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DOI: 10.3791/51609-v
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L’objectif global de cette procédure est de générer des cellules progénitrices de la crête neurale à partir de cellules souches pluripotentes humaines dans un protocole court, reproductible et défini. Ces cellules peuvent ensuite être utilisées soit pour l’étude in vitro de maladies liées à la crête neurale, soit pour la différenciation continue de ces cellules en cellules de descendance. Ceci est accompli en plaquant d’abord une forte densité de cellules souches pluripotentes humaines dans une monocouche sur matrigel.
La deuxième étape consiste à différencier les cellules en cellules neuroépithéliales à l’aide d’une séquence définie et d’une combinaison de petites molécules qui affectent les principales voies de signalisation. Ensuite, les cellules neuroépithéliales sont replaquées et différenciées en cellules progénitrices de la crête neurale. La dernière étape consiste à isoler les cellules de la crête neurologique à l’aide du tri cellulaire activé par fluorescence.
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