus valides et les plus faciles à utiliser sont peut-être le test d’enfouissement du marbre et le test de déchiquetage des nids. Les deux tests tirent parti du fait que les comportements cibles se produisent spontanément chez la souris. Dans le test d’enfouissement du marbre, 20 billes sont disposées sur la surface d’une litière propre. Le nombre de billes enterrées au cours d’une séance de 30 minutes est noté par des enquêteurs aveugles au traitement ou à l’état des sujets. Dans l’essai de déchiquetage du nidentel, un nquelet composé de fibre de coton pulpée est prépesé et placé sur la litière de la cage et la quantité de nids restant intacte après une séance d’essai de 30 minutes est déterminée. À l’heure actuelle, nous décrivons les protocoles et montrons la documentation cinématographique de l’enfouissement du marbre et du déchiquetage des nids. Les deux tests sont facilement et précisément notés et chacun est sensible aux petits changements dans l’expression de comportements compulsifs qui résultent de manipulations génétiques, de maladies ou de traumatismes crâniens.

Un avantage principal des tests de dissimulation de billes et de déchiquetage de nid en coton est qu’ils reposent chacun sur des comportements naturels et spontanés des souris, quantifiables après la fin du test, ce qui permet à un seul chercheur de mettre en place une expérience puis de rester à l’extérieur de la salle de test jusqu’à la fin des séances. Une étape cruciale du test de dissimulation de billes consiste à retirer soigneusement l’animal de la cage après le test. En effet, les souris tentent généralement d’év...

La maladie, les traumatismes crâniens, les modifications génétiques et le traitement des souris avec des médicaments peuvent avoir des effets profonds sur le comportement. En utilisant des approches bien caractérisées et validées telles que l’enfouissement du marbre et le déchiquetage des nids, les comportements compulsifs peuvent être documentés avec précision chez la souris en tant que modèles de trouble obsessionnel-compulsif humain et de trouble du spectre autistique.

Marbre enterrant et Nestlet déchiquetage comme tests de répétitives, comportements compulsifs comme-chez les souris

