Name: Thérapie à base de cellules pour linsuffisance cardiaque chez le rat: Double thoracotomie pour infarctus du myocarde et épicardique implantation de cellules et Biomatrice (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Apprenez une double thoracotomie mini-invasive chez le rat pour modéliser l'infarctus du myocarde et implanter des cellules avec biomatrice sur l'épicarde. Cette méthode optimise la réparation cardiaque.

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Les auteurs remercient le professeur Hendrik Tevaearai et du département de chirurgie cardiovasculaire de soutien financier pour la première partie de l&#39;étude.

REMARQUE: Lewis rats mâles et femelles, 200-220 g ont été logés dans des conditions standard de laboratoire (lumière de 12 h et le cycle sombre, l&#39;eau ad libitum et alimentaires, IVC cage). Tous les animaux ont été traités en conformité avec les recommandations de la FELASA et la loi suisse sur la protection des animaux. 1 Préparation des cellules: les cellules souches mésenchymateuses isolement de moelle osseuse <ol><li> Anesthésier les rats avec de l&#39;isoflurane à 5% de O 2 et 5 l / min dans une chambre d&#39;induction pendant 5 min. Placer le museau de l&#39;animal dans un cône d&#39;entrée connecté au système d&#39;anesthésie. Effectuer un orteil ou pincement de la queue pour confirmer la sédation. </li><li> Enlevez la peau de la jambe avec des ciseaux en coupant la peau de la cheville à la hanche. Enlever les muscles et couper l&#39;artère fémorale pour la saignée des animaux. Exposer l&#39;articulation de la hanche et disloquer la tête du fémur. Il est important de ne pas endommager la tête du fémur. Placer les os dans du PBS stérile dans un tube en plastique de 50 ml. </li><li> Retirez tous les muscles et les ligaments des os sans les casser. NOTE: Il est important que l&#39;os reste intacte pour éviter liaison de solution de rinçage ou une contamination par de l&#39;éthanol. Rincer les os pelées éthanol à 70% pendant 5 min. </li><li> Sous la hotte à flux laminaire stérile, couper les deux extrémités des os avec des ciseaux. Rincer la moelle osseuse par injection de PBS stérile de l&#39;extrémité de l&#39;os. Recueillir osseuse dans un tube de 15 ml. Centrifugeuse 7 min à 300 x g. </li><li> Eliminer le surnageant. Suspendre le culot dans 3 ml de tampon de lyse Rouge de cellules sanguines. Incuber la suspension pendant 1 min à température ambiante avant de tourner à nouveau pendant 7 minutes à 300 x g. Dans un ballon de 150 ml de culture, ajouter un milieu de culture cellulaire stérile (395 ml de milieu IMDM, 5 ml de pen / strep, 100 ml de FBS) et ensemencer les cellules. </li><li> Changer le milieu de la deuxième journée pour éliminer les cellules non-adhérentes. <ol><li> Effectuer changements de milieu tous les deux jours pendant deux à trois semaines jusqu&#39;à ce que la quantité de cellules désiré soit obtenu. </li><li> Sinon, préparer la biograft par grainesment les cellules sur la matrice solide comme nécessaire et décrit par ailleurs 3. </li></ol></li><li> Le jour de l&#39;implantation cardiaque, préparer les cellules ou récolter le biograft juste avant l&#39;application épicardique. <ol><li> Recueillir les cellules en utilisant Accutase solution de détachement cellulaire. Compter les cellules. Remplir un tube à centrifuger de 1,5 ml avec le volume de la suspension cellulaire pour obtenir une quantité calculée de la cellule souhaitée. Centrifuger pendant 7 min à 300 g et éliminer le surnageant. </li><li> Sinon, récolter le biograft de milieu de culture cellulaire, rincer dans du PBS stérile, et garder dans un milieu de culture frais sans sérum. </li></ol></li></ol> 2 Première thoracotomie et LAD ligature <ol><li> Peser le rat. Mettez le coussin chauffant à 37 ° C. Anesthésier le rat avec 5% d&#39;isoflurane