29 juin 2014
Nous décrivons un procédé par étapes pour la création d'une surcharge de pression et de l'hypertrophie ventriculaire gauche chez des rats Wistar par constriction de l'aorte ascendante en utilisant une petite pince métallique. Ce modèle est largement utilisé pour étudier les changements de remodelage pendant l'hypertrophie cardiaque et pour identifier et évaluer les stratégies pour la régression de ces changements.
Bonjour, je suis Aji Kumar Gs de la division de biologie des maladies cardiovasculaires Raj Gandhi, centre de biotechnologie de l’Inde. Je travaille sous la direction du processus karta et dans cette vidéo, nous allons démontrer une procédure étape par étape pour la construction ascendante I OTE chez les rats. Dans notre laboratoire, nous utilisons ce modèle annuel pour étudier la physiopathologie et les mécanismes moléculaires sous-jacents de l’hypertrophie cardiaque et de l’insuffisance cardiaque progressive.
Nous utilisons également ce modèle pour étudier l’hypertension pulmonaire associée à l’insuffisance cardiaque gauche. Alors commençons, et esthétisons l’animal et maintenons-le en position couchée. Effectuez une intubation endotrachéale en faisant une incision à mi-chemin entre deux anneaux trachéaux et en insérant la canule trachéale, qui est à son tour reliée à un ventilateur pour rongeurs.
Faites ensuite une incision cutanée d’environ deux centimètres de long dans la région gauche de la poitrine entre la deuxième et la troisième côte et séparez les couches musculaires. Pour visualiser la constriction de l’iota de la partie ascendante de l’iota, il faut l’utiliser à l’aide d’un clip en titane de petite taille avec un applicateur, opposer les côtes, puis suturer les couches musculaires et la peau selon un schéma interrompu. Après l’ablation de la sonde endotrachéale, fermez le muscle de la trachée, les couches et la peau et permettez à l’animal de récupérer.
La procédure a été effectuée après avoir obtenu l’approbation du comité d’éthique animale de l’établissement. Avant l’opération, désinfectez le bloc opératoire avec de l’alcool à 70 % et maintenez le coussin chauffant de manière aseptique. Gardez le ventilateur pour rongeurs et l’unité d’anesthésie prêts pour l’opération.
Stériliser les instruments chirurgicaux par autoclavage. Les principaux outils chirurgicaux pour la constriction otique ascendante sont des gants stériles, des pinces à pouce, des ciseaux, des lames chirurgicales, des pinces en titane de petite taille et des pinces à artère applicatrice avec gaze en cas de saignement, un porte-aiguille en matériau de suture proline, une suture en soie tressée et une aiguille. Maintenez le rat sous un parapluie antibiotique pendant 24 heures et esthétisez-le dans une chambre d’induction avec 3 % de fluor ISO mélangé à cent pour cent d’oxygène.
Retirez la fourrure de l’encolure et de la poitrine gauche du rat et maintenez l’animal en haut. Un coussin chauffant. Maintenez l’anesthésie avec 1,5 % de fluorure ISO pour confirmer la réussite de l’anesthésie.
Désinfectez la zone chirurgicale avec une solution de povidone iodée suivie d’alcool à 70 %. Répétez la procédure trois fois. Placez un champ stérile sur l’animal en exposant uniquement le site chirurgical.
Faites une incision cutanée parallèle à la trachée et séparez le tissu sous-jacent. Afin d’exposer la trachée. Appliquez un lien de fil de soie sous la trachée et soulevez-le doucement vers le haut.
Faites une incision à mi-chemin entre deux anneaux cartilagineux et insérez la canule trachéale. Connectez la canule trachéale à un ventilateur pour rongeurs. Le ventilateur doit être réglé à une fréquence respiratoire de 50 respirations par minute.
Volume courant 1,7 ml et temps d’inspiration 0,6 seconde. Faites une incision dans la région gauche de la poitrine entre la deuxième et la troisième côte. Les muscles intercostaux doivent être séparés couche par couche.
Des précautions doivent être prises pour éviter toute blessure aux poumons lors de l’incision entre les côtes. Après avoir rétracté les côtes, localisez soigneusement la partie ascendante du iota en manipulant doucement le tissu adipeux. La flèche indique la partie ascendante de l’iota.
