Name: Évaluation du comportement du système vestibulaire vieillissement de souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: Découvrez une méthode non invasive pour évaluer l'équilibre chez les souris vieillissantes en utilisant un stimulus rotatoire vestibulaire. Cette technique permet d'étudier les changements liés à l'âge dans le contrôle moteur.

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Les auteurs tiennent à remercier la Fondation commémorative Garnett Passe et Rodney Williams ainsi que l’Animal Behavioural Facility de l’Institut Bosch.

1. Animaux <ol><li> Souris (C57/BL6) de 1 ans, 9 et 13 mois ont été obtenues auprès du Centre des ressources animales (Perth, Australie). Ces souris ont été logés dans des cages standard de la souris dans la facilité Bosch rongeurs à l&#39;Université de Sydney sur un 12/12 h cycle lumière / obscurité avec accès à la nourriture et de l&#39;eau ad libitum. Les procédures décrites ci-dessous ont été approuvés par l&#39;Université du comité d&#39;éthique animale Sydney. </li><li> Apportez cages à souris dans la salle d&#39;examen avant chaque essai pendant 10 min pour permettre souris de s&#39;acclimater à l&#39;environnement de test. </li></ol> 2. Rotarod <ol><li> Mettre en place l&#39;appareil de la tige tournante (figure 1A): <ol><li> Installez les chevilles dans chaque ligne de la tige tournante. Remarque: Dans ce cas rat chevilles (70 mm de diamètre) sont utilisés au lieu des chevilles de souris (32 mm de diamètre) pour décourager les souris de s&#39;accrocher à la cheville et d&#39;effectuer des rotations &quot;passifs&quot; 10. </li><li> Postulerions les plates-formes d&#39;atterrissage magnétiques sur le fil situé en bas de chaque voie de la tige tournante de s&#39;assurer qu&#39;ils ne sont pas inclinent à toucher le sol de la tige tournante et sont placés le plus près possible de la paroi droite magnétique de chaque couloir sans se toucher. Remarque: Lors de souris de test de la tige tournante sont tenus de marcher dans une direction avant de rester sur les chevilles tournantes et d&#39;accélération. Quand une souris n&#39;est plus en mesure de rester sur la cheville, ils tombent et déplacer la plate-forme d&#39;atterrissage qui active ensuite un capteur magnétique. Le temps nécessaire pour passer de la cheville en rotation, la vitesse de rotation de la cheville au moment de la chute et de la distance parcourue est automatiquement calculé pour chaque souris et enregistré sur l&#39;écran à l&#39;avant de la tige tournante. </li><li> Faites glisser deux panneaux de plastique transparent à l&#39;avant de chaque voie de la tige tournante avec les panneaux plus courts à la base et les panneaux plus ci-dessus. </li><li> Entrée, les paramètres d&#39;essai en utilisant le clavier situé à l&#39;avant de la tige tournante. Suivez steps 2.1.4.1 à 2.1.4.6 pour les paramètres de test de la tige tournante d&#39;accélération et les étapes 2.1.4.7 à 2.1.4.12 pour les paramètres de test de la tige tournante à vitesse fixe. <ol><li> Définir la durée maximale de l&#39;essai à 60 sec. </li><li> Définissez le nombre de voies à utiliser (ou le nombre de souris à tester). </li><li> Réglez la vitesse de départ de l&#39;épreuve à 5 tours. </li><li> Réglez la vitesse de pointe de l&#39;épreuve à 44 tours par minute. </li><li> Réglez la vitesse de la rampe de l&#39;épreuve à 60 sec. </li><li> Définir la taille des chevilles choisies et la direction de rotation de chevilles de rat en rotation dans une direction vers l&#39;avant. </li><li> Définir la durée maximale de l&#39;essai à 240 sec. </li><li> Définissez le nombre de