et 5 l / min à 100% de O 2 dans une chambre d&#39;induction de 5 à 7 min. Effectuer un orteil ou pincement de la queue pour confirmer la sédation. Placer le rat sur le coussin chauffant. </li><li> Intuber l&#39;animal avec un 14G iv cathéter. Raccorder le cathéter d&#39;intubation à un ventilateur de rongeur programmé pour 2,5 L / min d&#39;oxygène, 2,5% d&#39;isoflurane, le volume courant de 2 ml, et une fréquence respiratoire de 90 respirations / min. </li><li> Préparer une solution de buprénorphine à 0,1 mg / kg. Injecter en sous-cutané d&#39;un tiers de la solution. Raser la partie gauche du thorax. Désinfecter avec une solution à 1% de Betadine. </li><li> Inciser la peau perpendiculairement au sternum à la quatrième espace intercostal. Séparez les 3 couches de muscle thoracique (grand pectoral, ordre croissant pectoral, et pectoral oblique externe). Ouvrir le quatrième espace intercostal (entre les nervures 4 et 5). </li><li> Utilisez un petit écarteur pour écarter les côtes et à exposer le cœur. Ouvrez le péricarde attentivement. Recherchez et ligaturer descendante antérieure gauche artère coronaire (DAL) avec un 7,0 mm suture 4 ci-dessous l&#39;atrium. </li><li> Fermez l&#39;espace intercostal avec deux points à l&#39;aide de 3,0 points de suture. Placez les deux points de suture proximale et distale du sternum. Tout d&#39;abord, tighten la suture distale. Fixer la tubulure d&#39;échappement du ventilateur pendant 2 s pour gonfler la poitrine et d&#39;éviter toute pneumothorax. Serrer la deuxième suture. Placez les couches de muscles en place (pas de sutures sont nécessaires). Fermez la peau avec une suture 5.0. </li><li> Désinfecter la suture avec une solution de Betadine 1%. Injecter le reste de la solution de buprénorphine. Éteignez le système d&#39;anesthésie. Retirer intubation cathéter. </li><li> Gardez le rat dans la cage sous une lampe chaude pendant 1-2 heures. Conserver un thermomètre dans la cage et de contrôler la distance entre la lampe et la cage chaud afin d&#39;éviter toute surchauffe. Retour le rat dans l&#39;unité IVC. Injecter par voie sous cutanée buprénorphine 0,05-0,1 mg / kg après chaque -operatively 6-12 h pendant 48 heures. </li></ol> 3. épicardique administration de la Via traitement seconde thoracotomie <ol><li> Répétez les étapes 2.1 à 2.3. </li><li> Inciser la peau perpendiculairement au sternum à la cinquième espace intercostal. Séparer la couche 3s de muscle thoracique (grand pectoral, ordre croissant pectoral et grand pectoral oblique externe). Ouvrez le cinquième espace intercostal (entre les nervures 5 et 6). </li><li> Utilisez un petit écarteur pour écarter les côtes et à exposer le cœur. Si il ya une certaine adhésion, les retirer soigneusement avec une pince fine. </li><li> Localisez la zone de l&#39;infarctus qui apparaît comme une zone pâle dessous de la ligature. REMARQUE: Si nécessaire, utiliser un morceau de 10 cm de fil de suture (7.0) inséré au sommet de mieux visualiser le ventricule gauche. Tirez doucement à la suture lâche maintenu par une pince pour exposer le cœur. </li><li> Appliquer l&#39;un des traitements suivants: <ol><li> Positionner la biograft à la surface du cœur. Utiliser la seringue pré-remplie d&#39;agent d&#39;étanchéité de fibrine préchauffée à la température ambiante pendant 10 min. Appliquez une goutte (50-100 pi) de la colle de fibrine sous la biograft aide d&#39;une aiguille 25 G Luer. Vérifiez que le biograft est parfaitement étanche. </li><li> Alternativement, appliquer le culot cellulaire recueilli avec une pipette à la surface of le cœur sur la zone pâle dessous de la ligature. Appliquer une goutte (50 à 100 pi) de la colle de fibrine sur le culot cellulaire. </li></ol></li><li> Retirez le morceau de suture à partir du sommet. </li><li> Répétez les étapes 2,6-2,8. </li></ol>

