20 juin 2015
Maillage (TM) la migration trabéculaire dans l'espace du canal de Schlemm peut être induite par élévation de la pression aiguë par Sphygmomanomètre oculaire, et observé par domaine spectral tomographie par cohérence optique. L'objectif de cette méthode est de quantifier la réponse morphométrique de la sortie voies vivant à l'élévation de la pression aiguë dans les tissus vivants in situ.
L’objectif général de cette procédure est de quantifier la réponse morphométrique de la voie d’écoulement vivante à une élévation aiguë de la PIO dans des yeux humains vivants in situ en examinant le réseau trabéculaire dans des conditions physiologiques. Ceci est accompli en mesurant d’abord la pression dans l’œil au départ et en imageant le limbe, l’emplacement de la voie d’écoulement de l’humeur aqueuse par tomographie par cohérence optique. La deuxième étape consiste à répéter les mesures de pression et les balayages des limbes pendant que la PIO est élevée avec l’application de cinq et 10 grammes de pression sur la sclérotique latérale à l’aide d’un dynamomètre ophtalmique.
Ensuite, après avoir détendu les muscles lisses avec une goutte de tropic aide. Les mesures de pression et les scans des limbes sont répétés sans. Et pendant l’élévation de l’IOP, les données d’image sont ensuite exportées et traitées, et la morphologie de la structure de la voie d’écoulement mesurée : la comparaison du changement morphologique en réponse à l’élévation de l’IOP avec et sans relaxation des muscles lisses fournit des informations sur les propriétés mécaniques du réseau trabéculaire.
Le principal avantage de cette technique par rapport à d’autres techniques, telles que la microscopie à force atomique, est que nous mesurons le réseau trabéculaire dans l’œil vivant et examinons la réponse mécanique à la perturbation de la PIO. Cette réponse comprend l’influence du muscle lisse environnant qui la soutient. En général, les personnes qui ne connaissent pas cette méthode auront d’abord du mal car il n’y a pas de fixation, de cible, et la fixation ou la position des yeux dans cette méthode est principalement ajustée par commande verbale.
De plus, lorsque nous appliquons le dynamomètre abdominal, ce qui se passe, c’est qu’il provoque un léger décalage de la position des yeux. Par conséquent, le balayage doit être réaligné avant l’acquisition de l’image. Commencez par l’élévation de la pression.
Une pression de base est d’abord prise à l’aide de l’application Goldman La chronométrie met une goutte de propane à 0,5 % sur l’œil et attend trois minutes. Divisez le groupe test en deux cohortes. La première cohorte reçoit 30 grammes de pression et la deuxième cohorte cinq grammes de pression.
Appliquez doucement une pression sur la sclérotique temporale à l’aide du dynamomètre ophtalmique. Ensuite, attendez cinq minutes et appliquez 10 grammes de pression sur la deuxième cohorte et prenez une autre mesure étant la mesure de pression élevée. Effectuez maintenant une tomographie par cohérence optique du siège oculaire du sujet, du sujet sur le scanner, et entrez ses données démographiques.
Ensuite, utilisez des commandes verbales pour centrer le balayage sur le limbe temporal en dirigeant le regard du patient dans la direction nasale. Une fois le limbe temporal centré, effectuez un balayage de base. Maintenant, mettez une goutte de propane à 0,5 % sur l’œil.
Attendez trois minutes et faites un autre balayage tout en appliquant une pression à l’aide d’une cohorte de dynamomètre almo, une reçoit 30 grammes de pression et la deuxième cohorte reçoit cinq grammes de pression. Pour la deuxième cohorte, attendez cinq minutes après l’application initiale de la pression et appliquez 10 grammes de pression tout en prenant un troisième balayage de l’œil. Comme auparavant, seul un bon scan est acceptable.
Après avoir exporté les données et les avoir importées dans l’image J, convertissez-la en une pile d’images TIFF et utilisez le processus de contraste local amélioré avec les paramètres suivants. Paramètre taille de bloc de 31, bacs Instagram à 256, pente maximale à cinq masques définie sur aucun, et définition de l’option rapide comme activée. Faites-le sur chaque image de la pile d’images et enregistrez les modifications.
Ajustez ensuite la taille du rapport hauteur/largeur à 2048 Par 10 24, retournez les images verticalement. Définissez la distance d’échelle sur 2048. Définissez la distance connue sur 4 000 et le rapport hauteur/largeur des pixels sur un.
Les scans peuvent ensuite être analysés pour les traversées de navires. Faites tourner lentement la molette de la souris pour examiner visuellement les balayages afin d’identifier un passage de navire distinctif. Pour servir de point de référence dans les numérisations, notez le numéro d’image et le numéro de cadre de référence dans la feuille de calcul d’analyse.
Le défilement des cadres dans le volume de numérisation a deux objectifs. Tout d’abord, nous recherchons des points de repère distinctifs dans les vaisseaux aqueux. Ceux-ci seront utilisés pour aligner les volumes de balayage pris à différents moments.