voies à utiliser pour 1 que les souris sont testés individuellement. </li><li> Réglez la vitesse de départ de l&#39;épreuve à 15 tours par minute. </li><li> Réglez la vitesse de pointe de l&#39;épreuve à 15 tours par minute. </li><li> Réglez la vitesse de la rampe de l&#39;essai à 0 sec. </li><li> Définir la taille de la cheville choisi et le sens de rotation à une cheville de rat tourne dans un forwadirection e. Remarque: Les paramètres ci-dessus peuvent être modifiés pour répondre aux besoins des différentes expériences. </li></ol></li><li> Placer une caméra en face de la tige tournante pour le test de la tige tournante à vitesse fixe, de sorte que le comportement de la souris pendant les essais peuvent être enregistrées et les vidéos utilisé pour une analyse ultérieure pour déterminer la durée de temps les souris ont été en mesure de rester sur la tige tournante. </li></ol></li><li> Suivez les étapes 2.2.1 à 2.2.4 pour le test de la tige tournante accélération: <ol><li> Placez une souris sur chaque cheville fixe pendant 5 min pour permettre la souris pour s&#39;acclimater à la tige tournante. </li><li> Pousser gentiment les souris pour faire face à l&#39;arrière de la tige tournante et démarrer le test de la tige tournante où tous les sujets sont confrontés dans ce sens (voir la figure 1B). </li><li> Retour toutes les souris dans leurs cages quand ils sont tombés des chevilles tournantes et les laisser reposer pendant 10 minutes avec un accès à la nourriture et de l&#39;eau. </li><li> Répétez les étapes 2.2.1 à 2.2.3 pour compléter un total de 8 essais en veillant à nettoyerles chevilles, les voies et plates-formes d&#39;atterrissage de la tige tournante pour l&#39;urine et les matières fécales, et déplacer les plates-formes d&#39;atterrissage à sa position de départ Situés entre chaque essai. Remarque: Les 3-5 premiers essais sont utilisés comme des essais de formation pour permettre aux souris de se familiariser avec la tâche. Le temps de tomber, la distance parcourue et la fin rpm de la cheville au moment de la chute pour chaque procès ultérieur est enregistrée pour une analyse ultérieure (Figure 2). </li></ol></li><li> Suivez les étapes 2.3.1 à 2.3.8 pour le test de la tige tournante à vitesse fixe: <ol><li> Placez une souris sur une cheville pendant 5 minutes pour lui permettre de s&#39;adapter à la tige tournante. Retour de la souris à sa cage. </li><li> Début de l&#39;enregistrement vidéo sur l&#39;appareil photo et appuyez sur Start sur la tige tournante. Ensuite, placez la souris sur la cheville de rotation assurant qu&#39;il donne sur l&#39;arrière de la tige tournante. </li><li> Arrêtez l&#39;enregistrement vidéo sur l&#39;appareil photo lorsque la souris tombe des chevilles tournantes, et retourner la souris pour ses cages pendant 10 min avec un accès à la nourriture et de l&#39;eau. </li><li> Répétez les étapes 2.3.2 et 2.3.3 jusqu&#39;à un total de 8 essais est acquis en veillant à nettoyer les chevilles, les voies et plates-formes d&#39;atterrissage de la tige tournante pour les matières fécales et l&#39;urine, et déplacer les plates-formes d&#39;atterrissage à sa position de départ entre chaque essai . </li><li> Allumez le rotateur construit sur mesure à 3 Hz pendant 20 secondes pour permettre aux souris de se familiariser avec le son. Arrêtez la coiffe après 20 secondes par arrêt de la perceuse et placez les mains de chaque côté de la roue de roulement pour l&#39;empêcher de continuer à faire tourner le passé initiale de 20 sec. Remarque: le rotateur se compose d&#39;une roue de roulement rongeur fixée à un forage (Figure 3A). Au centre de