À grande échelle de poisson zèbre embryonnaire Coeur Dissection d'analyse transcriptionnelle

L’objectif global de cette procédure est de collecter des cœurs par dissection manuelle rapide à partir d’embryons de poisson-zèbre vivants afin d’obtenir des MR.NA spécifiques au cœur. Ensuite, les cœurs disséqués sont séparés des débris embryonnaires en deux étapes de filtration rapide. Ensuite, les cœurs marqués par fluorescence sont triés manuellement des débris restants.

Enfin, l’ARN spécifique du cœur est extrait des cœurs collectés. En fin de compte, le protocole de dissection cardiaque est utilisé pour collecter des quantités suffisantes de cœurs embryonnaires pour effectuer une analyse du transcriptome. Cette méthode aidera à poser des questions clés dans le domaine du développement du cœur des poissons d’argent, telles que quels transcrits sont exprimés dans le cœur à différents stades de développement, et à comparer les expressions cardiaques sauvages et mutantes Pour obtenir des embryons de poisson-zèbre pour l’extraction cardiaque, croisez des poissons transgéniques adultes exprimant une protéine fluorescente dans le cœur, telle que le transgénique mile sept EGFP sous le microscope stéréoscopique.