Deuxièmement, en faisant défiler le volume, nous intégrons dans notre esprit la morphologie des vaisseaux aqueux et utilisons cette morphologie pour distinguer les vaisseaux aqueux du canal de Schlemm. À l’aide de l’outil de sélection à main levée, concentrez-vous sur le canal de Schlemm Tout d’abord, prenez des mesures de sa section transversale. Segmentez manuellement le canal en faisant le tour de la limite avec la souris.
Maintenez la touche CTRL D enfoncée pour le cadre de l’image actuelle afin de documenter l’emplacement de la ligne de segmentation. Maintenez ensuite la touche CTRL M enfoncée pour mesurer automatiquement l’aire du canal de Schlemm. Lorsqu’on l’agrandit, on voit qu’il n’y a pas de limite distincte du canal de Schlemm.
Pour cette raison, une approche demi-max pleine largeur est utilisée a priori comme ligne directrice pour déterminer la limite de la segmentation. Copiez maintenant l’aire de la section du canal Schlemm et le numéro de cadre de mesure dans la feuille de calcul d’analyse. Ensuite, désélectionnez la zone délimitée et appuyez sur la flèche droite.
Appuyez trois fois sur la touche pour faire avancer trois images d’image. Répétez ce processus jusqu’à ce que l’aire de la section transversale du canal Schlemm ait été mesurée en 10 images. Appuyez maintenant sur la touche fléchée gauche pour revenir au premier cadre de mesure et commencer à mesurer la longueur du canal Schlemm.
Sélectionnez l’outil de segment droit dans la barre d’outils. Tracez une ligne droite entre les emplacements les plus antérieurs et les plus postérieurs sur le canal de Schlemm sur le cadre actuel. Maintenez la commande D enfoncée pour documenter l’emplacement de la ligne de segmentation.
Maintenez ensuite la commande M enfoncée pour mesurer la longueur du canal Schlemm. Copiez ensuite la longueur du canal de Schlemm et le numéro d’image dans la feuille de calcul d’analyse, désélectionnez la longueur et, toutes les trois images où le volume a été mesuré, prenez la mesure de la longueur du canal. Enfin, mesurez l’épaisseur du maillage trabéculaire dans trois échantillons.
Revenez au premier cadre de mesure et tracez une ligne droite de la position la plus antérieure sur le canal jusqu’au bord du réseau trabéculaire et de la chambre intérieure. Assurez-vous que la ligne est perpendiculaire à la bordure. Maintenez maintenant la commande enfoncée et appuyez sur D, puis appuyez sur M pour obtenir la mesure de la ligne.
Copiez toujours ces mesures dans la base de données avec l’image à partir de laquelle elles sont prises. Deuxièmement, tracez une ligne entre le centre du canal et la bordure du grillage et de la chambre antérieure. La ligne doit être perpendiculaire à la bordure.
Maintenez ensuite la touche Ctrl enfoncée et appuyez sur D pour l’image actuelle uniquement. Troisièmement, tracez une ligne entre l’emplacement le plus postérieur du canal et le bord du treillis avec la chambre antérieure. Assurez-vous également que cette ligne est perpendiculaire à la bordure.
Maintenez ensuite la touche enfoncée et appuyez sur D, puis sur M.Répétez l’opération en prenant ces trois mesures d’épaisseur sur chacune des neuf autres images précédemment analysées. Ensuite, procédez à l’analyse des données à l’aide des protocoles décrits, les effets des petits et grands changements de pression interoculaire sur l’écoulement sortant, tractés, des paramètres morphologiques tels que le canal de Schlemm, la section transversale ont été obtenus. Des niveaux élevés d’augmentation de la pression produisent un affaissement observable du canal tandis que de petites augmentations de la pression interoculaire ont été prises en compte Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en 10 à 15 minutes si elle est correctement exécutée.
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Cette étude examine la réponse morphométrique du trabéculum (TM) à une élévation aiguë de la pression intraoculaire (PIO) dans des yeux humains vivants. À l’aide de la tomographie par cohérence optique, la migration du TM dans l’espace du canal de Schlemm est quantifiée dans des conditions physiologiques.
Cette technique permet une mesure directe de la réponse mécanique du trabéculum à une élévation de la pression intraoculaire dans des yeux humains vivants, fournissant des données physiologiquement pertinentes pour la validation de cibles thérapeutiques dans le glaucome. En quantifiant les changements morphométriques dans des conditions préservant les interactions tissulaires natives, elle contribue à l'analyse mécanistique et à la réduction des risques associés aux hypothèses concernant la voie d'évacuation. L'approche comble le fossé entre les modèles précliniques et la pathophysiologie humaine, renforçant la confiance prédictive dans le choix des cibles pour les thérapies abaissant la pression intraoculaire.
Cette méthode s'inscrit dans le continuum de découverte allant de l'hypothèse sur la cible à la validation préclinique, en fournissant des données biomécaniques d'origine humaine sur le tractus de sortie.