la roue de roulement est une petite chambre avec un couvercle en treillis où la souris est placé (figure 3B). Le dispositif de rotation fait tourner dans le sens inverse des aiguilles d&#39;une montre autour de l&#39;axe vertical. L&#39;ampleur de la stimulation est conforme aux études antérieures qui montrent stimulations rotatifs allant de 0,2 à 3 Hz sont suffisantes pour Genermangé réponses VOR et magnétoscope 4,11,12. </li><li> Placer la souris à l&#39;intérieur de la chambre au centre du dispositif de rotation et remettre le couvercle. </li><li> Mettez la coiffe à son réglage le plus bas de 3 Hz à 20 sec. Démarrez le rotarod et commencer l&#39;enregistrement vidéo sur l&#39;appareil photo pendant ce temps dans la préparation du prochain procès. Eteignez la perceuse à la fin de la 20 sec et placez les mains de chaque côté de la roue de roulement pour l&#39;empêcher de tourner. Refaites le test de la souris sur la tige tournante immédiatement après par le transfert le plus rapidement possible à la cheville en rotation. </li><li> Arrêtez l&#39;enregistrement vidéo sur l&#39;appareil photo lorsque la souris passe de la cheville et retourner la souris dans sa cage. </li></ol></li><li> Nettoyer les panneaux en plastique transparent avec un détergent / mélange et de l&#39;eau douce de la chevilles cylindriques, les voies et plates-formes d&#39;atterrissage métalliques de la tige tournante avec 70% d&#39;éthanol quand toutes les souris ont été testés. </li></ol> 3. Poutre avec vestibulaire Défi <ol><li> Mettre en place la baAppareil à faisceau lance comme on le voit sur ​​la figure 4A. Remarque: L&#39;appareil à faisceau d&#39;équilibre a été adapté à partir d&#39;un appareil décrit dans Carter et al (2001) 13.. Pour ce test, les souris à pied de l&#39;extrémité inférieure de la poutre, qui est de 52,5 cm au-dessus du sol, à une boîte sombre de but (13 x 22 cm, avec un cm porte 5 x 6), situé à 60 cm au-dessus du sol (figure 4A ). Souris cherchent naturellement à l&#39;obscurité et à la protection de la zone de but en faveur de la poutres apparentes et sont en outre encouragés à traverser le faisceau par la légère pente qui exploite leur mécanisme d&#39;échappement naturel de courir dans une direction vers le haut 14. La poutre elle-même est de 1 m de longueur et a une section transversale circulaire avec un diamètre de 14 mm. Une gamme adaptée de diamètres de faisceau peut être utilisé, qui permet à l&#39;expérimentateur d&#39;ajuster la sensibilité du test ou accueillir des sujets plus importants. A l&#39;extrémité inférieure de la poutre d&#39;une ligne blanche indique la ligne de départ. Une autre ligne a ététirée à 60 cm de la ligne de départ à l&#39;extrémité supérieure de la poutre pour indiquer la ligne d&#39;arrivée (figure 4A). <ol><li> Position deux caméras, l&#39;une de chaque côté de la poutre, à l&#39;extrémité inférieure de la poutre (figure 4B). Note: Ces caméras doivent être orientées pour capturer toute la longueur de la poutre et de sorte que les lignes de départ et d&#39;arrivée indiqués sur le fléau de balance sont clairement visibles. Ces caméras seront utilisées pour enregistrer de la vidéo le comportement de la souris comme ils traversent la poutre d&#39;équilibre, avec des vidéos résultantes étant utilisés pour une analyse ultérieure. </li><li> Tapisser le fond de la boîte de but avec une serviette en papier, pour permettre un nettoyage facile de l&#39;urine et les fèces après l&#39;essai de chaque souris, et placez le dôme du logement de la cage sujets de maison à l&#39;intérieur de la boîte de but. </li><li> Placez la mousse adéquate