<ol><li>Gjesdal, O., Bluemke, D. A., Lima, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+remodeling+at+the+population+level--risk+factors%2C+screening%2C+and+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Cardiac remodeling at the population level--risk factors, screening, and outcomes.</a> Nat. Rev. Cardiol. 8, 673-685 (2011).</li>
<li>Alcon, A., Cagavi Bozkulak, E., Qyang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerating+functional+heart+tissue+for+myocardial+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol.+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Regenerating functional heart tissue for myocardial repair.</a> Cell Mol. Life Sci. 69, 2635-2656 (2012).</li>
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<li>Terrovitis, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+Quantification+and+Optimization+of+Acute+Cell+Retention+by+In+Vivo+Positron+Emission+Tomography+After+Intramyocardial+Cardiac-Derived+Stem+Cell+Delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive Quantification and Optimization of Acute Cell Retention by In Vivo Positron Emission Tomography After Intramyocardial Cardiac-Derived Stem Cell Delivery.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 54, 1619-1626 (2009).</li>
<li>Guo, H. D., Wang, H. J., Tan, Y. Z., Wu, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+marrow-derived+cardiac+stem+cells+carried+in+fibrin+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Transplantation of marrow-derived cardiac stem cells carried in fibrin improves cardiac function after myocardial infarction.</a> Tissue Eng. Part A. 17, 45-58 (2011).</li>
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</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

La ligature permanente de LAD provoque une lésion myocardique irréversible. Le premier modèle animal a été décrit en 1960 4. Depuis lors, il a été considéré comme un modèle standard et adapté à MI chronique. Sa stabilité et la reproductibilité autorisés évaluation expérimentale de thérapies pour MI 5. L&#39;amélioration des procédures suivantes la description initiale ont signalé un taux de mortalité opératoire de 35-13% 6. Comme prévu, DAL ligature induite f...

Depuis la fin du 19 e siècle, les maladies cardiovasculaires est resté le numéro un tueur en série dans les pays industrialisés. Parmi ceux-ci, d&#39;une maladie de l&#39;artère coronaire représente l&#39;étiologie principale. Les résultats de la phase aiguë de l&#39;infarctus du myocarde (IM) et est suivi par le remodelage inadapté qui se développe progressivement vers une phase chronique et une insuffisance cardiaque sévère. Malgré les progrès technologiques et thérapeutiques significatifs récents, la morbidité et la mortalité dues à la progression de l&#39;insuffisance cardiaque est encore en croissance 1. Dans ce contexte, la thérapie cellulaire a acquis un intérêt croissant en tant que nouvelle option thérapeutique pour stopper la progression de la maladie vers l&#39;insuffisance cardiaque et à stimuler la capacité de régénération a récemment identifié du myocarde. Des études expérimentales et cliniques ont fourni des preuves convaincantes des effets bénéfiques obtenus après transplantation cardiaque de divers types de cellules. Les principaux résultats figurent l&#39;amélioration de cardila fonction contractile alternatif, une diminution de remodelage ventriculaire gauche, diminution de la taille de l&#39;infarctus, et a augmenté la densité vasculaire dans la zone infarcie. Toutefois, le nombre de cellules à faible rétention après l&#39;injection des cellules est resté un inconvénient important. Association de cellules avec une biomatrice pour améliorer la prestation de la cellule 2 ont récemment favorisé chercheur et intérêts cliniques. La ligature de la descendante antérieure gauche de l&#39;artère coronaire (DAL) est une méthode de référence pour MI en petit modèle animal qui se traduit par infarctus transmural et une cicatrice mature. La thérapie cellulaire appliqué dans la phase chronique de la MI nécessite une deuxième intervention chirurgicale. Une sternotomie médiane est généralement réalisée pour permettre l&#39;injection intramyocardique de l&#39;implantation des cellules ou de biografts épicardique. Ces procédures chirurgicales invasives augmentent le taux de mortalité post-opératoire temps de récupération, la douleur et le risque d&#39;infection. L&#39;approche mini-invasive présentée ici non seulement empêche une telle partialité, mais fournit également des oaccessibilité ptimal du cœur pour l&#39;application du traitement. MI et l&#39;implantation épicardique de cellules associées à une biomatrice de type gel sont effectuées sur un coeur battant par thoracotomie intercostale gauche.

