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DOI: 10.3791/51319-v
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La surface piale est une zone de progéniteur unique dans le système nerveux central qui reçoit une attention croissante. Ici, nous détaillons une méthode de manipulation génétique rapide de cette zone souches en utilisant une méthode d'électroporation modifié. Cette procédure peut être utilisée pour les enquêtes cellulaires et moléculaires de lignées cellulaires et les voies de signalisation impliquées dans la différenciation cellulaire et d'élucider le sort et les propriétés des cellules filles.
L’objectif global de cette procédure est de marquer génétiquement et de manipuler les progéniteurs neuraux de la surface du pelage. Pour ce faire, il suffit d’insérer d’abord une pipette en verre remplie d’une solution d’ADN plasmatique dans la région de la surface du pelage. La deuxième étape consiste à injecter l’ADN dans l’espace méningé, recouvrant la surface de la peau.
Ensuite, les électrodes sont orientées de manière à fournir correctement le courant à la surface du pelage. La dernière étape consiste à électroporer l’ADN en progéniteurs de surface de pelage par application de courant. En fin de compte, cette méthode peut être combinée à d’autres techniques pour montrer l’histoire naturelle et les déterminants moléculaires de la surface de la peau, de la prolifération des progéniteurs neuraux, de la migration et/ou de la différenciation.
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