ou autre matériau de rembourrage sous la poutre posée pour protéger tous les sujets qui relèvent de l&#39;appareil. Les souris qui tombent seront ramassés immédiatement par l&#39;expérienceer et placé à l&#39;intérieur de la boîte de but pour se reposer. </li></ol></li><li> Placer une souris dans la zone de but pendant 2 minutes de sorte qu&#39;il se familiarise avec ce milieu. Couvrir l&#39;ouverture de la boîte de but avec une main gantée pendant 5 secondes si la souris essaie de marcher sur la poutre pendant ce temps pour décourager ce comportement. </li><li> Former la souris en le plaçant sur la poutre juste à l&#39;extérieur de l&#39;ouverture de la boîte de but et de lui permettre de marcher dans la zone de but. Continuer à former la souris en le plaçant sur le faisceau progressivement plus loin de la zone de but jusqu&#39;à ce que la souris est capable de marcher à partir de la ligne de départ de la zone de but sans l&#39;aide et l&#39;hésitation minime. Laissez la souris pour se reposer dans la zone de but pendant 1 min après chaque course. </li><li> Commencer à tester la souris lorsque la formation est terminée. <ol><li> Début de l&#39;enregistrement vidéo des caméras. </li><li> Placer la souris à la ligne de départ de la poutre et patienter pendant qu&#39;elle traverse le faisceau dans la direction de la zone de but. </li><li> Arrêtez l&#39;enregistrement vidéo sur cameras lorsque la souris atteint la case. </li><li> Laissez la souris pour se reposer dans la zone de but pendant 1 min. Retirez tout urine ou les selles qui peuvent avoir été déposé au cours du procès en attendant. </li><li> Répétez les étapes 3.4.1 à 3.4.4 jusqu&#39;à un total de 5 essais ont été réalisés. </li></ol></li><li> Allumez le rotateur construit sur mesure à 3 Hz pendant 20 sec (comme dans le test de la tige tournante à vitesse fixe) pour permettre aux souris de se familiariser avec le son. Arrêtez la coiffe après 20 secondes par arrêt de la perceuse et placez les mains de chaque côté de la roue de roulement pour l&#39;empêcher de tourner. </li><li> Placer la souris à l&#39;intérieur de la chambre au centre du dispositif de rotation et remettre le couvercle. </li><li> Mettez la coiffe à son réglage le plus bas de 3 Hz à 20 sec. Début de l&#39;enregistrement vidéo sur les caméras pendant ce temps, dans la préparation du prochain procès. Eteignez la perceuse à la fin de la 20 sec et placez les mains de chaque côté de la roue de roulement pour l&#39;empêcher de continuer à faire tourner le passé initiale de 20 sec. Transfer la souris pour le début de la poutre d&#39;équilibre aussi rapidement que possible et d&#39;attendre que la souris traverse le faisceau de la zone de but. </li><li> Arrêtez l&#39;enregistrement vidéo des caméras lorsque la souris atteint la case de but et retourner la souris dans sa cage. </li><li> Nettoyez l&#39;appareil à faisceau d&#39;équilibre avec 70% d&#39;éthanol et de changer la serviette de papier dans la boîte de but après chaque souris a été testé. </li></ol>

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</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Étapes critiques dans le protocole Des travaux antérieurs ont montré qu&#39;il est facile de overtrain souris à la fois sur la tige tournante et un appareil à faisceau d&#39;équilibre et en conséquence, l&#39;acquisition des mesures précises peuvent être difficiles 15. Par exemple, le surentraînement sur ​​la tige tournante peut conduire à des souris sautant volontairement large des chevilles au cours des deux périodes d&#39;acclimatation et d&#39;essai, tandis que le surentraînement...