<table><tbody><tr><td>Polysorb 3-0 suture</td><td>Covidien</td><td>UL 204</td><td></td></tr><tr><td>Polysorb 5-0 suture</td><td>Covidien</td><td>UL 202</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II 7-0 Suture</td><td>Covidien</td><td>VP904X</td><td></td></tr><tr><td>Cathéter Insyte 14 G</td><td>BD</td><td>381267</td><td></td></tr><tr><td>Inspira Advanced Volume Controlled Ventilator</td><td>Harvard</td><td>Apparatus 557058</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #7 Forceps</td><td>FST Germany</td><td>11274-20</td><td></td></tr><tr><td>Scellant Fibrin</td><td>Baxter</td><td>1501441</td><td>Colle TISSEEL, Congelé -20 &deg ; C</td></tr><tr><td>Castroviejo Eye Specula</td><td>Harvard Apparatus</td><td>72-8925</td><td>à utiliser comme écarteur pour les côtes</td></tr><tr><td>IMDM GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>31980</td><td></td></tr><tr><td>Pen/Strep</td><td>Gibco</td><td>15140</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>PAA Clone</td><td>&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; A15-101</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à os</td><td>Outils de sciences fines</td><td>16044-10</td><td></td></tr><tr><td>Solution de lyse des globules rouges</td><td>Gentra Systems</td><td>D-50K1</td><td></td></tr><tr><td>Solution de détachement de cellules accutases</td><td>Technologie des cellules souches</td><td>7920</td><td></td></tr></tbody></table>

thérapie à base de cellules pour l&#39;insuffisance cardiaque chez le rat: double thoracotomie pour infarctus du myocarde et épicardique implantation de cellules et biomatrice

Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix

La thérapie cellulaire cardiaque a suscité un intérêt et l&#39;implantation de biomatériaux associés à des cellules de plus en plus est devenu un enjeu majeur pour optimiser la prestation des cellules myocardiques. modèle de rongeur de l&#39;infarctus du myocarde (IM) constitué de gauche artère interventriculaire antérieure (AIA) ligature a généralement été réalisée via une thoracotomie; une deuxième opération à cœur ouvert via une sternotomie est traditionnellement réalisée à une application épicardique du traitement. Depuis la description de modèle de ligature LAD, le taux de mortalité post-opératoire a chuté de 35 à 13%, mais la deuxième chirurgie est restée critique. Afin d&#39;améliorer la récupération post-opératoire et de réduire la douleur et l&#39;infection, les procédures chirurgicales minimalement invasives sont présentés. Deux thoracotomie ont été réalisées, une première pour la ligature LAD et le second pour le traitement administration épicardique. Biografts constitués de cellules associées à des matrices solides ou de type gel ont été appliqués sur l&#39;ar infarciech. CONT ligature a entraîné la perte de la fonction cardiaque telle que confirmée par échocardiographie réalisée au bout de 2 et 6 semaines. Goldner coloration au trichrome effectué sur des sections de coeur confirmé la formation de cicatrices transmurale. Des premier et second chirurgies entraîné moins de 10% de la mortalité post-opératoire.

Tous les animaux ont récupéré dans 1 heure après thoracotomie. La cicatrisation des plaies a été rapide. Aucune infection ou un oedème a été observé. La thoracotomie gauche double a permis un accès optimal à cœur (Figure 1). La douleur et la mortalité post-opératoire était faible. L&#39;animal a récupéré rapidement de la chirurgie et a pris du poids (figure 2). Kaplan Meir pour cent de survie était de 96% pour la première thoracotomie. Quatre rats plus de 10...

L&#39;implantation d&#39;un biograft pour traiter l&#39;infarctus du myocarde induite par la ligature LAD dans un modèle de rongeur est classiquement requise des deux opérations à cœur ouvert. Afin de réduire la mortalité et de fournir des conditions optimales pour la fixation de biomatrices gélatineuses solides et associés à des cellules, des procédures minimalement invasives ont été développées.

Thérapie à base de cellules pour l&#39;insuffisance cardiaque chez le rat: Double thoracotomie pour infarctus du myocarde et épicardique implantation de cellules et Biomatrice

Cardiac cell therapy has gained increasing interest and implantation of biomaterials associated with cells has become a major issue to optimize myocardial ...

