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DOI: 10.3791/52709-v
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This report details a method for transplanting murine thymi from donor mice of varying ages into immunodeficient recipients. This approach facilitates the in vivo analysis of T-cell development and thymic selection events.
Ce rapport fournit une description détaillée de la transplantation de thymi murin de souris donneuses de différents âges sous la capsule rénale de receveurs de souris immunodéficientes. L’objectif de cette approche est de modéliser le développement des lymphocytes T et les événements de sélection thymique in vivo.
L’objectif global de cette procédure est de permettre l’analyse in vivo de la sélection négative des lymphocytes T à un moment précis de l’ontogenèse des lymphocytes T. Pour ce faire, on récolte d’abord le thymus d’une souris donneuse à l’âge spécifique d’intérêt. Dans un deuxième temps, le rein de la souris skid d’un receveur est exposé et le thymus du donneur est implanté chirurgicalement sous la capsule rénale.
À la dernière étape, le destinataire est fermé. En fin de compte, la reconstitution réussie du compartiment périphérique des lymphocytes T peut être évaluée par cytométrie en flux. Cette méthode permet l’étude temporelle de la sélection thymique et de la production de lymphocytes T, fournissant essentiellement un instantané de la production de lymphocytes T à un moment particulier d’intérêt lors de l’antigène des lymphocytes T. Pour retirer le thymus d’une souris adulte ou nouveau-née, commencez par coucher l’animal en position couchée dorsale sur une serviette en papier absorbante stérile et vaporisez les poils avec de l’éthanol à 70 %.
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