Notre sens de l&#39;équilibre est peut-être l&#39;une des composantes essentielles des encore plus négligés de même des activités automobiles les plus élémentaires comme la marche et le tournage. L&#39;équilibre est influencé par de nombreux facteurs, y compris la force musculaire, la coordination motrice et la fonction vestibulaire, et ce n&#39;est que dans la présence de neuropathies vestibulaires ou lors du vieillissement normal que l&#39;importance d&#39;un système de balance pleinement fonctionnel est appréciée. Troubles du système vestibulaire sont souvent associés à des expériences de vertiges ou d&#39;étourdissements et de déséquilibre résultant en un risque accru de chutes et de blessures ultérieures 1. Ceci est particulièrement important dans les populations âgées où les chutes sont une des principales causes de blessures 2. Tests de la fonction vestibulaire sont généralement basées sur les réflexes vestibulaires, en particulier, la vestibulo-oculaire (VOR) ou le réflexe vestibulo-collique (VCR). Le VOR et magnétoscope sont essentiels pour la stabilisation d&#39;images surla position de la rétine et de la tête lors des mouvements de la tête et du corps respectivement. Généralement, les mesures de VOR nécessitent l&#39;implantation invasive de recherche bobines pour mesurer les mouvements oculaires ou suivi vidéo des mouvements oculaires 3. Ceci est difficile chez la souris en raison du faible nature de l&#39;oeil de la souris et la difficulté de la détection de la pupille pour l&#39;analyse vidéo 3. En variante, le magnétoscope est utilisé pour mesurer la stabilisation de la tête en réponse à des mouvements du corps chez la souris sans la nécessité d&#39;une chirurgie invasive 4. Malgré cela, peu d&#39;études portent spécifiquement sur la façon dont le système vestibulaire effectue dans son ensemble et surtout comment il change au cours du vieillissement. Pour évaluer la performance globale de l&#39;équilibre simplement et de manière non invasive, nous avons modifié deux tests comportementaux utilisés couramment. Les tests de faisceau d&#39;équilibre tige tournante et inclinées évaluer les différents aspects de la performance motrice chez des rongeurs et dans des études précédentes ont été utilisés dans une batterie de test à acquérir une complèteprofil de la capacité du moteur. Cette capacité peut être affecté par la maladie ou de modification génétique, et est également sensible à des processus associés au développement normal et le vieillissement 7.5. Des travaux antérieurs utilisant la tige tournante a montré que la coordination motrice chez des souris diminue après 3 mois de 8 ans. En outre, les rats présentent des déficits de la balance notables avec l&#39;augmentation de l&#39;âge sur le test de la poutre 9. Ce document décrit l&#39;utilisation des tests de rotarod et poutre d&#39;équilibre, en liaison avec un stimulus vestibulaire afin de contester le système vestibulaire et caractériser l&#39;impact sur les performances de l&#39;équilibre chez les souris jeunes et âgées. Bien que les méthodes simples et non invasives décrites ne sont pas conçus comme des mesures autonomes de la fonction vestibulaire périphérique, ils ne fournissent une mesure comportementale simple et utile pour comparer les changements cellulaires et sous-cellulaires à plusieurs étapes du traitement vestibulaire lors du vieillissement normal chez la souris.

<table><tbody><tr><td>Rotarod</td><td>IITC Sciences de la vie Inc.</td><td>#755</td><td>"Chevilles de rat » = 70 mm de diamètre. Ne laissez pas l’éthanol entrer en contact avec le plexiglas.</td></tr><tr><td>iPhone</td><td>Apple</td><td></td><td>Peut utiliser n’importe quel type d’appareil photo. Velcro fixé à la surface arrière pour la fixation au bras articulé 3D.</td></tr><tr><td>Bras articulé 3D</td><td>Fisso/Baitella</td><td>Classic 3300-28</td><td>Tout type de support vertical stable serait adéquat. Le velcro est fixé à l’extrémité apicale du bras pour la fixation de l’iPhone.