L'objectif de cette procédure est d'effectuer une double thoracotomie sur des rats afin de réaliser une ligature coronaire et une application épipéricardique. Cela est accompli en réalisant d'abord une thoracotomie au niveau de l'espace intercostal quatrième. Ensuite, l'artère coronaire descendante antérieure, ou LAD, est ligaturée.Ensuite, une seconde thoracotomie est réalisée deux semaines plus tard au niveau de l'espace intercostal cinq. Enfin, les cellules et la matrice sont appliquées à la surface du cœur infarctus en battement. En définitive, une échocardiographie est effectuée pour évaluer la fonction cardiaque et une histologie est réalisée par mesure de la taille de l'infarctus.L'avantage principal de cette technique par rapport aux méthodes existantes, comme la sternotomie, est qu'il s'agit d'une approche peu invasive. La démonstration de la procédure sera effectuée et ine Lopez enverra des collaborateurs de notre laboratoire. Tous les animaux ont été traités conformément aux recommandations de la F-E-L-A-S-A et à la loi suisse sur la protection des animaux. Après avoir saigné à blanc un rat, isolé et nettoyé les os fémoraux selon le protocole décrit, utilisez des ciseaux pour couper les deux extrémités des os.Ensuite, pour rincer la moelle osseuse, injecter du PBS stérile dans la cavité médullaire de l'os et recueillir la moelle dans un tube de 15 millilitres. Centrifuger la moelle osseuse recueillie pendant sept minutes à 300 ×g. Retirer le surnageant et ajouter trois millilitres de tampon d'hémolyse. Suspendre le culot, incuber la suspension pendant une minute à température ambiante, puis centrifuger à nouveau pendant sept minutes à 300 ×g après resuspension.Suspendre le culot dans un milieu de culture stérile. Ajouter du milieu de culture cellulaire supplémentaire dans un flacon de culture de 150 millilitres et ensemencer les cellules le deuxième jour d'incubation. Changer le milieu pour éliminer les cellules non adhérentes et continuer à renouveler le milieu tous les deux jours pendant deux à trois semaines, jusqu'à l'obtention de la densité cellulaire souhaitée.Pour réaliser la première thoracotomie T, commencez par peser le rat et configurez en conséquence les paramètres du ventilateur. Le débit expiratoire de la ventilation est défini automatiquement. Ensuite, rasez la partie gauche du thorax, allumez un tapis chauffant et réglez-le à 37 degrés Celsius.Après avoir anesthésié le rat conformément au protocole décrit, effectuez une pression sur l’orteil ou la queue avant de placer le rat sur le tapis chauffant en position supine à l’aide d’un cathéter intraveineux de calibre 14, intubez l’animal, puis reliez le cathéter d’intubation à un ventilateur pour rongeur. Ce dernier doit être programmé pour délivrer 2,5 litres par minute d’oxygène, 2,5 % d’isoflurane, un volume courant de deux millilitres et une fréquence respiratoire de 90 cycles par minute. Après avoir préparé une seringue contenant de la buprénorphine à 0,1 milligramme par kilogramme à administrer par voie sous-cutanée, injectez un tiers de la solution, puis désinfectez la zone avec une solution de Bétadine à 1 %.Ensuite, incisez la peau perpendiculairement au sternum au niveau de l'espace intercostal quatre et séparez les trois couches musculaires thoraciques. Puis ouvrez l'espace intercostal quatre entre les côtes quatre et cinq. Utilisez un petit rétracteur pour écarter les côtes et exposer le cœur.Ensuite, ouvrez soigneusement le péricarde et repérez l'artère coronaire antérieure descendante ou LAD, puis utilisez un fil de suture 7,0 pour la ligaturer à quatre millimètres sous l'oreillette. Ensuite, contrôlez le changement de couleur de la zone ischémique à l’aide de trois fils de suture 0 positionnés de manière approximative et distale par rapport au sternum. Effectuez deux points destinés à fermer l’espace intercostal.Serrer le point distal. Pincer le tube d'échappement du ventilateur pendant deux secondes afin de gonfler la poitrine et éviter un pneumothorax. Ensuite, serrer le deuxième point.Replacer les couches musculaires en position. Ensuite, utiliser un fil 5-0 pour fermer la peau avec une solution de Bétadine à 1 %. Désinfecter la suture et injecter la solution de buprénorphine restante.