Profilage individuel embryonnaires humaines Cellules souches par RT-PCR quantitative

L’objectif global de cette procédure est de profiler les niveaux d’expression génique de cellules souches embryonnaires humaines individuelles à l’aide de la transcription inverse quantitative en chaîne (R-T-P-C-R). Pour ce faire, on utilise d’abord le tri cellulaire activé par fluorescence pour trier les cellules individuelles dans chaque puits d’une plaque de 96 puits contenant un tampon de lyse cellulaire. La deuxième étape consiste à inverser la transcription de l’ARN pour générer de l’ADNC à partir de lysats de cellules uniques.

Ensuite, l’ADNC est amplifié par la réaction en chaîne par polymérase. La dernière étape consiste à effectuer un R-T-P-C-R quantitatif sur l’ARNC amplifié. En fin de compte, ce test est utile pour étudier l’expression des gènes dans des populations hétérogènes telles que les cellules souches embryonnaires humaines.