</td></tr><tr><td>Poutre mobile en bois : bande de bois lisse de 1 m de long avec une section circulaire de 14 mm de diamètre</td><td></td><td></td><td>Une gamme de diamètres et de formes de section transversale peut être utilisée en fonction des paramètres expérimentaux</td></tr><tr><td>Boîte de but en bois (130 x 140 x 220 mm) fabriquée à partir de planches</td><td></td><td></td><td></td>de 11 mm d’épaisseur</tr><tr><td>Support en poutres de 41 x 41 mm : 2 faisceaux verticaux à 525 et 590 mm du sol au début et à la fin du but respectivement ; Poutre horizontale de 803 mm qui longe le sol directement sous la poutre de marche ; deux poutres de 20 mm de long agissent comme des « pieds », reliant les poutres horizontales et verticales à chaque extrémité ; un bloc de 21 x 21 x 36 mm taillé à l’extrémité apicale de la poutre verticale « de départ » ; Une ouverture de 13 x 13 mm découpée au centre de ce bloc, formant un tunnel perpendiculaire au faisceau de marche.</td><td></td><td></td><td>Renforcez tous les joints avec de petits supports en acier.</td></tr><tr><td>Peinture noire (à base d’eau)</td><td>Handycan</td><td>Acrylique Noir mat</td><td>2-3 couches pour toutes les surfaces en bois de l’appareil de poutre d’équilibre</td></tr><tr><td>Finition transparente</td><td>Wattle Estapol</td><td>Polyuréthane mat</td><td>Couche unique pour toutes les poutres. Double couche pour toutes les autres surfaces de l’appareil de poutre d’équilibre</td></tr><tr><td>Mousse, matériel</td><td></td><td></td> d’emballage <td>Pour amortir les chutes de la poutre d’équilibre</td></tr><tr><td>70 % Éthanol, serviettes en papier Nettoyez</td><td></td><td></td> la <td>poutre et la boîte de but entre chaque animal.</td></tr><tr><td>Compresses de gaze/serviettes</td><td></td><td></td><td>en papier Pour tapisser le sol de la boîte de but</td></tr><tr><td>Maison des souris (de la cage de la maison)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

Évaluation du comportement du système vestibulaire vieillissement de souris

Behavioral Assessment of the Aging Mouse Vestibular System

Liée à l&#39;âge déclin de la performance de la balance est associé à la détérioration de la force musculaire, la coordination motrice et la fonction vestibulaire. Bien qu&#39;un certain nombre d&#39;études montrent des changements dans l&#39;équilibre phénotype avec l&#39;âge chez les rongeurs, très peu isoler la contribution à l&#39;équilibre vestibulaire soit en conditions normales ou lors de la sénescence. Nous utilisons deux tests de comportement standard pour caractériser la performance de la balance des souris à des points d&#39;âge définies sur la durée de vie: le test de la tige tournante et le test de la poutre inclinée. Surtout si, un rotateur construit sur mesure est également utilisé pour stimuler le système vestibulaire de la souris (sans induire des signes manifestes de la cinétose). Ces deux tests ont été utilisés pour montrer que les changements dans vestibulaire performance équilibre médiation sont présents sur la durée de vie de souris. Les résultats préliminaires montrent que les deux le test de la tige tournante et le test de la poutre modifiée peuvent être utilisés pour identifier les changements dans les performances de l&#39;équilibre au cours du vieillissement comme une alternative à plus diffictechniques ult et invasives telles que (VOR) mesures vestibulo-oculaire.

Rotarod La performance motrice chez la souris a été décrit comme le temps de tomber (TTF) enregistrée pour chaque souris sur 8 essais. Grâce à ces mesures de TTF, les courbes de formation pour chaque souris peuvent être tracées. Figure 2 montre des exemples de la performance du moteur d&#39;un 1 mois-vieille souris et un de 9 mois vieille souris au cours de 8 essais. Ces courbes de formation montrent une augmentation de la TTF au cours des 3-5 premiers essais suivis d&#39;un pl...

contrôle du moteur et la performance de la balance sont connus à se détériorer avec l&#39;âge. Ce document présente un certain nombre de tests comportementaux non invasives standard avec l&#39;ajout d&#39;un stimulus rotatif simple de contester le système et afficher les changements vestibulaires de la performance de l&#39;équilibre dans un modèle murin de vieillissement.

Age related decline in balance performance is associated with deteriorating muscle strength, motor coordination and vestibular function. While a number of ...