Éteignez le système d'anesthésie et retirez le cathéter d'intubation. Gardez le rat dans une cage sous une lampe chauffante pendant une à deux heures avant de le retourner dans une unité IVC. Deux semaines après la première thoracotomie, la cicatrisation est complète et la cicatrice est à peine visible.Suivant la procédure décrite précédemment dans cette vidéo pour préparer le rat à la chirurgie, incisez la peau perpendiculairement au sternum au niveau de l'espace intercostal cinq. Séparez les trois couches musculaires et ouvrez l'espace intercostal cinq entre les côtes cinq et six. Utilisez un petit rétracteur pour écarter les côtes et exposer le cœur.S'il y a une certaine adhérence, utilisez une pince fine pour la détacher délicatement. Ensuite, repérez la zone d'infarctus qui apparaît comme une zone pâle sous le ligature. Si nécessaire, insérez un morceau de suture de sept zéros de 10 centimètres à l'apex et tirez doucement dessus pour mieux visualiser le ventricule gauche.Ensuite, appliquer les cellules et la matrice à la surface de la zone ischémique du cœur. Après centrifugation, déposer la palette de quatre fois dix puissance six cellules, comme indiqué dans le protocole écrit, sur le cœur avant d'appliquer un adhésif fibrineux pour la recouvrir. La couche de colle fixe les cellules à la surface du cœur.Après avoir retiré le point de suture au niveau de la position apicale, réinsérer les couches musculaires par un point de suture et désinfecter l’animal. Comme illustré précédemment dans la vidéo, tel que montré ici. Après l’intervention chirurgicale, les animaux ont perdu du poids, puis récupéré rapidement avant de reprendre du poids indépendamment du traitement appliqué. Comme le montre ce graphique de Kaplan, le taux de survie est élevé après la première thoracotomie T ; les animaux traités avec du fibrine et/ou des cellules ont présenté des taux de survie plus faibles que les autres groupes, comme observé sur ce graphique.Néanmoins, les taux de survie globaux sont restés élevés après une seconde thoracotomie. La fonction cardiaque a été évaluée par échocardiographie. Ces images représentatives en mode M provenant d'animaux sains et d'animaux infarctus illustrent que la contractilité de la paroi du VG est abolie deux semaines après la ligature de l'artère descendant antérieure. La fraction d'éjection a été enregistrée deux semaines après la ligature de l'AD, sur un total de 104 animaux.La distribution de fréquence montre des méthodes raisonnablement reproductibles avec un coefficient de variation de 17 %. Cette figure illustre la représentation graphique de la fonction cardiaque par la fraction d'éjection mesurée deux et six semaines après la ligature de l'artère LAD. La fonction cardiaque continue de diminuer au cours de cette période. Le remodelage cardiaque se produit également durant cette période et est représenté ici par une augmentation des volumes du VG enregistrés en systole comme en diastole. Enfin, la coloration au trichrome a révélé que du tissu fibrotique, puis finalement une cicatrice transmurale, s'est développée six semaines après la ligature de l'artère LAD. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en 30 à 40 minutes si elle est effectuée correctement.Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment réaliser une double thoracotomie peu invasive.