Placez un clip en titane de petite taille autour de l’iota ascendant à l’aide d’un applicateur, resserrant ainsi l’iota de 50 à 60 % du diamètre d’origine. Après une constriction otique, repositionnez le cœur et rapprochez les côtes avec une suture proline Simultanément Mettez le ventilateur en pause pendant environ deux à quatre secondes afin de regonfler les poumons. Placez les muscles en couches de proline, puis la peau avec des sutures en soie dans un motif de suture interrompu.
Réduisez progressivement la fréquence respiratoire réglée au niveau du ventilateur et observez la respiration spontanée de l’animal. Retirez la canule trachéale une fois que la respiration spontanée et régulière a été rétablie. Maintenant, l’anesthésie est maintenue par le cône nasal.
Fermez l’ouverture entre les anneaux trachéaux avec des sutures prolines. Fermez les couches musculaires et la peau avec des sutures de proline et de soie respectivement. Appliquez une solution de povidone iodée sur la zone chirurgicale comme analgésie postopératoire injectée.
La solution saline intrapéritonéale de Tremadol peut être administrée par voie intrapéritonéale. Si des signes de déshydratation apparaissent, abaissez progressivement l’anesthésie en position d’arrêt après que l’animal se rétablit, déplacez-le dans la cage et administrez de l’amoxicilline par voie orale mélangée à de l’eau de boisson pendant sept jours. L’intensité de la surcharge de pression produite par la constriction d’un iota ascendant peut être déterminée en observant le gradient de pression à travers le site de constriction ionique par échocardiographie bidimensionnelle.
Le panneau de gauche de la figure montre l’écho Doppler d’un rat aortique rétréci ayant un gradient de pression de 63 mm de mercure. Et le panneau de droite représente un rat contrôlé fictivement sans gradient de pression significatif à travers l’iota. Le panneau du haut montre l’échocardiographie en mode M du ventricule gauche chez le rat, huit semaines après l’opération, et le panneau du bas représente un contrôle fictif, l’épaisseur du septum interventriculaire et l’épaisseur de la paroi postérieure du ventricule gauche ont été significativement augmentées tandis que le diamètre interne du ventricule gauche a été significativement réduit chez les rats ayant subi une constriction otique.
Par rapport aux groupes témoins opérés par placebo, une hypertrophie cardiaque significative est observée chez les rats ayant subi une constriction ionique ascendante après huit semaines de chirurgie par rapport aux groupes témoins opérés par placebo. Bonjour, je m’appelle Raj. Nous expliquons ici la procédure de constriction du iota ascendant chez le rat.
Le principal avantage de ce modèle est le développement progressif de l’hypertrophie cardiaque et de l’insuffisance cardiaque. Semblable à la situation clinique dans l’hypertension chronique dans cette mère, les soins doivent être pris dans l’application de Titanic clip pour la constriction de l’iota. La chose la plus importante est que l’application du clip Titanic devrait être suffisante pour produire une constriction iota critique pour le stress gauche de 20 ans et plus, mais pas assez grave pour produire une défaillance électronique aiguë et un œdème pulmonaire et des précautions doivent également être prises pour éviter toute blessure aux poumons lors de l’incision entre les côtes.
Les ventilateurs doivent être postés pendant trois à quatre secondes tout en s’opposant aux côtes afin de regonfler les poumons. Alors merci d’avoir regardé cette vidéo et bonne chance dans vos expériences.
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques
Cet article décrit une procédure progressive pour induire une surcharge de pression et une hypertrophie du ventricule gauche chez des rats Wistar par constriction de l'aorte ascendante. Ce modèle est largement utilisé pour étudier l'hypertrophie cardiaque et évaluer des stratégies potentielles de régression.
Le rétrécissement de l'aorte ascendante chez le rat fournit un modèle préclinique solide d'hypertrophie cardiaque induite par une surcharge de pression, permettant la réduction des risques mécanistiques et la validation de cibles en découverte de médicaments cardiovasculaires. Ce modèle renforce la confiance prédictive en recherche translationnelle en reproduisant l'apparition progressive de l'hypertrophie et de l'insuffisance cardiaque observée dans l'hypertension chronique. Sa reproductibilité et ses sorties quantitatives en font un outil précieux pour le tri des portefeuilles et les tests précoces d'hypothèses thérapeutiques.
Ce modèle s'intègre à la continuité découverte-préclinique, reliant les premières études mécanistiques à la validation translationnelle des candidats-médicaments cardiovasculaires.