L'objectif général de l'expérience suivante est d'identifier les modifications de la performance d'équilibre dans un modèle murin du vieillissement. Cela est réalisé en entraînant d'abord les souris sur un appareil afin de leur permettre de s'y habituer, puis, dans un deuxième temps, d'apprendre la tâche. Les souris sont ensuite testées sur l'appareil pour évaluer leur coordination motrice et leur équilibre.Ensuite, les souris sont soumises à un stimulus vestibulaire et réévaluées sur l'appareil. Là encore, les résultats montreront des modifications de l'équilibre avec l'âge, selon les données obtenues avec la barre rotative et la poutre d'équilibre. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, comme le test du réflexe vestibulo-oculaire, qui suit les mouvements oculaires, est qu'il s'agit d'une méthode simple et non invasive pour mesurer la performance d'équilibre.Bien que cette méthode puisse fournir des informations sur les modifications liées à l'âge de la performance d'équilibre chez les souris, elle peut également être appliquée à d'autres systèmes, tels que les troubles érythroïdes et neuromusculaires. La démonstration des procédures sera effectuée par Victoria Tongue, candidate au doctorat dans mon laboratoire, ainsi que par Edward Dabney, assistant de recherche dans le laboratoire, et Thomas Burton, responsable de la plateforme de comportement animal de l'Institut Bosch à l'Université de Sydney.Dans le test de la tige rotative, les souris doivent marcher le long de tiges tournant avec une accélération croissante. Lorsqu'elles perdent l'équilibre, elles déclenchent un capteur magnétique. Les paramètres évalués sont enregistrés par l'appareil de la tige rotative.Commencez par installer les manchons dans chaque voie du rotor. Des manchons de différentes tailles sont fournis pour les souris et les rats. Toutefois, l'utilisation des manchons pour rats avec les souris fonctionne bien et empêche les souris de s'accrocher aux manchons au lieu de tomber.Positionnez ensuite les plateformes magnétiques d'atterrissage sur le fil, sous chaque voie de la tige du rotor. Veillez à ce que les plateformes ne soient pas inclinées ni en contact avec le sol, et qu'elles soient aussi proches que possible de la paroi magnétique droite sans la toucher. Enfin, faites glisser deux.Des panneaux en plastique transparent placés devant chaque voie de la tige du rotor. Le panneau le plus court est positionné en dessous et le panneau le plus long en dessus. Introduire les cages à souris dans la salle de test 10 minutes avant le début des essais, le temps que les souris s'acclimatent.Saisissez les paramètres du test de la tige rotative accélérée. Commencez par régler la durée maximale du test à 60 secondes. Ensuite, définissez le nombre de voies à utiliser ou le nombre de souris à tester.Ensuite, réglez les vitesses. Réglez le test pour qu'il démarre à 5 tr/min et fixez la vitesse maximale à 44 tr/min. Augmentez progressivement la vitesse sur une période de 60 secondes.Enfin, réglez les paramètres du bâtonnet pour l'utilisation de bâtonnets pour rats tournant dans le sens direct. Lorsque les souris sont prêtes, placez le premier groupe à tester sur les bâtonnets immobiles pendant cinq minutes, afin de leur permettre de s'acclimater. Ensuite, poussez doucement les souris pour qu'elles soient orientées vers l'arrière de la tige rotative et commencez le test lorsque toutes les souris sont tournées dans le bon sens.Après que les souris soient tombées, remettez-les dans leurs cages pendant 10 minutes avec un accès libre à la nourriture et à l'eau entre les essais, le temps que les souris se reposent. Nettoyez les déchets animaux sur les pistes en baguettes et les plates-formes d'atterrissage. Réinitialisez également les plates-formes d'atterrissage pour le test suivant. Répétez le processus pour un total de huit essais par souris.Les trois à cinq premiers essais servent d'essais d'entraînement. Après les huit essais, nettoyer soigneusement les rails et les plates-formes d'atterrissage du rotor avec de l'éthanol à 70 %, et nettoyer les panneaux en plastique transparent avec un détergent doux. Dans ce test, les souris marchent sur une poutre exposée d'un mètre de long et de 14 millimètres de diamètre, suivant une légère pente, jusqu'à leur objectif.Une chambre sombre contenant le dôme d'hébergement du sujet. Deux caméras sont positionnées de chaque côté de la poutre de balance. Elles sont orientées de manière à capturer