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Cette vidéo montre comment utiliser un modèle rapide et fiable pour étudier les processus pathobiologiques et physiopathologiques de l'ischémie myocardique.

DAL-Ligature: un modèle murin d&#39;infarctus du myocarde

Méthodes de préparation d'une matrice de gel injectable à partir de tissus décellularisé et l'injecter dans le rat...

La fabrication des matériaux injectables d&#39;origine biologique pour l&#39;ingénierie tissulaire du myocarde

De nombreuses manipulations génétiques et / ou injections intra-myocardique de gènes, de protéines, de cellules et / ou biomatériaux sont superposées la dimension du temps dans des études de l'ischémie aiguë / reperfusion et le remodelage chronique chez la souris. Cette vidéo illustre les procédures de microchirurgie de l'ischémie / reperfusion, la ligature des artères coronaires permanente, et les études d'injection intramyocardique.

Ligature de l&#39;artère coronaire et injection intramyocardique dans un modèle murin d&#39;infarctus

Pour créer des structures hautement organisées de tissus complexes, il faut assembler plusieurs types de matériaux et de cellules en un composite intégré.  Cette conception combinatoire intègre des feuilles de cellules stratifiées spécifiques à un organe avec deux matériaux distincts d’origine biologique contenant une base de matrice fibreuse solide, et des cellules endothéliales pour améliorer la formation de nouveaux vaisseaux.

Ingénierie tissulaire: Construction d&#39;un échafaudage 3D multicellulaire pour la livraison de stratifiés feuilles cellulaires

Fourniture de cellules intra-myocardique dans des modèles murins de maladies cardio-vasculaires telles que l'hypertension ou de l'infarctus du myocarde, est largement utilisé pour évaluer le potentiel thérapeutique de différents types de cellules dans les études de régénération. Par conséquent, une description détaillée et une visualisation claire de cette intervention chirurgicale aideront à définir les limites et les avantages des analyses thérapeutiques de cellules cardiovasculaires chez...

Intramyocardique cellulaire livraison: Observations aux coeurs murins

Nous présentons trois protocoles nouveaux et plus efficaces pour différencier les cellules souches pluripotentes humaines induites dans les cardiomyocytes, les cellules endothéliales et les cellules musculaires lisses et une méthode de distribution qui permet d'améliorer la prise de greffe de cellules transplantées en combinant l'injection de cellules avec la livraison de cytokines pièce à médiation.

Les cellules souches pluripotentes dérivées de cellules cardiaques pour réparation myocardique

Nouvelles stratégies thérapeutiques en médecine régénérative cardiaque nécessitent des études étendues et détaillées dans des modèles animaux précliniques grands avant ils peuvent être considérés pour une utilisation chez l’homme. Ici, nous démontrons une technique d’injection de contraste percutanée guidée par échocardiographie intramyocardique chez le lapin, qui est précieux pour l’efficacité de ces traitements novateurs des tests d’hypothèses.

Injection de contraste percutanée guidée par échocardiographie intramyocardique et livraison de cellule dans un modèle préclinique grand

Nous présentons ici un protocole pour l’induction de cryoinjury ventriculaire gauche, suivie de l’implantation d’un patch du muscle cardiaque, dérivée de cellules iPS humaines cardiomyocytes dans un modèle de cobaye.

Implantation des dérivés hiPSC myocarde patchs après lésion myocardique dans un modèle de cochon d’Inde

Nous avons cherché à établir un modèle porcin de l’insuffisance cardiaque induite par le blocage de l’artère circonflexe gauche et le rythme rapide pour tester l’effet et l’innocuité de l’administration intramyocardique des cellules souches pour les thérapies à base de cellules.

Établissement d’un modèle porcin d’insuffisance cardiaque d’infarctus post-myocardique pour le traitement des cellules souches

Les cellules de tiges sont continuellement étudiées comme traitements potentiels pour des individus avec des dommages myocardiques, cependant, leur viabilité diminuée et la rétention dans les tissus blessés peuvent avoir un impact sur leur efficacité à long terme. Dans ce manuscrit, nous décrivons une méthode alternative pour l’administration de cellules souches dans un modèle murine de lésion de la reperfusion d’ischémie.

Retard de l’accouchement intramyocardique des cellules souches après une blessure à l’Ischémie Reperfusion dans un modèle murine

L’administration de cellules guidée par ultrasons autour du site de l’infarctus du myocarde chez la souris est un moyen sûr, efficace et pratique de transplantation cellulaire.

Implantation de cardiomyocytes induite par ultrasons dérivée de cellules souches pluripotentes chez des souris infarctus du myocarde

Apprenez une double thoracotomie mini-invasive chez le rat pour modéliser l'infarctus du myocarde et implanter des cellules avec biomatrice sur l'épicarde. Cette méthode optimise la réparation cardiaque.

Thérapie à base de cellules pour linsuffisance cardiaque chez le rat: Double thoracotomie pour infarctus du myocarde et épicardique implantation de cellules et Biomatrice (Vidéo) | JoVE Journal

Thérapie à base de cellules pour l'insuffisance cardiaque chez le rat: Double thoracotomie pour infarctus du myocarde et épicardique implantation de cellules et Biomatrice

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