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DOI: 10.3791/51863-v
Ji-Yoen Kim*1, Stacy D. Grunke*1, Yona Levites2, Todd E. Golde2, Joanna L. Jankowsky1,3
1Department of Neuroscience,Baylor College of Medicine, 2Department of Neuroscience, Center for Translational Research in Neurodegenerative Disease,University of Florida, 3Department of Neurology and Department of Neurosurgery,Baylor College of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ici, nous démontrons une technique de transduction neuronale généralisée par injection intraventriculaire d’un virus adéno-associé dans le cerveau de souris néonatale. Cette méthode offre un moyen rapide et facile d’obtenir l’expression à vie des transgènes délivrés par le virus.
L’objectif global de cette procédure est de transduire viralement les neurones dans tout le cerveau. Ceci est accompli par cryo-anesthésie des petits nouveau-nés, suivie du transfert du nouveau-né vers l’étape refroidie pour l’injection. Ensuite, identifiez le site d’injection pour cibler les ventricules latéraux entre la suture Lambda et chaque œil ou latéral de la suture sagittale à mi-chemin entre Lambda et Bgma.
La dernière étape consiste à insérer l’aiguille à la bonne profondeur et à perfuser lentement jusqu’à deux microlitres de solution virale dans le ventricule latéral de chaque hémisphère. En fin de compte, une étiquette fluorescente ou une immunofluorescence pour le gène d’intérêt est utilisée pour montrer le modèle d’expression du transgène résultant de l’injection intraventriculaire. En général, les personnes qui ne connaissent pas cette technique auront du mal à cibler avec précision les ventricules latéraux.
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