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

L'objectif général de cette procédure est de montrer la simplicité du test d'enfouissement de billes et de la déchiquetage de nid en tant que paradigmes fiables pour évaluer et démontrer des comportements répétitifs et compulsifs. Chez les rongeurs, pour le test d'enfouissement de billes, une cage est préparée avec 20 billes espacées régulièrement sur la surface de la litière. La souris est ensuite introduite dans la cage et laissée sans perturbation avec les billes pendant 30 minutes.Après ce délai, la souris est retirée et les billes enfouies sont comptées pour le test du Nestle. Un Nestle intact est placé dans la cage avant l'introduction de la souris. Après 30 minutes, la souris est retirée et le Nestle est laissé à sécher toute la nuit avant de calculer le pourcentage de Nestle déchiqueté.En fin de compte, des différences dans les comportements de manipulation de billes, d'enfouissement et de déchiquetage de nid peuvent être observées entre les souris de type sauvage et les souris invalidées. Les procédures seront démontrées par Denise Briggs, étudiante diplômante, Mariana Ango Perez, postdoctorante, et Dean of Francescutti, attaché de recherche de mon laboratoire. Tous les animaux sont maintenus selon un cycle lumière/obscurité de 12 heures avec un accès libre à la nourriture et à l'eau.Pour de meilleurs résultats, manipuler chaque souris délicatement une fois par jour pendant trois à cinq jours avant le test. Lorsque les animaux sont prêts à être testés, transporter les cages dans la salle d'essai 60 minutes avant de commencer le premier test.Pour le test du roulement de billes, utilisez des cages standard pour rats en polycarbonate équipées de couvercles filtrants. Ajoutez un matériau de litière pour souris frais et sans parfum dans chaque cage sur une profondeur de cinq centimètres, puis lissez la surface de la litière en insérant une autre cage de même taille. Cette méthode présente l'avantage supplémentaire d'imprimer un modèle de lignes parallèles sur la surface de la litière. Lavez.Les billes en verre standard sont rincées abondamment avec un détergent doux de laboratoire, puis rincées à l'eau distillée ionisée et séchées avant chaque utilisation. Une fois prêtes, appuyez délicatement sur les billes pour les enfoncer dans la surface de la litière. Préparez des chronomètres ou des minuteurs pour le chronométrage des séances, organisés en cinq rangées de quatre billes chacune.Pour commencer le test, orientez la souris vers l'angle de la cage le plus éloigné possible des billes. Placez le couvercle filtre sur la cage et laissez la souris en contact avec les billes sans la déranger pendant 30 minutes. À la fin de la période de test, retirez la souris et remettez-la dans sa cage d'origine.Prenez des précautions extrêmes pour ne pas déplacer ni déloger les billes lors du retrait de l'animal de la cage. Deux à trois chercheurs, aveugles aux conditions de traitement, doivent ensuite évaluer le nombre de billes enterrées. Une bille est considérée comme enterrée.Si les deux tiers de sa surface sont couverts de litière, faites la moyenne des scores du nombre de billes enterrées pour chaque souris. Enfin, récupérez les 20 billes et jetez la litière. Utilisez des cages standard pour souris en polycarbonate équipées de couvercles filtrants ajustés.Pour le test de déchiquetage Nestle, ajouter du matériel frais de litière pour souris non parfumé dans chaque cage sur une épaisseur de 0,5 centimètre et tasser la litière comme indiqué précédemment. Ensuite, peser des boules de fibres de coton disponibles dans le commerce et en placer une sur la litière. Dans chaque cage de test, préparer des chronomètres ou minuteurs pour mesurer la durée de la session.Lorsque prêt, placez une souris dans un coin de la cage, face au mur. Placez le couvercle filtre sur la cage et laissez la souris tranquille avec le Nestle pendant 30 minutes. Au terme de cette période, retirez la souris et remettez-la dans sa cage d'origine.Retirer du cage le matériel de nid restant intact et le laisser sécher toute la nuit. Le jour suivant, peser le nid non déchiqueté et diviser ce poids par le poids initial afin de calculer le pourcentage de déchiquetage du matériel de nid.Enfin, jetez les restes de matériel de nid et de litière hachés. Ci-dessous, des cages représentatives sont montrées avant et après le test d'enfouissement de billes. Peu de billes ont été enterrées ou déplacées par rapport à leur position initiale lors du test sur des souris de type sauvage.Cependant, la souris double knock-out pour TPH a enterré 17 des 20 billes. Les billes restantes non enterrées sont indiquées par des flèches. Cette vue latérale montre les modifications de la surface de la litière.Après le test, comparer la surface relativement intacte des cages de souris sauvages avec la surface irrégulière, présentant de grands creux et pics, des animaux invalidés. Les performances typiques au test d’enfouissement de billes sont résumées ici. Les souris invalidées pour la TPH2 enterrent significativement plus de billes par rapport aux souris de type sauvage.Ces photographies montrent des nids représentatifs après effilochage. Ici, les nids provenant de souris de type sauvage présentent une faible quantité d'effilochage par rapport aux nids des cages de souris knock-out TPH deux. Ce graphique illustre le comportement typique des souris de type sauvage et des souris knock-out TPH deux dans le test d'effilochage de nids.Les souris TPH double knock-out déchiquettent significativement plus de matériau Nestle que les souris de type sauvage. Une fois maîtrisées, ces techniques peuvent être réalisées en deux heures si elles sont effectuées correctement. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de rester cohérent quant aux critères définissant l’enfouissement d’une bille, et de retirer les morceaux déchiquetés de Nestle du reste sec et non déchiqueté.Après cette procédure, les souris peuvent être injectées avec des médicaments utilisés pour traiter les troubles obsessionnels compulsifs chez l'humain, tels que les ISRS, afin de déterminer si ces médicaments réduisent les comportements de type compulsif chez la souris.

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Terriers, de nidification et la thésaurisation des espèces typiques des activités que les souris effectuer facilement en laboratoire. Cet article décrit comment ils peuvent être facilement évalués à un prix avantageux. Ces protocoles sont extrêmement sensibles à la souche de souris, des lésions cérébrales et les maladies. En outre, ils constituent «l'enrichissement de l'environnement» pour les souris, et incarner le "raffinement" aspect du «3 R» 18.

Évaluation des terriers, la construction du nid, et la thésaurisation chez les souris

Inchworming est un mouvement de creusement synchrone très répétitif affichée par BTBR T + RTI 3TF / J (BTBR) souris lorsqu'il est placé dans une cage de test avec une literie de sciure suffisante. La procédure est une modification du protocole d'interaction sociale des mineurs et est utilisée ici pour évaluer stéréotypies motrices répétitives pertinentes pour troubles du spectre autistique.