l'ensemble de la longueur de la poutre. Les enregistrements vidéo documentent les essais situés sous la poutre.Le sol est recouvert d'un matériau amortissant. Les souris qui tombent doivent être ramassées immédiatement et placées à l'intérieur de la boîte-objectif pour qu'elles se remettent. L'intérieur de la boîte-objectif est doublé d'une serviette en papier afin de faciliter l'élimination des déchets animaux entre les tests.La boîte est suffisamment grande pour qu'un dôme d'habitat puisse y être installé. Avant de tester une souris, placez-la dans la boîte cible pendant deux minutes. Si une souris tente de quitter la boîte cible, couvrez l'ouverture du faisceau pendant cinq secondes avec une main gantée afin de l'empêcher de sortir à nouveau.Ensuite, il faut entraîner la souris à accomplir la tâche. Placez-la sur la poutre juste à l'extérieur de la boîte-objectif et laissez-la marcher jusqu'à la boîte-objectif. Laissez-la alors se reposer une minute, puis replacez-la plus loin sur la poutre et laissez-la remonter à nouveau.Donnez toujours à la souris une minute dans la boîte de but entre les essais d'entraînement. Éloignez progressivement la souris vers l'extrémité du faisceau jusqu'à ce qu'elle marche depuis la ligne de départ sans assistance. Pour effectuer un test, démarrez l'enregistrement, puis placez la souris sur la ligne de départ.Arrêtez l’enregistrement lorsque la souris atteint la boîte ou lorsqu’elle tombe de la poutre entre les essais. Laissez la souris se reposer une minute dans la boîte cible, et en attendant, nettoyez toute urine ou fèces présentes sur la poutre et la mousse sous-jacente. Chaque souris doit être testée cinq fois de cette manière.Pour ajouter un défi vestibulaire supplémentaire à ce test, appliquez d'abord le rotateur, habituez les souris au bruit du rotateur à trois hertz. Faites-le fonctionner pendant 20 secondes. Ensuite, transférez la souris dans la chambre placée sur le rotateur.Si vous éprouvez des difficultés à descendre la souris dans la chambre, donnez-lui un objet à saisir avant d'abaisser ensemble la souris et l'objet dans la chambre. Une fois la souris dans la chambre, retirez l'objet, remettez le couvercle en place et faites fonctionner le rotateur pendant 20 secondes. À trois hertz, démarrez l'enregistrement vidéo pendant la rotation.Après 20 secondes, éteignez le rotateur et arrêtez manuellement la roue le plus rapidement possible. Ensuite, déplacez immédiatement la souris jusqu'à la ligne de départ et laissez-la terminer l'essai. Comme d'habitude, ce test peut être effectué de une à trois fois avant que les souris cessent de coopérer.N'oubliez jamais de nettoyer le fléau de la balance et de changer la serviette en papier entre les souris pour la tige rotative. Testez le temps de chute pour une souris. Une souris d'un mois et une souris de neuf mois ont augmenté régulièrement au cours des essais un à cinq et ont donc été considérées comme des essais d'entraînement.Les données issues de la zone où le score est stabilisé, indiquée par une ligne pointillée, ont été utilisées pour l'analyse. Des souris âgées d'un mois ont pu rester sur le cylindre tournant significativement plus longtemps que des souris âgées de neuf mois. Les données provenant d'un faible effectif sont représentées comme la moyenne plus ou moins un écart-type.L'impact de la stimulation vestibulaire sur la performance d'équilibre était également plus important avec l'âge. Une 22e rotation à trois hertz avant l'essai a augmenté le temps nécessaire pour franchir la poutre d'équilibre entre les lignes de départ et d'arrivée chez les souris de neuf et treize mois, mais pas chez les jeunes souris. La significativité a été évaluée à l'aide d'une analyse de mesures répétées dans Nova avec un test post hoc TUI.Lors de l'exécution de cette tâche, il est important de se rappeler de transférer l'animal du défi vestibulaire vers l'appareil le plus rapidement possible afin de minimiser la probabilité que l'animal se remette du stimulus avant d'avoir terminé la tâche suivant cette procédure. D'autres techniques telles que la PCR, l'imagerie calcique et l'électrophysiologie en enregistrement par électrode à patch peuvent être utilisées pour répondre à des questions supplémentaires, comme savoir si les modifications des performances motrices et de l'équilibre peuvent être corrélées à des changements dans la fonction des cellules ciliées vestibulaires.

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