Inchworming: A Novel moteur Stéréotypie dans le BTBR<em&gt; T<sup&gt; +</sup&gt; Itpr3<sup&gt; Tf</sup</em&gt; / J modèle de souris de l&#39;autisme

Les comportements restreints et répétitifs (RRB) d’ordre supérieur perturbent la vie des personnes touchées.  Ces comportements sont difficiles à modéliser chez les rongeurs, ce qui rend difficile la recherche biomédicale fondamentale sur les traitements ou les interventions potentiels pour les ORR.  Ici, nous décrivons l’exploration de nouveaux objets en tant qu’essai potentiel pour les RRB d’ordre supérieur chez la souris.

Novel Exploration de l&#39;objet comme un test potentiel pour ordre supérieur Comportements répétitifs chez la souris

On décrit ici une approche de dépistage comportementale qui peut être utilisée pour cribler des composés qui présentent une efficacité in vivo sur les comportements moteurs cognitifs et fonctionnels dans les modèles de souris transgéniques de la β-amyloïdose et de la tauopathie. Ces méthodes sont optimisées pour filtrer les composés pour l'activité dans des tâches de mémoire à court terme et de travail.

Évaluation de l&#39;alternance spontanée, reconnaissance récente d&#39;objets et assemblage des membres dans les modèles de souris transgéniques de la neuropathologie amyloïde-β et tau

Ce protocole mesure spatiale d’apprentissage et de mémoire à l’aide du labyrinthe de Barnes. Un nouveau paradigme de demoiselle en détresse sert à évaluer l’activité locomotrice et comportement prosocial chez la souris.

Analysant l’apprentissage Spatial et comportement Prosocial chez la souris à l’aide de la Maze de Barnes et paradigmes de la demoiselle en détresse

Une batterie de tests comportementaux complète des habiletés motrices, humeur — y compris l’interaction sociale, la dépression et l’anxiété — et cognition est conçue pour l’évaluation répétée des changements comportements liés à neurodégénération chez la souris.

Une batterie de tests comportementaux pour l’évaluation répétée de la motricité, l’humeur et Cognition chez les souris

Ici, nous présentons un protocole pour quantifier le comportement de construction de nidification chez les souris, qui est connu pour être altéré dans plusieurs désordres et maladies neurologiques. Ce protocole examine l'utilité de quatre matériaux et offre la possibilité de quantifier l'accord d'évaluateur dans la notation, améliorant la validité et la fiabilité de l'analyse.

Comportement de construction de nid comme indicateur tôt des déficits comportementaux chez les souris

Ce manuscrit présente un ensemble de tests comportementaux hautement reproductibles pour valider un modèle murin du syndrome d’Angelman.

Caractérisation comportementale d’un modèle murin du syndrome d’Angelman

Les modèles de rongeurs sont des outils précieux pour étudier les comportements de base liés aux troubles du spectre autistique (TSA). Dans cet article, nous nous penchons sur deux tests comportementaux permettant de modéliser les principales caractéristiques des TSA chez la souris : l’auto-toilettage, qui évalue le comportement répétitif, et le test d’interaction sociale à trois chambres, qui documente les déficiences sociales.

Stratégies d’évaluation des comportements de type autistique chez la souris

Un modèle de frénésie alimentaire a été établi chez la souris en utilisant un accès intermittent à des M&amp;M’s (un aliment très appétissant composé de graisse et de sucre). Les souris ayant un accès intermittent à cet aliment riche en graisses et en sucre ont montré des comportements similaires au stress, un apport calorique accru et une préférence pour cet aliment par rapport à la nourriture standard par rapport aux souris ayant un accès continu ou inexistant à la nourriture.

Modèle de consommation excessive intermittente chez la souris

Ici, nous présentons un protocole pour induire l’hypoxie chez les souris néonatales en les délivrant dans des environnements contrôlés avec des concentrations d’oxygène variables. Des modèles murins soumis à des variations d’oxygène à la naissance ont durablement fait varier l’expression des miARN impliqués dans l’induction de changements phénotypiques comportementaux tels que l’autisme.

L’hypoxie modifie les niveaux de miARN impliqués dans l’hérédité non mendélienne du trouble du spectre autistique chez la souris

Découvrez les tests d'enfouissement de billes et de déchiquetage de coton pour évaluer les comportements compulsifs chez la souris. Ces méthodes permettent d'étudier les troubles obsessionnels-compulsifs et les mécanismes neurobiologiques associés.

Marbre enterrant et Nestlet déchiquetage comme tests de répétitives, comportements compulsifs comme-chez les souris

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